Summary
इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम (ईसीजी) कार्डियक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी को समझने के लिए महत्वपूर्ण चर है। शारीरिक व्यायाम के लाभकारी प्रभाव होते हैं लेकिन हृदय रोगों के संदर्भ में भी हानिकारक हो सकते हैं। यह पांडुलिपि व्यायाम के दौरान वास्तविक समय ईसीजी रिकॉर्ड करने की एक विधि प्रदान करती है, जो चूहों में कार्डियक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी पर इसके प्रभावों की जांच करने के लिए काम कर सकती है।
Abstract
नियमित शारीरिक व्यायाम कार्डियोवैस्कुलर स्वास्थ्य में एक प्रमुख योगदानकर्ता है, जो विभिन्न चयापचय के साथ-साथ इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल प्रक्रियाओं को प्रभावित करता है। हालांकि, कुछ हृदय रोगों जैसे वंशानुगत अतालता सिंड्रोम, जैसे, अरिदमोजेनिक कार्डियोमायोपैथी (एसीएम) या मायोकार्डिटिस में, शारीरिक व्यायाम का हृदय पर नकारात्मक प्रभाव पड़ सकता है जिससे प्रोरिदमोजेनिक सब्सट्रेट उत्पादन हो सकता है। वर्तमान में, व्यायाम से संबंधित प्रोरिदमोजेनिक रीमॉडेलिंग के अंतर्निहित आणविक तंत्र काफी हद तक अज्ञात हैं, इस प्रकार यह स्पष्ट नहीं है कि रोग (ओं) के संदर्भ में व्यायाम की कौन सी आवृत्ति, अवधि और तीव्रता को सुरक्षित माना जा सकता है।
प्रस्तावित विधि ईसीजी की वास्तविक समय की निगरानी के साथ ट्रेडमिल प्रशिक्षण के संयोजन से शारीरिक व्यायाम के प्रोरैडमिक / एंटीरैडमिक प्रभावों का अध्ययन करने की अनुमति देती है। इम्प्लांटेबल टेलीमेट्री उपकरणों का उपयोग आराम और ट्रेडमिल प्रशिक्षण के दौरान 3 महीने तक की अवधि में स्वतंत्र रूप से चलने वाले चूहों के ईसीजी को लगातार रिकॉर्ड करने के लिए किया जाता है। अपने विश्लेषण मॉड्यूल के साथ डेटा अधिग्रहण सॉफ्टवेयर का उपयोग प्रशिक्षण के दौरान और बाद में बुनियादी ईसीजी मापदंडों जैसे हृदय गति, पी तरंग अवधि, पीआर अंतराल, क्यूआरएस अंतराल, या आराम पर क्यूटी अवधि का विश्लेषण करने के लिए किया जाता है। इसके अलावा, हृदय गति परिवर्तनशीलता (एचआरवी) मापदंडों और अतालता की घटना का मूल्यांकन किया जाता है। संक्षेप में, यह पांडुलिपि कार्डियक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी पर व्यायाम प्रेरित प्रभावों का प्रयोगात्मक रूप से पता लगाने के लिए एक चरण-दर-चरण दृष्टिकोण का वर्णन करती है, जिसमें माउस मॉडल में संभावित प्रोरैदमोजेनिक रीमॉडेलिंग शामिल है।
Introduction
एक स्वस्थ जीवन के लिए नियमित शारीरिक गतिविधि महत्वपूर्ण है। हालांकि, कुछ कार्डियोवैस्कुलर स्थितियां उन स्थितियों को जन्म देती हैं जहां यह सामान्य ज्ञान समझौता कम से कम संदिग्ध है। मायोकार्डिटिस वाले रोगियों में, वर्तमान डेटा भी व्यायाम के प्रतिकूल प्रभाव दिखाता है और इस प्रकार,इन रोगियों में एक निश्चित अवधि के लिए सभी व्यायाम को रोकने की सिफारिश की जाती है। अन्य कार्डियोवैस्कुलर बीमारियों (सीवीडी) जैसे वंशानुगत अतालता सिंड्रोम में व्यायाम के उचित स्तर पर तुलनात्मक रूप से कम सबूत मौजूद हैं 4,5,6,7, इन मामलों में नैदानिक परामर्श, ज्यादातर युवा और शारीरिक रूप से सक्रिय रोगियों के लिए, बहुत चुनौतीपूर्ण है।
