Name: Zbieranie w terenie i rutynowa identyfikacja laboratoryjna Rhodiola crenulata (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-10-27T13:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 44 s
Description: Poznaj metody identyfikacji Rhodiola crenulata w badaniach etnobotanicznych i farmakognostycznych. Protokół obejmuje obserwację morfologiczną, analizę chromatograficzną i badania mikroskopowe roślin leczniczych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana przez Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Chin (81973569, 82274207 i 82104533), Xinglin Scholar Research Promotion Project Uniwersytetu Chengdu TCM (XKTD2022013) oraz Kluczowy Program Badawczo-Rozwojowy Ningxia (2023BEG02012).

Rhodiola crenulata jest zbierana z Zhuoda Snow Mountain, Ganzi County, Ganzi Tibetan Autonomous Prefecture, Prowincja Syczuan, Chiny (N 31.44570°, E 99.96086°, 4892 m). Rośliny zostały uwierzytelnione jako autentyczne przez profesora Yi Zhanga ze Szkoły Medycyny Etnicznej Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Chengdu.
1. Kolekcja Rhodiola crenulata
<ol>
	<li>Sfotografuj mapę siedlisk Rhodiola crenulata.</li>
	<li>Sfotografuj całą roślinę, liście, kielich i kłącze Rhodiola crenulata.</li>
	<li>Użyj łopaty, aby usunąć chwasty i połamane kamienie w promieniu 1 m od Rhodiola crenulata, aby zapewnić późniejsze płynne wydobycie.</li>
	<li>Wykop ziemię motyką, aż zobaczysz całą ryzosferę i zbierz korzeń palowy. 
	UWAGA: Korzenie i kłącza Rhodiola crenulata stosowane w częściach leczniczych należy zbierać jesienią, kiedy łodygi kwiatowe więdną.</li>
</ol>
2. Identyfikacja charakterystyczna
<ol>
	<li>Obserwuj gołym okiem cechy wyglądu Rhodiola crenulata: cylindryczne i krótkie korzenie palowe i kłącza, brązową powierzchnię, błoniasty żółty naskórek z różowym wzorem oraz pomarańczowo-czerwone lub bordowe plastry.</li>
	<li>Zidentyfikuj go po zapachu: Daje pachnący zapach w pobliżu nosa.</li>
	<li>Zidentyfikuj to po smaku: Weź mały kawałek korzenia do ust, najpierw popijaj, a następnie przeżuwaj, smakuj lekko gorzko, a następnie słodko.</li>
</ol>
3. Mikroskopowa identyfikacja granulek skrobi w proszku leczniczym
<ol>
	<li>Usuń ziemię z powierzchni Rhodiola crenulata za pomocą pędzla, włóż ją do piekarnika w temperaturze 40 °C i obracaj zioła co 24 godziny 
	UWAGA: Łatwość łamania materiałów leczniczych jest uważana za standard suszenia wilgoci.</li>
	<li>Sproszkować suszone materiały lecznicze za pomocą maszyny do sproszkowania i przefiltrować proszek leczniczy za pomocą sita z zawartością substancji leczniczych nr 3 (patrz tabela materiałów).</li>
	<li>Weź czyste szkiełko podstawowe (patrz Tabela materiałów), wykop proszek igłą preparacyjną (patrz Tabela materiałów) i umieść go równomiernie na jednej trzeciej szkiełka w odległości 2 mm.</li>
	<li>Użyj szklanego zakraplacza (patrz Tabela materiałów), aby dodać kroplę wody dejonizowanej do proszku. Użyj pęsety (patrz Tabela materiałów), aby przytrzymać jeden koniec szkła nakrywkowego (patrz Tabela materiałów), aby szybko dotknąć poziomu cieczy i przykryć proszek. 
	UWAGA: Użyj anatomicznej igły, aby delikatnie wymieszać wodę i proszek leczniczy, aby zapewnić równomierne mieszanie próbki. Między szkiełkiem, proszkiem i szkłem nakrywkowym nie powinno być pęcherzyków powietrza.</li>
	<li>Otwórz mikroskop (patrz Tabela materiałów) i umieść szkiełko w kroku 3.4 na platformie, aby je zabezpieczyć. Dostosuj źródło światła i spiralę zgrubnego ogniskowania, aby zobaczyć proszek. Wyreguluj cienką spiralę parafokalną, aż tkanki będą wyraźnie widoczne. Przełącz się na obiektyw 40x i obserwuj granulki skrobi. 
	UWAGA: Skrobię ziarna przedstawiające się jako pojedyncze lub wielokrotne ziarna, a punkt pępowinowy ma kształt jodełki lub pęknięcia.</li>
</ol>
4. Mikroskopowa identyfikacja cewników, komórek korka, włókien, komórek miąższu drewna i mas pigmentowych w proszku leczniczym
<ol>
	<li>Weź czyste szkiełko podstawowe (patrz Spis materiałów), wykop proszek igłą do preparowania (patrz Spis materiałów) i umieść go na jednej trzeciej szkiełka.</li>
	<li>Użyj szklanego zakraplacza (patrz Tabela materiałów), aby dodać kroplę hydratu chloralu (patrz Tabela materiałów) do proszku. Weź szkiełko z pęsetą (patrz Tabela Materiałów) i podgrzej je w lampie alkoholowej trzy razy, za każdym razem przez 1 s. 
	UWAGA: Podczas podgrzewania należy unikać pęcherzyków powietrza. Ciecz pozostaje niepłynąca, co oznacza, że penetracja została zakończona.</li>
	<li>Użyj szklanego zakraplacza, aby dodać kroplę gliceryny (patrz Tabela materiałów). Użyj pęsety, aby przytrzymać jeden koniec szkła nakrywkowego, aby szybko dotknąć poziomu płynu.</li>
	<li>Otwórz mikroskop i umieść szkiełko na platformie, aby je zabezpieczyć. Dostosuj źródło światła i spiralę zgrubnego ogniskowania, aby zobaczyć proszek. Wyreguluj cienką spiralę parafokalną, aż tkanki będą wyraźnie widoczne. Obserwuj cewnik, komórki korka, włókna, komórki miąższu drewna i blok pigmentowy, przełączając się na soczewkę obiektywu 40x. 
