Zbieranie w terenie i rutynowa identyfikacja laboratoryjna Rhodiola crenulata
October 27th, 2023
Tutaj opisujemy identyfikację Rhodiola Crenulata na podstawie siedliska, morfologii rośliny, właściwości leczniczych, cech mikroskopowych i chromatografii cienkowarstwowej.
Zakres naszych badań koncentruje się na przeprowadzeniu badania zasobów medycyny etnicznej. W szczególności badanie to ma na celu opracowanie szybkich i wygodnych metod identyfikacji Rhodiola crenulata. Oferowany przez nas protokół przedstawia opłacalną, prostą i szybką metodę identyfikacji różnych leczniczych materiałów ziołowych.
Nasze laboratorium skoncentruje swoje przyszłe wysiłki badawcze na badaniu dwóch głównych obszarów, dystrybucji badań związanych z Rhodiola crenulata i farmakologicznych skutków tego gatunku. Na początek obserwuj cechy wyglądu Rhodiola crenulata gołym okiem i zapisz obserwacje. Wdychaj w pobliżu rośliny, aby zidentyfikować zapach.
Następnie umieść mały kawałek korzenia w ustach. Następnie popijaj i przeżuwaj w celu identyfikacji smaku. Za pomocą pędzla usuń ziemię z powierzchni rośliny.
Umieść roślinę w piekarniku w temperaturze 40 stopni Celsjusza i obracaj ją co 24 godziny. Następnie sproszkowaj wysuszone materiały lecznicze za pomocą maszyny do proszku i przefiltruj je przez sito numer trzy z lekiem. Rozprowadzić proszek równomiernie na czystym szkiełku podstawowym za pomocą igły preparującej pokrywającej jedną trzecią szkiełka na obszarze dwóch milimetrów.
Za pomocą szklanego zakraplacza dodaj kroplę wody dejonizowanej do proszku i szybko umieść szklankę nakrywkową za pomocą pęsety. Następnie umieść szkiełko na platformie mikroskopu. Dostosuj źródło światła i spiralę zgrubnego ogniskowania, aby view proszek.
Przełącz się na soczewkę obiektywową 40X i obserwuj granulki skrobi. Ponownie równomiernie rozprowadzić proszek na szkiełku za pomocą igły preparującej. Następnie dodaj kroplę wodzianu chloralu do proszku.
Przytrzymaj szkiełko pęsetą i podgrzej na lampie alkoholowej trzy razy przez jedną sekundę każdy. Dodaj kroplę gliceryny do proszku i szybko umieść szklankę nakrywkową na kropli. Po dostosowaniu ustawień mikroskopu, jak pokazano wcześniej, wybierz soczewkę obiektywową 40X, aby uwidocznić cewnik, komórki korkowe i włókna, a także odpowiednio komórki miąższu drewna i blok pigmentowy.
Badanie mikroskopowe naszej crenulata ujawniło kluczowe cechy z komórkami korka wyglądającymi na brązowawe, żółte lub bezbarwne o wielokątnych kształtach. Ziarna skrobi obserwowano jako pojedyncze lub wielokrotne z charakterystycznymi punktami pępowinowymi i ściśle ułożonymi spiralnymi naczyniami. Dodatkowo komórki miąższu ksylemu uwidoczniono jako aromatyczne i owalne zawierające kryształy piasku szczawianowo-wapniowego oraz zidentyfikowano bloki pigmentu brązowo-czerwonego o nieregularnych kształtach.
Na początek zważ trzy gramy proszku Rhodiola crenulata i przenieś go do stożkowej butelki o pojemności 100 mililitrów. Za pomocą pipety z dużą miską dodaj 25 mililitrów metanolu do butelki. Umieść butelkę w przyrządzie ultradźwiękowym.
Ustaw moc na 250 watów, częstotliwość na 40 kiloherców. Czas do 30 minut i rozpocznij ultradźwięki. Następnie opłucz zewnętrzną część butelki pod bieżącą wodą, aż osiągnie temperaturę pokojową.
Przefiltruj roztwór przez mikroporowatą membranę o grubości 0,22 mikrona. Za pomocą jednomililitrowej strzykawki odessać 800 mikrolitrów płynu z butelki i zebrać 400 mikrolitrów roztworu pośredniego do butelki na próbkę chromatograficzną. Odmierz i dodaj jeden miligram salidrozydu, 0,5 miligrama tyrozylu i 0,5 miligrama kwasu galusowego do trzech oddzielnych jednomililitrowych kolb miarowych.
Następnie napełnij każdą kolbę do oznaczenia skali metanolem. Sonizować próbki w przyrządzie ultradźwiękowym przy użyciu warunków opisanych wcześniej. Po ultradźwiękach odessać 800 mikrolitrów cieczy z kolby.
Przefiltruj roztwór przez mikroporowatą membranę o grubości 0,22 mikrometra i zbierz 400 mikrolitrów filtratu do butelki. Dodać trichlorometan, octan etylu, metanol i kwas mrówkowy po jednej stronie cylindra do chromatografii dwuzbiornikowej. Potrząśnij cylindrem, aby równomiernie wymieszać zawartość i przykryć górną głowicę cylindrów.