प्रतिकूल रीमॉडेलिंग के कारण सिकुड़न और दिल की विफलता में कमी आती है और प्रोरिदमोजेनिक रीमॉडेलिंग के कारण अतालता और अचानक कार्डियक मृत्यु होती है,जिसे हृदय पर व्यायाम से जुड़े हानिकारक प्रभावों की पहचान के रूप में सुझाया गया है। बड़ी संख्या में अध्ययन विभिन्न बीमारियों के व्यापक स्पेक्ट्रम पर मध्यम व्यायाम के लाभकारी प्रभावों का संकेत देते हैं 9,10. हालांकि, व्यापक प्रशिक्षण का हृदय पर हानिकारक प्रभाव पड़ सकता है जिससे अतालता हो सकती है, खासकर अन्यथास्वस्थ एथलीटों में। यद्यपि संरचनात्मक रीमॉडेलिंग प्रक्रियाएं जो एक कमजोर प्रोरैडमिक सब्सट्रेट उत्पादन की ओर ले जाती हैं, इस विरोधाभास की स्थिति को कम कर सकती हैं जैसा कि मैराथन धावकों12 में दिखाया गया है, स्वस्थ लोगों और हृदय रोगों वाले रोगियों दोनों में व्यायाम से संबंधित प्रतिकूल रीमॉडेलिंग के विशिष्ट तंत्र काफी हद तक अज्ञात हैं।
जानवरों में, विशेष रूप से चूहों में,कार्डियोवैस्कुलर बीमारियों की एक विस्तृत श्रृंखला की नकल करने के लिए कई उपयुक्त मॉडल विकसित किए गए हैं। इसके अलावा, चूहों 15,16,17 में विभिन्न व्यायाम मॉडल और प्रशिक्षण प्रोटोकॉल स्थापित किए गए हैं, जिनमें मोटराइज्ड ट्रेडमिल प्रशिक्षण, स्वैच्छिक पहिया दौड़ना (वीडब्ल्यूआर), और तैराकी 17,18 शामिल हैं। ईसीजी निगरानी द्वारा कार्डियक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी का मूल्यांकन शास्त्रीय रूप से जानवर और किसी प्रकार के पहचान उपकरण के बीच प्रत्यक्ष संचालन संबंध पर निर्भर करता है। इस प्रकार, या तो जानवरों को एनेस्थेटाइज करने की आवश्यकता होती है, उदाहरण के लिए, तेज इलेक्ट्रोड19 का उपयोग करके ईसीजी रिकॉर्डिंग प्राप्त करने के लिए, या जानवरों को एक निरोधक 20 द्वारा स्थिर करने की आवश्यकता होती है, या गति कलाकृतियों के कारण डेटा की गुणवत्ता कम हो जाती है, उदाहरण के लिए, पंजा-इलेक्ट्रोड21 या प्रवाहकीय प्लेटफॉर्म22 का उपयोग करते समय केवल बुनियादी विश्लेषण की अनुमति देते हैं। इस प्रकार, उपर्युक्त दृष्टिकोणों में से कोई भी प्रशिक्षण प्रोटोकॉल के साथ संगत नहीं है और परिणामस्वरूप चूहों में प्रतिकूल रीमॉडेलिंग के कारण व्यायाम से संबंधित तंत्र पर अध्ययन को रोकता है। इम्प्लांटेबल टेलीमेट्री डिवाइस इन बाधाओं को दूर कर सकते हैं और आजकल जागरूक औरगतिशील जानवरों में विवो में मुराइन इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी का मूल्यांकन करने के लिए सबसे शक्तिशाली उपकरण और स्वर्ण मानक हैं। वर्तमान टेलीमेट्री हार्डवेयर समाधान ों को उनके पिंजरों25,26 में चूहों की निगरानी के लिए विकसित किया गया है, और आमतौर पर डेटा अधिग्रहण के लिए पिंजरे के नीचे एक रिसीवर रखने की आवश्यकता होती है, इस प्रकार इन परिस्थितियों के बाहर वास्तविक समय की निगरानी चुनौतीपूर्ण हो जाती है। यहां हम प्रत्यारोपित टेलीमेट्री उपकरणों का उपयोग करके चूहों में ट्रेडमिल प्रशिक्षण के दौरान वास्तविक समय ईसीजी रिकॉर्डिंग द्वारा कार्डियक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी और अर्रिदमोजेनेसिस पर व्यायाम के प्रभावों की जांच करने के लिए एक दृष्टिकोण प्रदान करते हैं। प्राप्त सभी मापदंडों का विश्लेषण किया गया था जैसा कि पहले टॉमसिट्स एट अल .23 द्वारा वर्णित किया गया था।
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Protocol
सभी पशु प्रक्रियाओं को म्यूनिख विश्वविद्यालय की पशु देखभाल और नैतिकता समिति के दिशानिर्देशों के अनुसार आयोजित किया गया था और सभी प्रक्रियाओं को बवेरिया, म्यूनिख, जर्मनी सरकार (आरओबी -55.2-2532.Vet_02-16-200) द्वारा अनुमोदित किया गया था। इस अध्ययन में चार नर वाइल्डटाइप इन-हाउस ब्रीड सी 57बीएल / 6 एन चूहों का उपयोग किया गया था।
1. ट्रांसमीटर की तैयारी और सर्जिकल आरोपण।