	UWAGA: Wielokątny lub długi wielokąt komórek korka, spiralne naczynie o wyraźnej spiralnej strukturze, miąższ ksylemu zawierający kryształy piasku szczawianowo-wapniowego oraz czerwony lub brązowo-czerwony blok pigmentowy.</li>
</ol>
5. Przygotowanie próbek chromatografii cienkowarstwowej (TLC) Rhodiola crenulata i jej odniesienie
<ol>
	<li>Położyć papier wagowy na wadze (patrz Tabela materiałów) i zważyć 3 g proszku z różeńca górskiego.</li>
	<li>Pobrać proszek do stożkowej butelki o pojemności 100 ml (patrz Tabela materiałów) i dodać 25 ml metanolu za pomocą dużej pipety brzusznej (patrz Tabela materiałów). Włóż stożkową butelkę do przyrządu ultradźwiękowego. Ustaw moc na 250 W, częstotliwość na 40 kHz, a czas na 30 min (patrz Tabela materiałów) i włącz instrument. 
	UWAGA: Zadaniem przyrządu ultrasonograficznego jest zapewnienie, że proszek Rhodiola crenulata zostanie całkowicie rozpuszczony bez wpływu na wyniki kolejnych eksperymentów chromatografii cienkowarstwowej.</li>
	<li>Wyjmij stożkową butelkę i opłucz zewnętrzną butelkę pod bieżącą wodą do temperatury pokojowej (RT).</li>
	<li>Odessać 800 μl płynu przygotowanego w kroku 5.3 za pomocą strzykawki o pojemności 1 ml. Przefiltrować za pomocą mikroporowatej membrany filtracyjnej o wielkości 0,22 μm (patrz tabela materiałów) i zebrać 400 μl roztworu próbki środkowej Rhodiola crenulata w butelce na próbkę chromatograficzną.</li>
	<li>Zważyć i dodać 2 mg salidrozydu, tyrozolu i kwasu galusowego (patrz tabela materiałów) odpowiednio do 3 oddzielnych stożkowych butelek o pojemności 100 ml. Dodaj 25 ml metanolu za pomocą dużej pipety brzusznej do każdej stożkowej butelki.</li>
	<li>Włóż stożkową butelkę do przyrządu ultradźwiękowego, ustaw moc na 250 W, częstotliwość na 40 kHz, czas na 30 minut i powtórz krok 5.3 (patrz Tabela materiałów).</li>
	<li>Odessać 800 μl płynu przygotowanego w kroku 5.6 za pomocą strzykawki o pojemności 1 ml. Przefiltrować za pomocą mikroporowatej membrany filtracyjnej o wielkości 0,22 μm (patrz tabela materiałów) i zebrać 400 μl środkowego roztworu wzorcowego salidrozydu, tyrozolu i kwasu galusowego w odpowiednich butelkach na próbki chromatograficzne</li>.
</ol>
6. Identyfikacja TLC
<ol>
	<li>Odpipetować trichlorometan (5 ml), octan etylu (4 ml), metanol (2 ml) i kwas mrówkowy (0,5 ml) (patrz tabela materiałów). Dodać z jednej strony cylindra do chromatografii dwuzbiornikowej (patrz tabela materiałów), wstrząsnąć i równomiernie wymieszać. Zakryj górną głowicę cylindrów.</li>
	<li>Umieścić kwas galusowy, salidrozyd, roztwór wzorcowy tyrozolu i roztwór Rhodiola crenulata na stojaku na próbki w pozycjach A1-A4.</li>
	<li>Umieść arkusz silikonowy o wymiarach 5 cm x 10 cm (patrz tabela materiałów) na stole do pobierania próbek. Uruchom automatyczną maszynę do pobierania próbek (patrz Tabela materiałów) i otwórz zawór sterujący powietrzem.</li>
	<li>Otwórz oprogramowanie visionCATS (patrz tabela materiałów). Kliknij pozycję Nowy > Nowy folder (o nazwie Rhodiola crenulata sample test) > OK. Kliknij pozycję Nowa metoda (nazwa Rhodiola crenulata sample test) > OK > ATS 4.</li>
	<li>Kliknij przycisk Zakończ definicję kroku. Kliknij przycisk Śledź przypisanie, aby edytować opis (kwas galusowy, salidrozyd, tyrozol i próbka Rhodiola crenulata).</li>
	<li>Kliknij pozycję Kroki HPTLC. Ustaw parametry cienkiej warstwy (5 cm x 10 cm). Wybierz Typ aplikacji (pasmo), ustaw parametry (Tabela 1) i kliknij przycisk OK.</li>
	<li>Otwarta jakość napełniania/płukania. Zaznacz opcję Wypełnij tylko zaprogramowaną głośność. Ustawić dolny poziom fiolki (mm) na 0,5 i kliknąć przycisk OK.</li>
	<li>Kliknij przycisk Execute Method (Wykonaj metodę).</li>
	<li>Kliknij przycisk Przypisanie ścieżki, zaznacz opcję Środek, a następnie ustaw parametry (Tabela 2).</li>
	<li>Kliknij przycisk Kontynuuj, aby uzyskać automatyczne próbkowanie.</li>
	<li>Wyłączyć automatyczną maszynę do pobierania próbek i zawór powietrza. Usunąć arkusz silikonowy z automatycznej maszyny do pobierania próbek.</li>
	<li>Umieścić arkusz silikonowy po drugiej stronie cylindra chromatografii dwuzbiornikowej w kroku 6.1, przykryć górną głowicę cylindrów i wstępnie nasycać przez 20 minut.</li>
	<li>Delikatnie zaciśnij górny koniec cienkowarstwowej płytki pęsetą, szybko włóż arkusz silikonu do środka wywołującego i przykryj górną głowicę cylindrów. 
	UWAGA: Wyjmij arkusz silikonowy, gdy rozłożona przednia krawędź znajduje się w odległości 0.5-1.0 cm od górnego końca cienkiej płytki.</li>
	<li>Po odparowaniu rozpuszczalnika organicznego rozpyl roztwór chromogeniczny na powierzchnię arkusza silikonowego w temperaturze pokojowej, aby uzyskać wyniki chromogenne. 
	UWAGA: Roztwór chromogeniczny jest roztworem wodnym zawierającym 2% FeCl3 i 1% K3[Fe(CN)6].</li>
</ol>

