Zbieranie w terenie i rutynowa identyfikacja laboratoryjna Rhodiola crenulata

Zakres naszych badań koncentruje się na przeprowadzeniu badania zasobów medycyny etnicznej. W szczególności badanie to ma na celu opracowanie szybkich i wygodnych metod identyfikacji Rhodiola crenulata. Oferowany przez nas protokół przedstawia opłacalną, prostą i szybką metodę identyfikacji różnych leczniczych materiałów ziołowych.

Nasze laboratorium skoncentruje swoje przyszłe wysiłki badawcze na badaniu dwóch głównych obszarów, dystrybucji badań związanych z Rhodiola crenulata i farmakologicznych skutków tego gatunku. Na początek obserwuj cechy wyglądu Rhodiola crenulata gołym okiem i zapisz obserwacje. Wdychaj w pobliżu rośliny, aby zidentyfikować zapach.

Następnie umieść mały kawałek korzenia w ustach. Następnie popijaj i przeżuwaj w celu identyfikacji smaku. Za pomocą pędzla usuń ziemię z powierzchni rośliny.

Umieść roślinę w piekarniku w temperaturze 40 stopni Celsjusza i obracaj ją co 24 godziny. Następnie sproszkowaj wysuszone materiały lecznicze za pomocą maszyny do proszku i przefiltruj je przez sito numer trzy z lekiem. Rozprowadzić proszek równomiernie na czystym szkiełku podstawowym za pomocą igły preparującej pokrywającej jedną trzecią szkiełka na obszarze dwóch milimetrów.

Za pomocą szklanego zakraplacza dodaj kroplę wody dejonizowanej do proszku i szybko umieść szklankę nakrywkową za pomocą pęsety. Następnie umieść szkiełko na platformie mikroskopu. Dostosuj źródło światła i spiralę zgrubnego ogniskowania, aby view proszek.

Przełącz się na soczewkę obiektywową 40X i obserwuj granulki skrobi. Ponownie równomiernie rozprowadzić proszek na szkiełku za pomocą igły preparującej. Następnie dodaj kroplę wodzianu chloralu do proszku.

Przytrzymaj szkiełko pęsetą i podgrzej na lampie alkoholowej trzy razy przez jedną sekundę każdy. Dodaj kroplę gliceryny do proszku i szybko umieść szklankę nakrywkową na kropli. Po dostosowaniu ustawień mikroskopu, jak pokazano wcześniej, wybierz soczewkę obiektywową 40X, aby uwidocznić cewnik, komórki korkowe i włókna, a także odpowiednio komórki miąższu drewna i blok pigmentowy.

Badanie mikroskopowe naszej crenulata ujawniło kluczowe cechy z komórkami korka wyglądającymi na brązowawe, żółte lub bezbarwne o wielokątnych kształtach. Ziarna skrobi obserwowano jako pojedyncze lub wielokrotne z charakterystycznymi punktami pępowinowymi i ściśle ułożonymi spiralnymi naczyniami. Dodatkowo komórki miąższu ksylemu uwidoczniono jako aromatyczne i owalne zawierające kryształy piasku szczawianowo-wapniowego oraz zidentyfikowano bloki pigmentu brązowo-czerwonego o nieregularnych kształtach.

Na początek zważ trzy gramy proszku Rhodiola crenulata i przenieś go do stożkowej butelki o pojemności 100 mililitrów. Za pomocą pipety z dużą miską dodaj 25 mililitrów metanolu do butelki. Umieść butelkę w przyrządzie ultradźwiękowym.

Ustaw moc na 250 watów, częstotliwość na 40 kiloherców. Czas do 30 minut i rozpocznij ultradźwięki. Następnie opłucz zewnętrzną część butelki pod bieżącą wodą, aż osiągnie temperaturę pokojową.

Przefiltruj roztwór przez mikroporowatą membranę o grubości 0,22 mikrona. Za pomocą jednomililitrowej strzykawki odessać 800 mikrolitrów płynu z butelki i zebrać 400 mikrolitrów roztworu pośredniego do butelki na próbkę chromatograficzną. Odmierz i dodaj jeden miligram salidrozydu, 0,5 miligrama tyrozylu i 0,5 miligrama kwasu galusowego do trzech oddzielnych jednomililitrowych kolb miarowych.

Następnie napełnij każdą kolbę do oznaczenia skali metanolem. Sonizować próbki w przyrządzie ultradźwiękowym przy użyciu warunków opisanych wcześniej. Po ultradźwiękach odessać 800 mikrolitrów cieczy z kolby.

Przefiltruj roztwór przez mikroporowatą membranę o grubości 0,22 mikrometra i zbierz 400 mikrolitrów filtratu do butelki. Dodać trichlorometan, octan etylu, metanol i kwas mrówkowy po jednej stronie cylindra do chromatografii dwuzbiornikowej. Potrząśnij cylindrem, aby równomiernie wymieszać zawartość i przykryć górną głowicę cylindrów.

Ułóż salidrozyd kwasu galusowego, roztwory wzorcowe aerozolu i nasz roztwór crenulata na stojaku na próbki w pozycjach od A1 do A4. Umieść arkusz silikonu o wymiarach 5 na 10 centymetrów na stole do pobierania próbek. Włączyć automatyczną maszynę do pobierania próbek i otworzyć zawór sterujący powietrzem. Naciśnij przycisk kontynuacji, aby automatycznie pobrać próbkowanie.

Po pobraniu próbek wyłącz maszynę i zawór powietrza. Wyjmij arkusz silikonowy z urządzenia. Umieścić arkusz po drugiej stronie cylindra do chromatografii z podwójnym zbiornikiem.

Przykryj górną głowicę cylindrów i wstępnie nasycaj przez 20 minut. Następnie użyj pęsety, aby przytrzymać górny koniec cienkowarstwowej płytki i szybko włóż arkusz silikonowy do środka wywołującego. Gdy rozpuszczalnik organiczny odparuje, spryskaj arkusz silikonowy roztworem chromogenicznym.

Analiza chromatografii cienkowarstwowej wykazała, że próbka crenulata pojawiła się w plamkach o tym samym kolorze, odpowiadających wzorcom kwasu galusowego, salidrozydu i tyrozylu.