नोट: ट्रांसमीटर तैयारी और आरोपण के विस्तृत प्रोटोकॉल के लिए मैककौली एट अल .26 देखें।
- ट्रांसमीटर की तैयारी
- सीधे नए ट्रांसमीटरों का उपयोग करें क्योंकि ये बाँझ हैं। यदि ट्रांसमीटरों का पुन: उपयोग किया जाता है, तो रक्त के धब्बों से छुटकारा पाने के लिए इसे खारा में रखकर डिवाइस को साफ करें, ट्रांसमीटर और लीड इलेक्ट्रोड का पालन करने वाले ऊतक के किसी भी टुकड़े को हटा दें। प्रारंभिक सफाई के बाद, यदि आवश्यक हो, तो ट्रांसमीटर को और साफ करने के लिए ट्रांसमीटर को 4 घंटे के लिए 1% सफाई समाधान ( सामग्री की तालिका देखें) में डुबोएं।
- आपूर्ति किए गए चुंबक को निकटता में रखकर ट्रांसमीटर को सक्रिय करें। सक्रियण के बाद, 530 हर्ट्ज एएम आवृत्ति पर रेडियो डिवाइस का उपयोग करके ट्रांसमीटर से सिग्नल का परीक्षण करें। एक तेज और स्पष्ट बीप इंगित करता है कि ट्रांसमीटर सक्रिय है, जबकि एक निष्क्रिय ट्रांसमीटर कोई संकेत नहीं देता है।
- शल्य चिकित्सा की तैयारी और प्रत्यारोपण
नोट: सभी शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं को साफ और बाँझ परिस्थितियों में किया जाना चाहिए।- बाँझ डिस्पोजेबल, जैसे, धुंध, दस्ताने, आदि का उपयोग करने से पहले सभी सतहों और पुन: प्रयोज्य उपकरणों को कीटाणुरहित करें।
- इष्टतम लंबाई तक छोटा करके ट्रांसमीटर के लीड तैयार करें, नकारात्मक (सफेद) लगभग 3.5 सेमी और सकारात्मक (लाल) 2.5 सेमी तक ले जाता है। 5-7 मिमी के संचालन तार को उजागर करने के लिए एक छोटा सा कट बनाकर इलेक्ट्रोड की नोक पर लाल और सफेद इन्सुलेशन म्यान को हटा दें।
नोट: इन लंबाई का सुझाव 9-12 सप्ताह के बीएएलबी / सी या सी 57बीएल / 6 चूहों के लिए दिया जाता है, जिसका वजन ~ 25 ग्राम है। समायोजित करें कि अध्ययन में उपयोग किए जाने वाले जानवर बड़े / भारी हैं। - ट्रांसमीटर के वजन और माउस के शरीर के वजन पर ध्यान दें। इसके अलावा, डीएसआई द्वारा प्रदान किए गए ट्रांसमीटर के सीरियल नंबर और अंशांकन मूल्यों पर ध्यान दें।
नोट: पशु के शरीर के वजन का उपयोग एनेस्थेटिक्स और एनाल्जेसिक की खुराक की गणना करने के लिए किया जाता है। प्रारंभिक शरीर के वजन का उपयोग सर्जरी के बाद पशु वसूली का मूल्यांकन करने के लिए संदर्भ के रूप में भी किया जाता है। - माउस को एक इंडक्शन चैंबर में एनेस्थेटाइज करें जो एक आइसोफ्लुरेन वेपोराइज़र से जुड़ा होता है जो 100% ऑक्सीजन के 1 एल / मिनट द्वारा संचालित 2% -3% आइसोफ्लुरेन (वॉल्यूम / वॉल्यूम) से भरा होता है। पूर्ण नार्कोसिस की शुरुआत की प्रतीक्षा करें और आगे बढ़ने से पहले नार्कोसिस की उचित गहराई सुनिश्चित करने के लिए पैर की अंगुली-चुटकी और ढक्कन रिफ्लेक्स की जांच करें।
- इसके बाद, एनेस्थेटाइज्ड जानवर को लापरवाह स्थिति में रखें और प्रक्रिया के दौरान आंखों की सूखापन को रोकने के लिए मलहम ( सामग्री की तालिका देखें) का उपयोग करें। माउस के शरीर के तापमान को 37 डिग्री सेल्सियस पर बनाए रखने के लिए सर्जिकल सूट पर साफ परिस्थितियों में सर्जिकल प्रक्रिया करें। तापमान सेंसर के रूप में एक रेक्टल प्रोब डालें।
- निरंतर आइसोफ्लुरेन (1.5% -2%) आवेदन द्वारा संज्ञाहरण बनाए रखें। एनाल्जेसिया के लिए फेंटेनिल (0.50 μg / g) इंट्रापरिटोनियल इंजेक्शन दें। ऑपरेटिंग रूम (अनुशंसित) में भागने के लिए अतिरिक्त गैस से बचने के लिए एक अधिशोषक को वेंटिलेशन सेटअप से कनेक्ट करें।
- सर्जरी के दौरान ईसीजी की निगरानी करने और बेसलाइन ईसीजी प्राप्त करने के लिए लीड आई ईसीजी कॉन्फ़िगरेशन प्राप्त करने के लिए माउस के बाएं पैर में दोनों बाहों और ग्राउंडिंग इलेक्ट्रोड में सुई ईसीजी इलेक्ट्रोड डालें।