Microscopic Characterization and TLC-Based Identification of Rhodiola crenulate

<ol><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traditional+herbal+medicine+and+nanomedicine%3A+Converging+disciplines+to+improve+therapeutic+efficacy+and+human+health%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Drug+Delivery+Reviews%22%5BJournal%5D)">Traditional herbal medicine and nanomedicine: Converging disciplines to improve therapeutic efficacy and human health.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 178, 113964(2021).</li>
<li>Yin, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+positive+role+and+mechanism+of+herbal+medicine+in+Parkinson%27s+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Oxidative+Medicine+and+Cellular+Longevity%22%5BJournal%5D)">The positive role and mechanism of herbal medicine in Parkinson's Disease.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2021, 9923331(2021).</li>
<li>Li, F. S., Weng, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Demystifying+traditional+herbal+medicine+with+modern+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Plants%22%5BJournal%5D)">Demystifying traditional herbal medicine with modern approach.</a> Nature Plants. 3, 17109(2017).</li>
<li>da Fonseca, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Herbal+medicinal+products+from+Passiflora+for+anxiety%3A+An+unexploited+potential%5BTitle%5D)+AND+%22The+Scientific+World+Journal%22%5BJournal%5D)">Herbal medicinal products from Passiflora for anxiety: An unexploited potential.</a> The Scientific World Journal. 2020, 6598434(2020).</li>
<li>Aziato, L., Antwi, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Facilitators+and+barriers+of+herbal+medicine+use+in+Accra%2C+Ghana%3A+an+inductive+exploratory+study%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Complementary+and+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Facilitators and barriers of herbal medicine use in Accra, Ghana: an inductive exploratory study.</a> BMC Complementary and Alternative Medicine. 16, 142(2016).</li>
<li>Tao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rhodiola+species%3A+A+comprehensive+review+of+traditional+use%2C+phytochemistry%2C+pharmacology%2C+toxicity%2C+and+clinical+study%5BTitle%5D)+AND+%22Medicinal+Research+Reviews%22%5BJournal%5D)">Rhodiola species: A comprehensive review of traditional use, phytochemistry, pharmacology, toxicity, and clinical study.</a> Medicinal Research Reviews. 39 (5), 1779-1850 (2019).</li>
<li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dietary+supplement+Rhodiola+crenulata+extract+alleviates+dextran+sulfate+sodium-induced+colitis+in+mice+through+anti-inflammation%2C+mediating+gut+barrier+integrity+and+reshaping+the+gut+microbiome%5BTitle%5D)+AND+%22Food+%26+Function%22%5BJournal%5D)">The dietary supplement Rhodiola crenulata extract alleviates dextran sulfate sodium-induced colitis in mice through anti-inflammation, mediating gut barrier integrity and reshaping the gut microbiome.</a> Food & Function. 12 (7), 3142-3158 (2021).</li>
<li>Xie, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rhodiola+crenulate+alleviates+hypobaric+hypoxia-induced+brain+injury+via+adjusting+NF-%CE%BAB%2FNLRP3-mediated+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">Rhodiola crenulate alleviates hypobaric hypoxia-induced brain injury via adjusting NF-κB/NLRP3-mediated inflammation.</a> Phytomedicine. 103, 154240(2022).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salidroside%2C+a+phenyl+ethanol+glycoside+from+Rhodiola+crenulata%2C+orchestrates+hypoxic+mitochondrial+dynamics+homeostasis+by+stimulating+Sirt1%2Fp53%2FDrp1+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Salidroside, a phenyl ethanol glycoside from Rhodiola crenulata, orchestrates hypoxic mitochondrial dynamics homeostasis by stimulating Sirt1/p53/Drp1 signaling.</a> Journal of Ethnopharmacology. 293, 115278(2022).</li>
<li>Ma, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+characteristics+of+Rhodiola+Crenulata+and+its+mechanism+in+acute+mountain+sickness+using+UHPLC-Q-TOF-MS%2FMS+combined+with+network+pharmacology+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Chemical characteristics of Rhodiola Crenulata and its mechanism in acute mountain sickness using UHPLC-Q-TOF-MS/MS combined with network pharmacology analysis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 294, 115345(2022).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rhodiola+crenulata+attenuates+apoptosis+and+mitochondrial+energy+metabolism+disorder+in+rats+with+hypobaric+hypoxia-induced+brain+injury+by+regulating+the+HIF-1%CE%B1%2FmicroRNA+210%2FISCU1%2F2%28COX10%29+signaling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Rhodiola crenulata attenuates apoptosis and mitochondrial energy metabolism disorder in rats with hypobaric hypoxia-induced brain injury by regulating the HIF-1α/microRNA 210/ISCU1/2(COX10) signaling pathway.</a> Journal of Ethnopharmacology. 241, 111801(2019).</li>
<li>d'Avigdor, E., Wohlmuth, H., Asfaw, Z., Awas, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+current+status+of+knowledge+of+herbal+medicine+and+medicinal+plants+in+Fiche%2C+Ethiopia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnobiology+and+Ethnomedicine%22%5BJournal%5D)">The current status of knowledge of herbal medicine and medicinal plants in Fiche, Ethiopia.</a> Journal of Ethnobiology and Ethnomedicine. 10, 38(2014).</li>
