Optymalizacja technik fotoneuromodulacji w celu oceny roli diod elektroluminescencyjnych w leczeniu bólu

Nasze badania koncentrują się na radzeniu sobie z bólem bez leków poprzez zastosowanie fotoneuromodulacji z diodą elektroluminescencyjną zielonego światła, podejście, które nazwaliśmy GLED. Naszym celem jest określenie, w jaki sposób GLED moduluje szlaki bólowe, ale także określenie optymalnych parametrów ekspozycji zarówno dla badań przedklinicznych, jak i klinicznych. Dziedzina fotoneuromodulacji jest wciąż w powijakach i dopiero zaczynamy dostrzegać jej potencjał. Takie podejście otwiera wiele nowych drzwi, szczególnie w zrozumieniu, w jaki sposób wpływa ono na plastyczność synaps i zapalenie nerwów.

Wyzwania obejmują optymalizację natężenia światła i czasu ekspozycji w różnych modelach bólu oraz między zwierzętami i ludźmi, a także zapewnienie spójności oceny bólu w obu badaniach. Dodatkowo, przełożenie badań przedklinicznych na zastosowanie u ludzi wymaga dalszego przyspieszenia. Ustaliliśmy, że terapia GLED przy użyciu określonej długości fali 525 nanometrów skutecznie moduluje szlaki bólowe. To nieinwazyjne, niefarmakologiczne podejście wykazało znaczący sukces w łagodzeniu zarówno ostrego, jak i przewlekłego bólu oraz stanów takich jak migrena, fibromialgia i ból pooperacyjny.

Protokół ten wypełnia lukę w niespójnych metodologiach ekspozycji GLED w różnych badaniach poprzez standaryzację parametrów, takich jak intensywność, czas trwania i konfiguracja. Protokół zapewnia powtarzalność i spójność zarówno w badaniach przedklinicznych, jak i klinicznych.