- पेट और छाती को शेव करें और क्लोरहेक्सिडाइन / अल्कोहल का उपयोग करके सर्जरी के क्षेत्र को कीटाणुरहित करें ( सामग्री की तालिका देखें)। त्वचा को कसने के लिए चिमटी का उपयोग करें और कैंची (लैप्रोटॉमी) का उपयोग करके 1.5-2 सेमी वेंट्रल मिडलाइन पेट का चीरा लगाएं।
- इलेक्ट्रोड लीड रखने के लिए ऊपरी-दाएं छाती और दिल के नीचे निचले-बाएं छाती में एक चमड़े के नीचे की जेब (सीए 1 मिमी) बनाएं, जैसा कि चित्र 1 में दिखाया गया है।
- ट्रांसमीटर शरीर को आंत के ऊपर पेरिटोनियम में धीरे से रखें। इलेक्ट्रोड पोजिशनिंग के लिए एक सुरंग बनाने के लिए ऊपरी-दाएं छाती और निचले-बाएं छाती की जेब में दोनों जेबों से 14 ग्राम की सुई डालें।
- लाल और सफेद इलेक्ट्रोड को सुई के माध्यम से मार्गदर्शन करें ताकि उन्हें लीड II कॉन्फ़िगरेशन में रखा जा सके। 6.0 सीवन, निचले-बाएं छाती में सकारात्मक इलेक्ट्रोड (लाल) और ऊपरी-दाएं छाती में नकारात्मक इलेक्ट्रोड (सफेद) के साथ इलेक्ट्रोड युक्तियों को स्थिति और ठीक करें।
- 6.0 सीवन का उपयोग करके सभी चीरों को सीवन करें और घावों पर कीटाणुनाशक ( सामग्री की तालिका देखें) लागू करें। जानवर को एक रिकवरी पिंजरे (केवल एक जानवर / पिंजरे) में ले जाएं और नार्कोसिस की पूरी वसूली तक शरीर के तापमान को बनाए रखने के लिए इसे गर्मी स्रोत के नीचे रखें। केवल पूरी तरह से ठीक होने और उरोस्थि पुनरावृत्ति को बनाए रखने की क्षमता के बाद ही जानवर को यदि आवश्यक हो तो कंपनी में वापस रखा जा सकता है।
- सर्जरी के बाद पशु को एनाल्जेसिक और एंटीबायोटिक दवाओं की पर्याप्त खुराक प्रदान करें। एनाल्जेसिक के रूप में कार्प्रोफेन (5 μg / g) और एंटीबायोटिक के रूप में enrofloxacin (5 μg / g) का उपयोग करें। यह सुनिश्चित करने के लिए नियमित अंतराल पर घाव की निगरानी करें कि कोई सूजन या घाव की कमी नहीं है।
- सर्जरी के बाद रिकवरी अवधि के 7-10 दिनों के बाद, जानवर ट्रेडमिल प्रशिक्षण से गुजरने के लिए तैयार है। सुनिश्चित करें कि घाव ठीक से ठीक हो गए हैं, और प्रशिक्षण शुरू करने से पहले माउस स्वस्थ है।
नोट: प्रयोगात्मक अवधि को अंतिम रूप देने के बाद, टेलीमेट्री ट्रांसमीटरों के उपयोग के लिए एक विशिष्ट इच्छामृत्यु विधि की आवश्यकता नहीं होती है। विधि का विकल्प बाद के विश्लेषण और ऊतक की स्थिति के लिए इसकी विशिष्ट आवश्यकताओं के साथ-साथ स्थानीय पशु देखभाल नियमों और विनियमों और संबंधित स्थानीय नैतिकता समिति के अनुमोदन पर निर्भर करता है।
2. डेटा अधिग्रहण
- पूर्व व्यवस्थाएँ
- डेटा अधिग्रहण शुरू करने के लिए, सिग्नल रिसीवर पर पशु पिंजरे रखें। सिग्नल रिसीवर को डेटा अधिग्रहण प्रणाली से कनेक्ट करें जिसमें डेटा एक्सचेंज मैट्रिक्स और सिग्नल इंटरफ़ेस शामिल हैं। डेटा विज़ुअलाइज़ेशन के लिए अधिग्रहण सॉफ़्टवेयर के साथ डेटा अधिग्रहण सिस्टम को कंप्यूटर से कनेक्ट करें ( चित्रा 2 ए में सेटअप विवरण देखें)।
- सॉफ़्टवेयर प्रारंभ करें और निम्न स्क्रीन पर उपयोगकर्ता नाम और लायसेंस की पुष्टि करें, और उसके बाद जारी रखें क्लिक करें। ट्रांसमीटर और सिग्नल रिसीवर डिवाइस सेट करने के लिए हार्डवेयर पर क्लिक करें। कॉन्फ़िगरेशन विंडो खोलने के लिए फिजियो टेल/HD (MX2) कॉन्फ़िगरेशन संपादित करें का चयन करें.
- उपलब्ध स्तंभ में सभी उपलब्ध ट्रांसमीटरों और उनके सीरियल नंबर देखने के लिए कॉन्फ़िगरेशन टैब के सूची दृश्य में MX2 कॉन्फ़िगरेशन का चयन करें। प्रत्यारोपित ट्रांसमीटर को उपलब्ध स्तंभ से चयनित स्तंभ में क्लिक करें और खींचें.