<li>Sánchez, M., González-Burgos, E., Divakar, P. K., Gómez-Serranillos, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA-based+authentication+and+metabolomics+analysis+of+medicinal+plants+samples+by+DNA+barcoding+and+ultra-high-performance+liquid+chromatography%2Ftriple+quadrupole+mass+spectrometry+%28UHPLC-MS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Plants+%28Basel%2C+Switzerland%29%22%5BJournal%5D)">DNA-based authentication and metabolomics analysis of medicinal plants samples by DNA barcoding and ultra-high-performance liquid chromatography/triple quadrupole mass spectrometry (UHPLC-MS).</a> Plants (Basel, Switzerland). 9 (11), 1601(2020).</li>
<li>Rhodiola renulata (Hook.fil & Thomson) H.Ohba. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.gbif.org/species/4200529">https://www.gbif.org/species/4200529</a> (2023).</li>
<li>Plant + data center. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.iplant.cn/">https://www.iplant.cn/</a> (2023).</li>
<li>Chinese virtual herbarium. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.cvh.ac.cn/">https://www.cvh.ac.cn/</a> (2023).</li>
<li>Cunningham, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((There+%26%2334%3Bain%27t+no+mountain+high+enough%26%2334%3B%3F%3A+The+drivers%2C+diversity+and+sustainability+of+China%27s+Rhodiola+trade%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">There &#34;ain't no mountain high enough&#34;?: The drivers, diversity and sustainability of China's Rhodiola trade.</a> Journal of Ethnopharmacology. 252, 112379(2020).</li>
<li>Wang, Q., Ruan, X., Jin, Z. H., Yan, Q. C., Tu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+Rhodiola+species+by+using+RP-HPLC%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Zhejiang+University.+Science.+B%22%5BJournal%5D)">Identification of Rhodiola species by using RP-HPLC.</a> Journal of Zhejiang University. Science. B. 6 (6), 477-482 (2005).</li>
<li>Dong, X., Guo, Y., Xiong, C., Sun, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+two+major+Rhodiola+species+and+the+systemic+changing+characteristics+of+metabolites+of+Rhodiola+crenulata+in+different+altitudes+by+chemical+methods+combined+with+UPLC-QqQ-MS-based+metabolomics%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Evaluation of two major Rhodiola species and the systemic changing characteristics of metabolites of Rhodiola crenulata in different altitudes by chemical methods combined with UPLC-QqQ-MS-based metabolomics.</a> Molecules. 25 (18), 4062(2020).</li>
<li>Zhao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HPLC+fingerprint+differentiation+between+natural+and+ex+situ+populations+of+Rhodiola+sachalinensis+from+Changbai+Mountain%2C+China%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">HPLC fingerprint differentiation between natural and ex situ populations of Rhodiola sachalinensis from Changbai Mountain, China.</a> PloS One. 9 (11), 112869(2014).</li>
<li>Yu, Y. Y. Quality evaluation of Tibetan medicine Rhodiolae crenulatae radix et rhizome based on sensory recognition and near infrared spectrum analysis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Chengdu+University+of+Traditional+Chinese+Medicine%22">Chengdu University of Traditional Chinese Medicine</a>. , Chinese Master's Thesis (2020).</li>
<li>Lv, X. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+determination+of+5+chemical+components+in+3+kinds+of+Rhodiola+rosea+by+HPLC%5BTitle%5D)+AND+%22China+Pharmacy%22%5BJournal%5D)">Simultaneous determination of 5 chemical components in 3 kinds of Rhodiola rosea by HPLC.</a> China Pharmacy. 29 (18), 2515-2519 (2018).</li>
<li>Dong, T., Sha, Y., Liu, H., Sun, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altitudinal+variation+of+metabolites%2C+mineral+elements+and+antioxidant+activities+of+Rhodiola+crenulata+%28Hook.f.+%26+Thomson%29+H.Ohba%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Altitudinal variation of metabolites, mineral elements and antioxidant activities of Rhodiola crenulata (Hook.f. & Thomson) H.Ohba.</a> Molecules. 26 (23), 7383(2021).</li>
<li>Ma, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+UHPLC+fingerprints+combined+with+chemical+pattern+recognition+analysis+in+the+differentiation+of+six+Rhodiola+species%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Application of UHPLC fingerprints combined with chemical pattern recognition analysis in the differentiation of six Rhodiola species.</a> Molecules. 26 (22), 6855(2021).</li>
<li>Li, X. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+discrimination+of+different+Rhodiola+species+using+1H-NMR+and+GEP+combinational+chemometrics%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+%26+Pharmaceutical+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Metabolic discrimination of different Rhodiola species using 1H-NMR and GEP combinational chemometrics.</a> Chemical & Pharmaceutical Bulletin. 67 (2), 81-87 (2019).</li>
<li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+Hippophae+species+%28Shaji%29+through+DNA+barcodes%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Identification of Hippophae species (Shaji) through DNA barcodes.</a> Chinese Medicine. 10, 28(2015).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Na świecie istnieje ponad 90 gatunków roślin Rhodiola, a ponad 60% wszystkich gatunków występuje w Chinach, w tym Rhodiola crenulata, Rhodiola rosea, Rhodiolas achalinensis i Rhodiola algida17. Rhodiola crenulata, odnotowana w pierwszej części Farmakopei Chińskiej (2020), jest tradycyjną medycyną tybetańską uprawianą na dużych wysokościach. Zapotrzebowanie rynku na Rhodiola crenulata rośnie z roku na rok, dlatego zapewnienie prawidłowego wykorzystania ...

