Przejściowy model niedrożności tętnicy środkowej mózgu

Model niedrożności tętnicy środkowej mózgu jest szeroko stosowany do symulacji udaru niedokrwiennego u myszy. Model ten pozwala na zbadanie czasowej progresji uszkodzeń niedokrwiennych, ocenę skuteczności środków neuroprotekcyjnych oraz zbadanie roli określonych genów i szlaków w patologii udaru mózgu, a ostatecznym celem jest znalezienie nowych potencjalnych metod leczenia. Wdrożenie technik neuroobrazowania, takich jak rezonans magnetyczny, pozwala na lepszą diagnozę, poprawę oceny wyników i zmniejszenie liczby zwierząt potrzebnych w każdym badaniu.

Protokół ten po raz pierwszy zawiera jasne i szczegółowe wyjaśnienie najczęściej stosowanej techniki wywoływania przejściowej niedrożności tętnicy środkowej mózgu. Co więcej, wdraża tę technikę poprzez wprowadzenie modyfikacji recesji znieczulenia z czasem okluzji, zmniejszając szkodliwy wpływ wydłużonego czasu znieczulenia. Aby rozpocząć, umieść znieczuloną mysz na stole operacyjnym.

Utrzymuj temperaturę ciała za pomocą sondy doodbytniczej podłączonej do poduszki grzewczej. Wykonaj nacięcie na skórze głowy w kierunku szwu strzałkowego, zaczynając od uszu do obszaru między oczami. Cofnij skórę i usuń okostną po prawej stronie czaszki.

Następnie znajdź współrzędne, 2,5 milimetra w bok od bregma. Nałóż cyjanoakrylan na uchwyt dopplerowski i przymocuj go do laserowego przepływomierza dopplerowskiego. Po wyschnięciu kleju podłącz sondę dopplerowską.

Następnie sprawdź, czy odczyt sygnału jest prawidłowy do oceny przepływu krwi w mózgu. Aby wykonać niedrożność tętnicy, obróć mysz do pozycji leżącej na plecach i przymocuj ją do stołu operacyjnego za pomocą taśmy medycznej. Następnie wykonaj nacięcie w linii środkowej na szyi.

Pociągnij skórę na boki, a następnie odciągnij gruczoły ślinowe za pomocą retraktorów. To odsłania terytorium tętnicy szyjnej. Zidentyfikuj anatomię naczyniową wspólnej tętnicy szyjnej lub CCA, ICA i ECA, a także różne tętnice z nich pochodzące.

Aby ułatwić obsługę, odłącz CCA, a następnie ECA od tkanki łącznej. Następnie kauteryzuj tętnicę tarczycy górną i odłącz ICA od tkanki łącznej. Sprawdź ponownie, aby upewnić się, że główne tętnice są całkowicie odłączone od tkanki łącznej.

Następnie owiń jedwabne szwy 6-0 wokół ECA na rozwidleniu językowym szczęki. Następnie zszyj wokół CCA. Umieść klips naczyniowy przerywający krążenie krwi z ICA.

Wykonaj małe nacięcie w ECA w pobliżu obszaru, w którym znajduje się ciasny węzeł. Wkładaj żyłkę, aż gruba powłoka całkowicie dostanie się do światła tętnicy. Zaciśnij drugi węzeł, aby utrzymać żyłkę wewnątrz tętnicy i zapobiec wypychaniu jej na zewnątrz przez ciśnienie wywierane przez krew.

Przetnij ECA poniżej pierwszego węzła i obróć kikut, aby ustawić go w kierunku ICA. Przesuwaj żyłkę przez ICA aż do punktu, w którym MCA się rozgałęzia. Okluzja znajduje odzwierciedlenie w nagłym spadku przepływu krwi w odczycie LDF.

Po 40 minutach ponownie znieczul mysz i połóż ją z powrotem na stole operacyjnym. Usuń szwy z szyi. Po 45 minutach okluzji poluzuj węzeł przytrzymujący żyłkę na miejscu.

Pociągnij powoli i delikatnie za filament i sprawdź, czy następuje rekanalizacja tkanek. Następnie wyciągnij filament i zaciśnij węzeł, aby zapobiec utracie krwi. Oczyść krew i rozwiąż węzeł CCA.

Upewnij się, że nie ma uszkodzeń ściany tętnicy. Usuń retraktory i zmień położenie mięśni, gruczołów i skóry. Zszyj skórę za pomocą szwu 6-0 i nałóż środek dezynfekujący.

Odłącz sondę dopplerowską i odłącz uchwyt. Na koniec zszyj i zdezynfekuj skórę głowy. Wynik przejściowej procedury niedrożności tętnicy środkowej mózgu oceniano za pomocą neuroobrazowania MRI in vivo, Ewolucja zmiany oceniana w różnych punktach czasowych po reperfuzji wykazała, że progresja objętości zmiany trwa około dwóch dni.

Testy behawioralne, takie jak test siły chwytu, wykazały utratę siły u myszy po 24 godzinach przejściowej niedrożności tętnicy środkowej mózgu Ponadto, po stymulacji w teście narożnym, myszy wykazywały preferencję do obracania się na prawą stronę, która była ipsilateralna w stosunku do zmiany, co wskazuje na udane zamknięcie tętnicy środkowej mózgu po prawej stronie.