नोट: यदि कोई ट्रांसमीटर चयनित स्तंभ में सूचीबद्ध है, तो इसे सबसे बाईं ओर कॉन्फ़िगरेशन टैब में MX2 कॉन्फ़िगरेशन में भी जोड़ा जाता है। - ट्रांसमीटर के सीरियल नंबर के बगल में रंगीन आइकन स्थिति का संकेत देते हैं। सभी ट्रांसमीटरों के लिए स्थिति की जांच करें: चेकमार्क के साथ हरा = ट्रांसमीटर सिंक्रनाइज़ और तैयार है; विस्मयादिबोधक चिह्न के साथ लाल = ट्रांसमीटर वर्तमान में उपलब्ध नहीं है, उदाहरण के लिए, वर्तमान में किसी अन्य सिस्टम पर एक प्रयोग में कॉन्फ़िगर किया गया है; पीला = ट्रांसमीटर सिंक्रनाइज़ हो रहा है या इसमें कोई रिसीवर कनेक्ट नहीं है। सुनिश्चित करें कि नाममात्र डेटा स्थानांतरण का संकेत देने वाली हरी रोशनी है।
- ट्रांसमीटर को कॉन्फ़िगर करने के लिए, जोड़े गए ट्रांसमीटर के सीरियल नंबर का चयन करें और नया इम्प्लांट बनाएं पर क्लिक करें। इम्प्लांट विवरण देखने के लिए इम्प्लांट मॉडल के ड्रॉपडाउन मेनू से ईटीए-एफ 10 का चयन करें।
- इम्प्लांट से जुड़े रिसीवर (ओं) के दूर-बाएं मेनू से रिसीवर के मॉडल और सीरियल नंबर का चयन करें। प्लग किए गए और कनेक्टेड रिसीवरों की एक सूची चेकबॉक्स के साथ इस मेनू के तहत दिखाई देती है।
- प्रत्यारोपित ट्रांसमीटर को सिग्नल रिसीवर असाइन करने के लिए ईटीए इम्प्लांट के लिए खोज पर क्लिक करें। सिग्नल प्रकार मेनू खोलें और 1,000 हर्ट्ज की नमूना दर के साथ ईसीजी का चयन करें। इम्प्लांट की पैकेजिंग के पीछे अंशांकन मान दर्ज करें। सहेजें और बाहर निकलें का चयन करें.
- मेनू बार में सेटअप पर क्लिक करें और विषय सेटअप का चयन करें। विषय विवरण के साथ एक संवाद बॉक्स दिखाई देगा। वांछित फ़ाइल नाम दर्ज करें, जो विषय सेटअप में सहेजा जाएगा।
- जानवर के लिंग का चयन करें और प्रजातियों के ड्रॉप-डाउन मेनू से माउस का चयन करें। विश्लेषण ड्रॉप-डाउन मेनू खोलें और ईसीजी (मॉड्यूल) का चयन करें। यदि वांछित हो तो डिफ़ॉल्ट लेबलिंग को ईसीजी और इकाइयों को एमवी में बदलें। ईसीजी से सटे ट्रिगर का चयन करें।
- चैनल विवरण मेनू खोलने के लिए दूर-दाएं मेनू के भीतर विषय नाम के तहत ईसीजी पर क्लिक करें। वांछित ईसीजी पैरामीटर जैसे कि संख्या (चक्र संख्या), मानव संसाधन (हृदय गति), या अंतराल जैसे पीआर-1, क्यूटी-1, आरआर-आई, क्यूआरएस आदि का चयन करें। पैरामीटर सूची से.
- प्रदर्शन सेट करने के लिए, मेनू पट्टी में सेटअप पर क्लिक करें और प्रयोग सेटअप का चयन करें। एक सेटअप संवाद बॉक्स प्रकट होता है। कच्चे डेटा को प्रदान करने वाली 16 ग्राफिकल विंडो को परिभाषित करने के लिए दूर-दाएं मेनू से ग्राफ सेटअप का चयन करें, जैसे, ईसीजी सिग्नल और व्युत्पन्न पैरामीटर, जैसे, एक्सवाई लूप, एचआर ट्रेंड। ईसीजी प्रदर्शित करने के लिए, पृष्ठ 1 के लिए पृष्ठ सक्षम करें चेकबॉक्स का चयन करें.
- एक साथ रियल-टाइम ईसीजी रिकॉर्डिंग के साथ ट्रेडमिल प्रशिक्षण
- प्रशिक्षण के दौरान वास्तविक समय ईसीजी निगरानी के साथ 2-लेन ट्रेडमिल के लिए चित्रा 2 बी में दिखाए गए अनुसार एक प्रयोगात्मक सेटअप तैयार करें।
नोट: प्रशिक्षण के लिए एक 5-लेन कृंतक ट्रेडमिल ( सामग्री की तालिका देखें) की सिफारिश की जाती है। सेटअप में एक कन्वेयर बेल्ट होता है जो पांच रनिंग कम्पार्टमेंट में विभाजित होता है और टचस्क्रीन के साथ एक नियंत्रण इकाई होती है। प्रत्येक रनिंग कम्पार्टमेंट एक पारदर्शी प्लेक्सीग्लास बॉक्स द्वारा बनाया जाता है, जिसमें एक ढक्कन होता है, जिसे कन्वेयर बेल्ट पर रखा जाता है। प्रत्येक डिब्बे में एक इलेक्ट्रिक शॉक ग्रिड होता है जहां छोटी विद्युत दालें जानवर को चलाने के लिए उत्तेजना के रूप में कार्य करती हैं। प्रत्येक डिब्बे को व्यक्तिगत रूप से नियंत्रण इकाई से जोड़ा जाता है ताकि सदमे की तीव्रता के डिब्बे विशिष्ट समायोजन को सक्षम किया जा सके। नियंत्रण इकाई दूरी रन, झटके की संख्या और झटके की कुल अवधि प्रदर्शित कर सकती है। चूंकि सभी डिब्बे एक ही कन्वेयर बेल्ट साझा करते हैं, इसलिए गति और झुकाव को केवल एक ही समय में सभी डिब्बों के लिए समायोजित किया जा सकता है। - प्रशिक्षण के दौरान अच्छे सिग्नल ट्रांसडक्शन को सक्षम करने के लिए, सिग्नल रिसीवर को बॉक्स के शीर्ष पर रखें जो जानवर के साथ रनिंग लेन स्थापित करता है जैसा कि चित्रा 2 बी में दिखाया गया है। रनिंग लेन पर सिग्नल रिसीवर की सटीक स्थिति अलग-अलग सिग्नल / शोर अनुपात के कारण अलग-अलग जानवरों के बीच भिन्न होती है।