Ziołolecznictwo ma długą historię i bogate doświadczenie w stosowaniu w Chinach, i było to pierwsze systematyczne nagranie w ziołowym klasyku Shennong1. Odkrycie artemizyniny stosowanej w leczeniu malarii przyczyniło się do rozwoju ziołolecznictwa na nowym etapie1. Wykorzystanie nowoczesnej technologii naukowej do odkrycia dokładnego mechanizmu ziołolecznictwa zwiększa stopień wykorzystania i popyt na ziołolecznictwo, otwierając dla niego nowy międzynarodowy rynek2,3,4. Doprowadziło to jednak do szeregu negatywnych skutków. Osoby niebędące profesjonalistami mają mgliste pojęcie o cechach ziołolecznictwa, co sprawia, że stosowanie ziołolecznictwa wiąże się z ogromnym ryzykiem bezpieczeństwa5.
Rhodiola crenulata, jedna z roślin z gatunku Rhodiola, występuje głównie w Tybecie, północno-zachodnim Yunnan i zachodnim Syczuanie w Chinach (<silna klasa="xfig">Rysunek 1)6,7. Rhodiola crenulata zawiera salidrozyd, tyrozol, kwas galusowy i inne związki stosowane w leczeniu chorób związanych z niedotlenieniem poprzez funkcję "orzeźwiającego qi i wspomagającego krążenie krwi, oczyszczającego puls i uspokajającego astmę"8,9,10,11. Badania terenowe wykazały, że Rhodiola crenulata można znaleźć w alpejskich strefach skokowych, zboczach wąwozów i szczelinach skalnych na wysokości 4000-5600 m. Jego środowisko wzrostu jest zimne, pełne słońca i intensywnego promieniowania, i należy do ekosystemu łąk alpejskich. Rhodiola crenulata może być dystrybuowana w populacjach blaszkowatych i punktowych w zależności od terenu wzrostu, a przepływ genów może odbywać się poprzez zapylenie krzyżowe.
Aborcja pyłkowa rodzaju Rhodiola, nielegalne wykopaliska i zdegenerowane środowisko ekologiczne sprawiają, że Rhodiola crenulata jest gatunkiem zagrożonym6,12. Ze względu na wysoką wartość leczniczą Rhodiola crenulata oczekuje się, że na rynek pojawią się podróbki. W artykule przedstawiono siedlisko Rhodiola crenulata oraz kilka wygodnych metod identyfikacji laboratoryjnej. Po pierwsze, obserwowaliśmy środowisko wzrostu Rhodiola crenulata i jego właściwości lecznicze. Po drugie, mikrostrukturę proszku leczniczego obserwowano pod mikroskopem. Ostatni krok jest kluczowym punktem. Reprezentatywne składniki Rhodiola crenulata zostały oddzielone i zidentyfikowane zgodnie z różnymi właściwościami adsorpcji lub rozpuszczania tych składników w określonej substancji. Metody uwierzytelniania opartego na DNA lub analizy metabolomicznej roślin leczniczych są skomplikowane i kosztowne13. Te podstawowe, wygodne i ekonomiczne metody mogą szybko zidentyfikować Rhodiola crenulata.