Ułóż salidrozyd kwasu galusowego, roztwory wzorcowe aerozolu i nasz roztwór crenulata na stojaku na próbki w pozycjach od A1 do A4. Umieść arkusz silikonu o wymiarach 5 na 10 centymetrów na stole do pobierania próbek. Włączyć automatyczną maszynę do pobierania próbek i otworzyć zawór sterujący powietrzem. Naciśnij przycisk kontynuacji, aby automatycznie pobrać próbkowanie.
Po pobraniu próbek wyłącz maszynę i zawór powietrza. Wyjmij arkusz silikonowy z urządzenia. Umieścić arkusz po drugiej stronie cylindra do chromatografii z podwójnym zbiornikiem.
Przykryj górną głowicę cylindrów i wstępnie nasycaj przez 20 minut. Następnie użyj pęsety, aby przytrzymać górny koniec cienkowarstwowej płytki i szybko włóż arkusz silikonowy do środka wywołującego. Gdy rozpuszczalnik organiczny odparuje, spryskaj arkusz silikonowy roztworem chromogenicznym.
Analiza chromatografii cienkowarstwowej wykazała, że próbka crenulata pojawiła się w plamkach o tym samym kolorze, odpowiadających wzorcom kwasu galusowego, salidrozydu i tyrozylu.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Przegląd
Niniejsze badanie koncentruje się na identyfikacji Rhodiola crenulata, podkreślając jej siedlisko, morfologię, właściwości lecznicze i cechy mikroskopowe. Przedstawiono szybki i wygodny sposób identyfikacji tej rośliny leczniczej, który jest opłacalny i prosty w użyciu.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Etnobotanika
- Badania nad roślinami leczniczymi
- Farmakognozja
Tło
- Rhodiola crenulata jest znana ze swoich właściwości leczniczych.
- Cechy morfologiczne rośliny są istotne dla identyfikacji.
- Zrozumienie jej siedliska może pomóc w działaniach konserwatorskich.
- Cechy mikroskopowe i chromatografia warstwowa są przydatne do analizy.
Cel badania
- Opracowanie szybkiej metody identyfikacji Rhodiola crenulata.
- Przeprowadzenie analizy rozmieszczenia badań na tej gatunku.
- Zbadanie farmakologicznych wpływów Rhodiola crenulata.
Stosowane metody
- Obserwacja cech morfologicznych.
- Ocena zapachu poprzez ocenę węchową.
- Badanie mikroskopowe cech rośliny.
- Chromatografia warstwowa do analizy chemicznej.
Główne wyniki
- Ustalono metody identyfikacji Rhodiola crenulata.
- Zdokumentowano kluczowe cechy morfologiczne.
- Zapachy zostały uwzględnione jako część identyfikacji.
- Chromatografia warstwowa dostarczyła informacji na temat profilu chemicznego rośliny.
Wnioski
- Badanie oferuje niezawodną metodę identyfikacji Rhodiola crenulata.
- Przyszłe badania skupiają się na jej działaniach farmakologicznych.
- Zrozumienie jej rozmieszczenia może poprawić strategie konserwatorskie.
Często zadawane pytania
Executive Industry Relevance
Reliable identification of medicinal plant materials like Rhodiola crenulata is critical for ensuring drug safety, quality control, and supply chain integrity in biopharma R&D. Standardized field and laboratory protocols reduce the risk of adulteration and misidentification, supporting predictive confidence in early-stage discovery and translational research. This workflow enables scalable, reproducible sourcing and characterization of ethnobotanical resources for pharmaceutical development.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables accurate sourcing and authentication of botanical materials for pharmacological studies.
- Reduces mechanistic ambiguity by confirming species identity before bioactivity assays.
- Supports functional target validation by ensuring material consistency across studies.
Screening & Assay Development
- Provides standardized, reproducible plant material for downstream bioassays and chemical profiling.
- Facilitates assay development by confirming the presence of key phytochemical markers via thin-layer chromatography.
- Improves screening reliability by minimizing confounding from misidentified or adulterated samples.
Translational & Preclinical Research
- Supports translational continuity by linking field identification with laboratory chemical validation.
- Enables risk-adjusted advancement decisions by ensuring material traceability and quality.
- Aligns with biomarker strategies through chemical fingerprinting of active constituents.
Pipeline & Workflow Integration
This protocol integrates at the interface of early discovery and preclinical research, bridging field collection with laboratory validation to support lead identification and translational studies.
- Discovery Biology: Confirms botanical identity to support hypothesis-driven pharmacological research.
- Screening: Delivers validated, reproducible plant extracts for high-confidence assay input.
- Analytics: Provides quantitative chemical profiles and microscopic features for comparative analysis.
- Translational Research: Ensures continuity from field sourcing to preclinical evaluation through standardized workflows.
- Enterprise Reuse: Establishes a reusable protocol for authenticating other medicinal plant species in the pipeline.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence and reduces biological risk by ensuring material authenticity.
- Operational Value: Standardizes identification and quality control processes for scalable implementation.
- Strategic Value: Enables informed go/no-go decisions and efficient resource allocation in ethnobotanical drug discovery.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization and advancement of botanical leads.
Implementation Considerations
- Requires expertise in field botany, microscopy, and chromatographic analysis.
- Needs access to laboratory infrastructure for sample preparation and thin-layer chromatography.
- Demands cross-team standardization to ensure reproducibility across collection sites and labs.
- Adaptable to other medicinal plant species with protocol modifications as needed.
- Dependent on the availability of reference standards for chemical validation.