[Narrator] Aby rozpocząć, zaopatrz się w elastyczne paski LED o widzialnym spektrum do zabiegu. Za pomocą luksomierza zmierz i zoptymalizuj natężenie światła, a w razie potrzeby zakryj diody LED czarną taśmą, aby osiągnąć pożądane natężenie. Następnie przymocuj taśmy LED do górnych krawędzi drucianych półek w ciemnym pomieszczeniu, aby upewnić się, że każda półka ma dedykowane źródło ekspozycji na światło. Przymocuj timery do taśm LED, aby odsłonić klatki przez osiem godzin dziennie od 6:00 do 14:00. Użyj luksomierza, aby sfinalizować optymalizację natężenia światła wewnątrz klatek po zakryciu lub odsłonięciu niektórych diod LED. Następnie zaaklimatyzuj szczura w przezroczystym pudełku z pleksiglasu na siatce drucianej na godzinę przed testem w tym samym pomieszczeniu z obecnym eksperymentatorem. Zmierz progi wycofania łapy za pomocą metody Dixona góra-dół z włóknami Von Freya na lewej tylnej łapie. Teraz umieść szczura w przezroczystym pudełku z pleksiglasu na aparacie Hargreavesa na godzinę i zmierz wyjściową czułość termiczną za pomocą testu Hargreavesa. Aby ocenić przedoperacyjne progi behawioralne, umieść laser na podczerwień pod środkiem lewej tylnej łapy zwierzęcia. Uruchom bodziec cieplny i zapisz czas potrzebny zwierzęciu na wycofanie łapy w odpowiedzi na ciepło. Po uzyskaniu podstawowych zachowań sensorycznych zwierzę należy umieścić w klatkach statycznych w celu ekspozycji na światło z ciągłym dostępem do jedzenia i wody przez cztery dni przed operacją. Po zakończeniu ekspozycji na światło o godzinie 14:00 Czwartego dnia wykonaj operację nacięcia lewej tylnej łapy zgodnie z modelem Brennan, aby wywołać ból pooperacyjny. Piątego dnia przeprowadź testy Von Freya i Hargreavesa, jak pokazano. Przygotuj pomieszczenie ekspozycyjne, upewniając się, że jest całkowicie wolne od wszelkich zewnętrznych źródeł światła, aby wyeliminować potencjalne zakłócenia. Ustaw światła LED w odległości od trzech do sześciu stóp od krzesła fotografowanej osoby. Następnie użyj luksomierza, aby upewnić się, że zakres natężenia światła wynosi od 90 do 100 luksów w głównym obszarze, w którym siedzi pacjent. Poinstruuj pacjenta, aby ocenił swój ból w skali od zera do 10. W przypadku pomiarów jednorazowych nałożyć filament Von Freya trzy razy w trzech różnych punktach w odstępie pięciu sekund. Aby zmierzyć sumowanie czasowe, nakładaj filament raz na sekundę, w sumie 10 razy. Następnie poproś osobę badaną, aby oceniła ból związany z ostateczną aplikacją. Po zapoznaniu się z nim pozwól pacjentowi zrobić trzyminutową przerwę. Następnie nałóż filament trzy razy w trzech różnych punktach dominującego mięśnia czworobocznego w pięciosekundowej przerwie między aplikacjami. Zmierz efekt sumowania czasowego po 10 aplikacjach na dominujący czworoboczny i zapisz odpowiedź badanego. W celu oceny warunkowej modulacji bólu przygotuj kąpiel w zimnej wodzie o temperaturze 12 stopni Celsjusza. Otwórz oprogramowanie MEDOC do oceny CPM. Wybierz opcję Algomed na ekranie głównym i wybierz urządzenie algometru, aby je aktywować. Po wybraniu odpowiedniego pacjenta należy wybrać odpowiedni program testowy. Wybierz lokację dla aplikacji urządzenia. Dla zapoznania się wybierz niedominujący mięsień czworoboczny ze schematu ciała. Poinformuj pacjenta, że urządzenie mierzy siłę wywieranego nacisku i będzie używane do wywierania nacisku na niedominującą stronę mięśnia czworobocznego. Poinstruuj pacjenta, aby przestał, gdy tylko zacznie odczuwać ból. Kliknij start w systemie, aby rozpocząć test, który nałoży pięciosekundowe odczekanie przed zastosowaniem nacisku, przyłóż algometr do mięśnia czworobocznego zwiększając siłę w tempie 30 kilopaskali na sekundę. Zapisz odpowiedź pacjenta na karcie zapisu. Sprawdź temperaturę wody w lodowatej łaźni wodnej za pomocą termometru, aby upewnić się, że wynosi około 12 stopni Celsjusza przed uruchomieniem timera na 10 sekund. Poinstruuj uczestnika, aby zanurzył swoją dominującą rękę w wodzie aż do nadgarstka, upewniając się, że ręka jest rozluźniona, a palce są rozstawione. Po upływie 10 sekund poproś uczestnika, aby ocenił swój ból w skali od zera do 10, gdy operator powie teraz. Po trzyminutowej przerwie poproś o pozwolenie na odsłonięcie dominującego mięśnia czworobocznego w celu warunkowej modulacji bólu lub oceny CPM. Kliknij start w oprogramowaniu, aby rozpocząć i poinstruuj pacjenta, aby powiedział stop, gdy zacznie odczuwać ból. Teraz przyłóż algometr do mięśnia czworobocznego, zwiększając siłę w tempie 30 kilopaskali na sekundę. Zapisz odpowiedź pacjenta na karcie zapisu. Pięć minut później poinstruuj pacjenta, aby zanurzył swoją niedominującą rękę aż do nadgarstka w lodowatej kąpieli wodnej. Przyłóż algometr do mięśnia czworobocznego, zwiększając siłę w tempie 30 kilopaskali na sekundę i zapisz odpowiedź. Po ustaleniu linii bazowej należy wystawić pacjenta na działanie przypisanego światła LED przez 1,5 godziny. Po terapii ekspozycją na światło powtórz wszystkie pomiary wykonane na linii bazowej. Zwiększenie intensywności zielonej diody LED znacznie zwiększyło opóźnienia wycofania łap u szczurów w ciągu siedmiu dni, przy najsilniejszym działaniu antynocyceptywnym zaobserwowanym przy natężeniu 200 luksów. Ekspozycja na zieloną diodę LED o natężeniu 100 luksów skutecznie odwróciła nadwrażliwość mechaniczną w modelu bólu szczurów wywołanego operacją łapy. Znaczne zwiększenie progów wycofania łapy w ciągu dwóch dni. Codzienna ekspozycja na zieloną diodę LED znacznie odwróciła nadwrażliwość termiczną objawiającą się zwiększonymi opóźnieniami wycofania łap po operacji nacięcia u szczurów. Wrażliwość mechaniczna została zwiększona przez sumowanie czasowe i zmniejszona przez warunkową modulację bólu.