<table><tbody><tr><td>0,22 &m; m filtr miliporowy</td><td>Millipore</td><td>SLGP033RB</td><td></td></tr><tr><td>Automatyczna maszyna do pobierania próbek</td><td>CAMAG</td><td>ATS 4</td><td></td></tr><tr><td>Hydrat chloralu</td><td>Fuzhou Brunei Technology Co., Ltd</td><td>ST1002</td><td></td></tr><tr><td>Chromatograficzny&nbsp; Próbka&nbsp; butelki</td><td>Zhejiang ALWSCI Technology Co., Ltd</td><td>C0000008</td><td></td></tr><tr><td>Kolba stożkowa</td><td>Sichuan Shubo Co., Ltd</td><td>1121</td><td></td></tr><tr><td>Szkło osłonowe</td><td>Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd</td><td>10211818c</td><td></td></tr><tr><td>Igła preparcyjna</td><td>Shanghai Bingyu Fluid Technology Co., Ltd</td><td>BY-5026</td><td></td></tr><tr><td>Waga elektroniczna</td><td>SHIMADZU</td><td>ATX124</td><td></td></tr><tr><td>Octan etylu</td><td>Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd</td><td>2022120901</td><td></td></tr><tr><td>Kwas mrówkowy</td><td>Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd</td><td>2021110801</td><td></td></tr><tr><td>Kwas galusowy</td><td>Chengdu Herbpurify Co., Ltd</td><td>M-017</td><td></td></tr><tr><td>Glicerol</td><td>Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd</td><td>10010618</td><td></td></tr><tr><td>Kruszarka szybkoobrotowa</td><td>Beijing Zhongxingweiye Instrument Co., Ltd</td><td>FW-100</td><td></td></tr><tr><td>Metanol</td><td>Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd</td><td>20230108</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop</td><td>Chongqing Oprec Nistrument Co., &nbsp; Ltd</td><td>B203</td><td></td></tr><tr><td>Szkiełko mikroskopowe</td><td>Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd</td><td>7105P-G</td><td></td></tr><tr><td>Piekarnik</td><td>Shanghai Yuejin Medical Equipment Co., Ltd</td><td>DHG-8145</td><td></td></tr><tr><td>Sito do farmakopei</td><td>Fabryka sit Hangzhou Xingrun</td><td>572423281330</td><td></td></tr><tr><td>Pipeta</td><td>Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd</td><td>120302008</td><td></td></tr><tr><td>Salidroside</td><td>Chengdu Herbpurify Co., Ltd</td><td>H-040</td><td></td></tr><tr><td>Zbiornik nasycony&nbsp;</td><td>Yancheng Liegu Technology Co., Ltd</td><td>10*20 P-1</td><td></td></tr><tr><td>Płytka z żelem krzemionkowym</td><td>Yantai Jiangyou Rozwój żelu krzemionkowego&nbsp; Co., Ltd</td><td>HSG20211227</td><td></td></tr><tr><td>Trichlorometan</td><td>Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd</td><td>20221013-1</td><td></td></tr><tr><td>Pęseta&nbsp;</td><td>Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd</td><td>130302027</td><td></td></tr><tr><td>Tyrosol</td><td>Chengdu Herbpurify Co., Ltd</td><td>L-042</td><td></td></tr><tr><td>Sprzęt ultradźwiękowy</td><td>Ningbo Xinyi Ultrasonic Equipment Co., Ltd</td><td>SB-8200DTS</td><td></td></tr><tr><td>Pipeta wolumetryczna</td><td>Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd</td><td>120301006</td><td></td></tr></tbody></table>

zbieranie w terenie i rutynowa identyfikacja laboratoryjna rhodiola crenulata

Field Collection and Laboratory Routine Identification of Rhodiola crenulata

Identyfikacja materiałów leczniczych jest przesłanką i gwarancją bezpieczeństwa leków. Większość badaczy naukowych z pewnością faworyzuje prosty, szybki, skuteczny i niedrogi proces identyfikacji ziół. Rhodiola crenulata to tradycyjna medycyna tybetańska uprawiana na dużych wysokościach, występująca głównie w regionach Tybetu, Yunnan i Syczuanu w Chinach. Rhodiola crenulate posiada wiele bioaktywności, takich jak właściwości przeciwzapalne, przeciwhipoksyjne i przeciwutleniające, i ma ogromny potencjał rozwoju. Wraz z rosnącym popytem rynkowym i szybkim spadkiem zawartości zasobów, duża liczba mylących produktów Rhodiola crenulata niepokoi ludzi. W związku z tym protokół ten wprowadza standardowy proces identyfikacji Rhodiola crenulata w terenie w połączeniu z rutynowymi badaniami laboratoryjnymi. Połączenie siedliska, cech mikroskopowych i chromatografii cienkowarstwowej bez wątpienia pozwoli na szybką, skuteczną i ekonomiczną identyfikację Rhodiola crenulata, przyczyniając się do ciągłego rozwoju medycyny tybetańskiej i kontroli jakości materiałów leczniczych.

Niniejszy protokół doświadczalny opisuje identyfikację i zbiór Rhodiola crenulata w terenie. Rhodiola crenulata występuje zazwyczaj w wysokogórskich strefach piargowych, na stokach żlebów i w szczelinach skalnych na dużych wysokościach. Siedlisko, cała roślina, kwiat oraz liście Rhodiola crenulata zostały przedstawione na Rysunku 2. Rhodiola crenulata posiada rdzawobrunatny kłącze (Rysunek 3A). Reprezentatywny obraz proszku le...

Tutaj opisujemy identyfikację Rhodiola Crenulata na podstawie siedliska, morfologii rośliny, właściwości leczniczych, cech mikroskopowych i chromatografii cienkowarstwowej.

Zbieranie w terenie i rutynowa identyfikacja laboratoryjna Rhodiola crenulata

The identification of medicinal materials is the premise and guarantee of drug safety. The majority of scientific researchers are bound to favor the ...