- सिग्नल रिसीवर को तब तक ले जाएं जब तक कि रनिंग लेन पर इष्टतम स्थिति न मिल जाए। प्रशिक्षण के तहत एक जानवर के साथ एक परीक्षण प्रयोग चलाकर ऐसा करें और सबसे अच्छा संकेत / शोर अनुपात के साथ स्थिति नोट करें। वास्तविक प्रयोग के लिए इस इष्टतम स्थिति का उपयोग करें।
नोट: सिग्नल रिसीवर के आकार और रिसीवर के सामान्य स्थान के कारण रनिंग लेन की धुरी पर (जैसा कि चित्रा 2 बी में दिखाया गया है), इस कॉन्फ़िगरेशन में ईसीजी निगरानी के साथ एक ही समय में केवल दो जानवर प्रशिक्षित कर सकते हैं।
- सिग्नल रिसीवर को तब तक ले जाएं जब तक कि रनिंग लेन पर इष्टतम स्थिति न मिल जाए। प्रशिक्षण के तहत एक जानवर के साथ एक परीक्षण प्रयोग चलाकर ऐसा करें और सबसे अच्छा संकेत / शोर अनुपात के साथ स्थिति नोट करें। वास्तविक प्रयोग के लिए इस इष्टतम स्थिति का उपयोग करें।
- ट्रेडमिल प्रशिक्षण को निम्नलिखित दो चरणों में विभाजित करें।
- अनुकूलन चरण: वह समय जिसके दौरान जानवर को प्रशिक्षण स्थितियों के लिए अनुकूलित किया जाता है। तालिका 1 में दिखाए गए अनुसार 1-सप्ताह का अनुकूलन प्रोटोकॉल करें, जैसा कि वर्णित प्रत्येक दिन के लिए दौड़ने की गति और प्रशिक्षण का समय है।
- प्रशिक्षण चरण: अनुकूलन के बाद जानवर को कुल एक्स दिनों के लिए प्रति दिन एक निश्चित समय के लिए एक निश्चित गति से प्रशिक्षित किया जाता है। इस प्रोटोकॉल के लिए, 25 सेमी / सेकंड की निरंतर गति और 60 मिनट / दिन की अवधि के साथ 3 सप्ताह से अधिक 5-दिवसीय प्रशिक्षण शासन करें (तालिका 2)। प्रशिक्षण के 5 दिनों के बाद, प्रशिक्षण के अगले सप्ताह से पहले 2 दिन का ब्रेक प्रदान करें।
नोट: एक्स प्रशिक्षण के दिनों की कुल संख्या को परिभाषित करता है और प्रयोगात्मक उद्देश्य के आधार पर परिभाषित किया गया है।
- ट्रेडमिल पर स्विच करें। प्रशिक्षण प्रोटोकॉल के अनुसार ट्रेडमिल ढलान, गति और सदमे की तीव्रता सेट करें। 5 ° के ऊपर की ओर ढलान का उपयोग करें, जो तनाव के मध्यम स्तर की ओर जाता है (अनुशंसित)। अनुकूलन चरण और प्रशिक्षण चरण के लिए एक ही झुकाव का उपयोग करें।
नोट: ट्रेडमिल का झुकाव प्रशिक्षण तीव्रता को परिभाषित करता है; वांछित झुकाव चुनें। प्रशिक्षण प्रोटोकॉल प्रयोगात्मक उद्देश्य के आधार पर भिन्न हो सकता है। - नियंत्रण इकाई में सेटिंग्स पर दबाएँ और ग्रिड परीक्षण का चयन करें। यह एक ग्रिड आकार चयन स्क्रीन खोलता है। चूहों का चयन करें। एक ग्रिड टेस्ट स्क्रीन दो उप-परीक्षणों के साथ दिखाई देगी: शॉक टेस्ट और क्लीनिंग टेस्ट। शॉक टेस्ट शुरू करने के लिए स्टार्ट पर दबाएं। परीक्षण झटके के उपयोगकर्ता को चेतावनी देने वाला एक संदेश दिखाई देगा। परीक्षण शुरू करने के लिए, स्क्रीन को छूकर चेतावनी की पुष्टि करें।
- ट्रेडमिल के साथ प्रदान किए गए स्पंज एक्सेसरी के प्रवाहकीय भाग को ट्रेडमिल के ग्रिड पर रखें। इसे तब तक रखें जब तक कि स्क्रीन पर पास शब्द दिखाई न दे। इस तरह सभी ग्रिड का परीक्षण करें। सभी लेन के सफलतापूर्वक पास करने के बाद परीक्षण स्वचालित रूप से समाप्त हो जाएगा , लेकिन स्टॉप बटन दबाकर उपयोगकर्ता द्वारा कभी भी रोका जा सकता है।
- सफाई परीक्षण जारी रखने के लिए, >> बटन और प्रारंभ दबाएं और परीक्षण चलाने की प्रतीक्षा करें। जैसे ही सभी लेन इसे पास कर लेंगी, यह टेस्ट भी अपने आप बंद हो जाएगा। यदि परीक्षण विफल रहता है, तो स्क्रीन पर एक चेतावनी संदेश दिखाई देगा। परिणाम देखने के लिए संदेश स्पर्श करें.