Zakres naszych badań koncentruje się na przeprowadzeniu badania zasobów medycyny etnicznej. W szczególności badanie to ma na celu opracowanie szybkich i wygodnych metod identyfikacji Rhodiola crenulata. Oferowany przez nas protokół przedstawia opłacalną, prostą i szybką metodę identyfikacji różnych leczniczych materiałów ziołowych.Nasze laboratorium skoncentruje swoje przyszłe wysiłki badawcze na badaniu dwóch głównych obszarów, dystrybucji badań związanych z Rhodiola crenulata i farmakologicznych skutków tego gatunku. Na początek obserwuj cechy wyglądu Rhodiola crenulata gołym okiem i zapisz obserwacje. Wdychaj w pobliżu rośliny, aby zidentyfikować zapach.Następnie umieść mały kawałek korzenia w ustach. Następnie popijaj i przeżuwaj w celu identyfikacji smaku. Za pomocą pędzla usuń ziemię z powierzchni rośliny.Umieść roślinę w piekarniku w temperaturze 40 stopni Celsjusza i obracaj ją co 24 godziny. Następnie sproszkowaj wysuszone materiały lecznicze za pomocą maszyny do proszku i przefiltruj je przez sito numer trzy z lekiem. Rozprowadzić proszek równomiernie na czystym szkiełku podstawowym za pomocą igły preparującej pokrywającej jedną trzecią szkiełka na obszarze dwóch milimetrów.Za pomocą szklanego zakraplacza dodaj kroplę wody dejonizowanej do proszku i szybko umieść szklankę nakrywkową za pomocą pęsety. Następnie umieść szkiełko na platformie mikroskopu. Dostosuj źródło światła i spiralę zgrubnego ogniskowania, aby view proszek.Przełącz się na soczewkę obiektywową 40X i obserwuj granulki skrobi. Ponownie równomiernie rozprowadzić proszek na szkiełku za pomocą igły preparującej. Następnie dodaj kroplę wodzianu chloralu do proszku.Przytrzymaj szkiełko pęsetą i podgrzej na lampie alkoholowej trzy razy przez jedną sekundę każdy. Dodaj kroplę gliceryny do proszku i szybko umieść szklankę nakrywkową na kropli. Po dostosowaniu ustawień mikroskopu, jak pokazano wcześniej, wybierz soczewkę obiektywową 40X, aby uwidocznić cewnik, komórki korkowe i włókna, a także odpowiednio komórki miąższu drewna i blok pigmentowy.Badanie mikroskopowe naszej crenulata ujawniło kluczowe cechy z komórkami korka wyglądającymi na brązowawe, żółte lub bezbarwne o wielokątnych kształtach. Ziarna skrobi obserwowano jako pojedyncze lub wielokrotne z charakterystycznymi punktami pępowinowymi i ściśle ułożonymi spiralnymi naczyniami. Dodatkowo komórki miąższu ksylemu uwidoczniono jako aromatyczne i owalne zawierające kryształy piasku szczawianowo-wapniowego oraz zidentyfikowano bloki pigmentu brązowo-czerwonego o nieregularnych kształtach.Na początek zważ trzy gramy proszku Rhodiola crenulata i przenieś go do stożkowej butelki o pojemności 100 mililitrów. Za pomocą pipety z dużą miską dodaj 25 mililitrów metanolu do butelki. Umieść butelkę w przyrządzie ultradźwiękowym.Ustaw moc na 250 watów, częstotliwość na 40 kiloherców. Czas do 30 minut i rozpocznij ultradźwięki. Następnie opłucz zewnętrzną część butelki pod bieżącą wodą, aż osiągnie temperaturę pokojową.Przefiltruj roztwór przez mikroporowatą membranę o grubości 0,22 mikrona. Za pomocą jednomililitrowej strzykawki odessać 800 mikrolitrów płynu z butelki i zebrać 400 mikrolitrów roztworu pośredniego do butelki na próbkę chromatograficzną. Odmierz i dodaj jeden miligram salidrozydu, 0,5 miligrama tyrozylu i 0,5 miligrama kwasu galusowego do trzech oddzielnych jednomililitrowych kolb miarowych.Następnie napełnij każdą kolbę do oznaczenia skali metanolem. Sonizować próbki w przyrządzie ultradźwiękowym przy użyciu warunków opisanych wcześniej. Po ultradźwiękach odessać 800 mikrolitrów cieczy z kolby.Przefiltruj roztwór przez mikroporowatą membranę o grubości 0,22 mikrometra i zbierz 400 mikrolitrów filtratu do butelki. Dodać trichlorometan, octan etylu, metanol i kwas mrówkowy po jednej stronie cylindra do chromatografii dwuzbiornikowej. Potrząśnij cylindrem, aby równomiernie wymieszać zawartość i przykryć górną głowicę cylindrów.Ułóż salidrozyd kwasu galusowego, roztwory wzorcowe aerozolu i nasz roztwór crenulata na stojaku na próbki w pozycjach od A1 do A4. Umieść arkusz silikonu o wymiarach 5 na 10 centymetrów na stole do pobierania próbek. Włączyć automatyczną maszynę do pobierania próbek i otworzyć zawór sterujący powietrzem. Naciśnij przycisk kontynuacji, aby automatycznie pobrać próbkowanie.Po pobraniu próbek wyłącz maszynę i zawór powietrza. Wyjmij arkusz silikonowy z urządzenia. Umieścić arkusz po drugiej stronie cylindra do chromatografii z podwójnym zbiornikiem.Przykryj górną głowicę cylindrów i wstępnie nasycaj przez 20 minut. Następnie użyj pęsety, aby przytrzymać górny koniec cienkowarstwowej płytki i szybko włóż arkusz silikonowy do środka wywołującego. Gdy rozpuszczalnik organiczny odparuje, spryskaj arkusz silikonowy roztworem chromogenicznym.Analiza chromatografii cienkowarstwowej wykazała, że próbka crenulata pojawiła się w plamkach o tym samym kolorze, odpowiadających wzorcom kwasu galusowego, salidrozydu i tyrozylu.

field-collection-laboratory-routine-identification-rhodiola

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Przedstawiamy tani i szybki protokół genotypowania molekularnego, który wykorzystuje specyficzne dla odmiany startery PCR celujące w różnice w sekwencji DNA w obrębie regionu spacerowego trnL-F chloroplastu, aby odróżnić odmiany Imperata cylindrica (trawa cogon), których nie można rozpoznać wyłącznie na podstawie morfologii. Odmiany te obejmują wpisaną na listę federalną roślinę inwazyjną, trawę cogon, oraz blisko spokrewnioną, powszechnie występującą odmianę ozdobną, I. cylindrica var.