नोट: ये परीक्षण ग्रिड की स्वच्छता और कार्य की जांच करने के लिए किए जाते हैं। जानवरों का पता लगाने के लिए ग्रिड साफ होने चाहिए और बाद में जरूरत पड़ने पर विद्युत उत्तेजना का सही वितरण सुनिश्चित करना चाहिए। यदि परीक्षण विफल हो जाता है, तो ग्रिड को साफ करें, जांचें कि क्या सभी केबल ठीक से जुड़े हुए हैं और परीक्षण दोहराएं। - जानवर को रनिंग कम्पार्टमेंट में स्थानांतरित करें। सिग्नल रिसीवर को पारदर्शी बॉक्स पर रखें और सिग्नल रिसीवर को कनेक्टिंग केबल के माध्यम से डेटा अधिग्रहण प्रणाली से कनेक्ट करें, जिसमें एक डेटा एक्सचेंज मैट्रिक्स और एक सिग्नल इंटरफ़ेस होता है, जो बदले में प्रयोग के दौरान ईसीजी सिग्नल को देखने के लिए चल रहे अधिग्रहण सॉफ्टवेयर के साथ कंप्यूटर से जुड़ता है।
- रनिंग मोड में प्रवेश करने के लिए प्रारंभ दबाएँ। इलेक्ट्रिक ग्रिड के संपर्क में आने पर जानवरों को एक छोटा विद्युत आवेग प्राप्त होगा, जो जानवर को रनिंग लेन की ओर अग्रसर करेगा। 0.1 एमए की न्यूनतम सदमे तीव्रता का उपयोग करें। यह जानवरों को प्रेरित करने के लिए पर्याप्त है लेकिन ईसीजी रिकॉर्डिंग में दिखाई नहीं देता है। इसे प्रेरित रखने के लिए जानवर के दृश्य के भीतर चलने वाली लाइनों के बाहर भोजन के छर्रों को रखने का प्रयास करें।
नोट: बिजली के झटके के लिए निर्माता द्वारा दी गई सीमा 0.1 एमए -2 एमए है। विभिन्न माउस उपभेदों में या विभिन्न प्रयोगात्मक स्थितियों के तहत सदमे की तीव्रता में वृद्धि आवश्यक हो सकती है, फिर भी, हम सबसे कम झटके की तीव्रता का उपयोग करने की सलाह देते हैं। वैकल्पिक रूप से, समग्र बिजली के झटके को कम करने के लिए, जानवर को धीरे से धक्का देकर चलने वाली लेन पर रखने की कोशिश करें, उदाहरण के लिए, कपास के कान की कलियों के साथ या संपीड़ित हवा के कोमल कश के साथ उत्तेजित करके। यदि जानवरों को अच्छी तरह से प्रशिक्षित किया जाता है, तो अवांछित झटके से बचने के लिए स्टायरोफोम के एक टुकड़े द्वारा इलेक्ट्रिक ग्रिड और रनिंग लेन को अलग किया जा सकता है। - यदि कोई जानवर प्रशिक्षित नहीं होता है और बिजली के झटके से भी प्रेरित नहीं किया जा सकता है, तो उसे उस दिन के प्रशिक्षण प्रोटोकॉल से हटा दें यदि प्रयोग के पहले 15 मिनट के भीतर कोई सुधार नहीं होता है।
- पूरा होने पर, जानवर को पिंजरे में वापस स्थानांतरित करने से पहले प्रशिक्षण के बाद 5 मिनट तक आराम करने की अनुमति दें। पारदर्शी बॉक्स से सिग्नल रिसीवर को निकालें और इसे पिंजरे के नीचे वापस रखें जैसा कि चित्रा 2 ए में दिखाया गया है। किसी भी अवांछित झटके से बचने के लिए ट्रेडमिल बंद कर दें।
- ट्रेडमिल बेल्ट, रनिंग कम्पार्टमेंट और इलेक्ट्रिक ग्रिड को गैर-मादक सफाई एजेंट के साथ साफ करें। साफ गलियों से बेहतर प्रशिक्षण परिणाम मिलते हैं।
नोट: प्रशिक्षण के दौरान, गलियों को लगातार साफ करना महत्वपूर्ण है, क्योंकि जानवर गंदी गलियों पर दौड़ना बंद कर देते हैं। हम प्रशिक्षण के दौरान जानवरों के मल से छुटकारा पाने के लिए कपास कान की कलियों का उपयोग करते हैं।
- प्रशिक्षण के दौरान वास्तविक समय ईसीजी निगरानी के साथ 2-लेन ट्रेडमिल के लिए चित्रा 2 बी में दिखाए गए अनुसार एक प्रयोगात्मक सेटअप तैयार करें।
3. डेटा विश्लेषण
नोट: व्यक्तिगत अनुसंधान लक्ष्यों के आधार पर, विभिन्न मापदंडों को प्राप्त और विश्लेषण किया जा सकता है। यह प्रोटोकॉल दो पहलुओं पर केंद्रित है: मात्रात्मक ईसीजी लक्षणों का विश्लेषण और टॉमसिट्स एटअल .23 द्वारा पहले वर्णित दृष्टिकोण का उपयोग करके प्रशिक्षण से पहले, दौरान और बाद में अतालता की घटना; और हृदय गति परिवर्तनशीलता (एचआरवी) 27 का विश्लेषण।
- ईसीजी विश्लेषण
- विस्तृत विवरण के लिए, टॉमसिट्स एट अल.23 देखें। संक्षेप में, सॉफ़्टवेयर प्रारंभ करें, सॉफ़्टवेयर लाइसेंस के उपयोगकर्ता नाम और सीरियल नंबर की पुष्टि करें, और जारी रखें पर क्लिक करें।
- एक्सटेंशन के साथ किसी फ़ाइल को खोलने के लिए. PnmExp, लोड प्रयोग पर क्लिक करें। फ़ोल्डर के लिए ब्राउज़ करें संवाद खुलता है, फ़ाइल का चयन करें, और खोलें पर क्लिक करें।
- उपकरण पट्टी में क्रियाएँ/ प्रारंभ समीक्षा पर जाएँ और लोड समीक्षा डेटा संवाद बॉक्स का चयन करें, जो पहले चयनित प्रयोग के भीतर सभी विषयों और उनके रिकॉर्ड किए गए संकेतों का अवलोकन प्रदान करता है.