Metoda genotypowania oparta na PCR do rozróżniania odmian dzikich i ozdobnych Imperata cylindrica

Tutaj stosujemy metodę ekstrakcji gorącą wodą pod ciśnieniem (PHWE), która wykorzystuje niezmodyfikowany domowy ekspres do kawy do zapoznania studentów z chemią produktów naturalnych w laboratorium. Przedstawiono dwa doświadczenia: PHWE eugenolu i acetyleugenolu z goździków oraz PHWE seseliny i (+)-epoksysuberozyny z australijskiej rośliny Correa reflexa.

Wykorzystanie ekstrakcji gorącą wodą pod ciśnieniem (PHWE) do badania chemii produktów naturalnych w laboratorium licencjackim

Prezentowany jest protokół testu konkurencji płytkowej w celu określenia, czy dany kompost może zawierać bakterie i grzyby, które hamują wzrost Rhizoctonia solani.

Test konkurencji płytkowej jako szybka wstępna ocena supresji choroby

Tutaj opisane są testy biologiczne przeznaczone do monitorowania rozwoju patogenu grzybowego, Colletotrichum fioriniae, w obecności ekstraktów z kwiatów borówki lub żurawiny na szklanych szkiełkach nakrywkowych. Techniki ekstrakcji kwiatów na bazie wody, chloroformu i wody deszczowej są szczegółowe, a także wgląd w to, jak można zastosować te informacje.

Colletotrichum fioriniae Rozwój ekstraktów z kwiatów borówki i żurawiny na bazie wody i chloroformu

Prezentowany tutaj jest protokół do terenowej identyfikacji Matricaria chamomilla za pomocą przenośnego systemu qPCR. Ten łatwy do wykonania protokół jest idealny jako metoda potwierdzania tożsamości gatunku botanicznego w miejscach, w których dostęp do sprzętu laboratoryjnego i wiedzy specjalistycznej jest ograniczony, takich jak gospodarstwa rolne i magazyny.

Identyfikacja terenowa Matricaria chamomilla za pomocą przenośnego systemu qPCR

Tutaj testujemy rozpuszczanie granulek Rhodiola (RG) in vitro, rysujemy krzywe rozpuszczania salidrozydu, kwasu galusowego i galusanu etylu w ultraczystej wodzie i dopasowujemy krzywe do różnych modeli matematycznych. Protokół ten zawiera informacje i wytyczne dotyczące badań biorównoważności in vivo i korelacji in vivo-in vitro RG.

Oznaczanie rozpuszczania in vitro składników wieloindeksowych w granulkach Rhodiola w medycynie tybetańskiej

Protokół ten przedstawia porównawczą metodę oceny cech szparkowych i naskórkowych u dwóch odrębnych gatunków za pomocą peelingów naskórnych, technik oczyszczania oraz analizy obrazowej wspomaganej przez AI. Celem jest umożliwienie wysokoprzepustowej, powtarzalnej ilościowej identyfikacji struktur komórkowych leżących u podstaw funkcji szparków szparkowych dla zastosowań rolniczych oraz szerokich badań roślinnych.

Charakteryzacja cech szparków szparkowych i naskórka za pomocą peelingów, oczyszczania oraz analizy obrazów opartej na AI

W niniejszym filmie przedstawiono procedurę sekcji służącą do przetwarzania ludzkiej trzustki w celu uzyskania wielu formatów przechowywania. Orientacja anatomiczna jest zachowana we wszystkich obszarach trzustki, aby umożliwić określenie regionalnego składu i gęstości wysepek.

Protokół pobierania trzustki ludzkiej

Fibroblasty pobrane od pacjentów z mutacjami w genach odpowiedzialnych za chorobę Parkinsona stanowią łatwo dostępny model ex vivo do badania fenotypów związanych z tą chorobą. Obrazowanie żywych komórek daje możliwość analizy parametrów morfologicznych i funkcjonalnych w żywych komórkach. W niniejszym opracowaniu opisujemy przygotowanie ludzkich fibroblastów oraz późniejsze monitorowanie fenotypów mitochondrialnych.

Wykorzystanie pierwotnych ludzkich fibroblastów do monitorowania fenotypów mitochondrialnych w badaniach nad chorobą Parkinsona

Ekstrakcja DNA ze śliny może stanowić łatwo dostępne źródło DNA o wysokiej masie cząsteczkowej, z niewielką lub żadną degradacją/fragmentacją.  Protokół ten zapewnia zoptymalizowane parametry pobierania/przechowywania śliny i ekstrakcji DNA, aby były wystarczającej jakości i ilości dla dalszych testów DNA o wysokich wymaganiach jakościowych.

Pobieranie i ekstrakcja DNA śliny do sekwencjonowania nowej generacji

Poznaj metody identyfikacji Rhodiola crenulata w badaniach etnobotanicznych i farmakognostycznych. Protokół obejmuje obserwację morfologiczną, analizę chromatograficzną i badania mikroskopowe roślin leczniczych.

Zbieranie w terenie i rutynowa identyfikacja laboratoryjna Rhodiola crenulata

Przeglądaj więcej filmów