- स्क्रीन के बाईं ओर विषय पैनल में अपने नाम के आगे चेकबॉक्स पर क्लिक करके विश्लेषण करने के लिए फ़ाइल का चयन करें। ईसीजी का विश्लेषण करने के लिए, सिग्नल प्रकार पैनल में ईसीजी के बगल में चेकबॉक्स का चयन करें।
- या तो संपूर्ण रिकॉर्डिंग का चयन करें या समय सीमा विकल्प का उपयोग करके एक श्रेणी या अवधि परिभाषित करें। चयनित डेटा सेट को समीक्षा में लोड करने के लिए ठीक पर क्लिक करें और घटनाओं और मापदंडों के लिए विंडो स्वचालित रूप से खुलती हैं।
- ईसीजी प्रदर्शित करने के लिए, एक नई विंडो खोलने के लिए मेनू टूलबार में ग्राफ सेटअप पर क्लिक करें। सिग्नल प्रकार में प्राथमिक का चयन करें, समय 0:00:00:01 दर्ज करें, और फिर संबंधित पाठ बॉक्स दर्ज करके वांछित लेबलिंग, प्रदर्शन की इकाई और निम्न और उच्च अक्ष सीमाओं का चयन करें। सक्षम पृष्ठ चेकबॉक्स पर क्लिक करके पुष्टि करें और परिभाषित ईसीजी ट्रेसिंग विंडो दिखाई देती है।
- डबल क्लिक करके ईसीजी के एक्स-अक्ष और वाई-अक्ष आयामों को समायोजित करें। वेव एनोटेशन दिखाने के लिए ट्रेस में बाएं क्लिक करें और ट्रेस, पी, क्यू, आर, टी वेव के प्रत्येक सेगमेंट को सही ढंग से पहचानें और एनोटेट करें।
नोट: यदि एनोटेशन सही नहीं हैं, तो कई विकल्प, क्यूआरएस, पीटी, उन्नत, शोर, मार्क्स, नोट्स, परिशुद्धता, का उपयोग अनुकूलित करने के लिए किया जा सकता है, उदाहरण के लिए, राइट क्लिक का उपयोग करके विश्लेषण / विशेषता विकल्प। विस्तृत विवरण के लिए देखें टॉमसिट्स एट अल.23. - पैरामीटर विंडो से आवश्यक ईसीजी पैरामीटर का चयन करें और आगे के विश्लेषण के लिए स्प्रेडशीट या सांख्यिकी सॉफ्टवेयर में कॉपी करें।
- अतालता का पता लगाना
- अतालता का पता लगाने के लिए, एक नई डेटा अंतर्दृष्टि विंडो खोलने के लिए प्रयोग / डेटा इनसाइट्स पर क्लिक करें।
- खोज कक्ष में रिकॉर्डिंग स्क्रीन करने के लिए अनुकूलित खोज नियम निर्धारित करें. खोज सूची में राइट क्लिक के बाद नई खोज बनाएँ का चयन करके एक नई खोज बनाएँ .
- प्रविष्टि संवाद के ड्रॉपडाउन मेनू में, संबंधित खोज नियम निर्धारित करें और इस खोज नियम को सूची में जोड़ने के लिए ठीक पर क्लिक करें. खोज नियमों को लागू करने के लिए, क्लिक करें और उन्हें बाईं ओर रुचि के चैनल पर खींचें।
- परिणाम पैनल में, ईसीजी रिकॉर्डिंग के भीतर प्रत्येक अनुभाग जिस पर नियम लागू होता है, प्रदर्शित होता है। विभिन्न खोज नियमों पर विस्तृत अवलोकन के लिए, Tomsits et al.23 देखें। दो अनुकरणीय नियमों, ब्रैडीकार्डिया और टैचीकार्डिया के लिए, नीचे परिभाषा और विवरण देखें।
नोट: इन खोज नियमों के लिए, म्यूरिन फिजियोलॉजिकल हृदय गति को केसे एट अल.28 के अनुसार 500-724 बीट्स / मिनट के रूप में परिभाषित किया गया है, जो 82-110 एमएस की चक्र लंबाई के अनुरूप है।- ब्रैडीकार्डिया: दो-चरणीय दृष्टिकोण में, 120 एमएस से अधिक लंबे प्रत्येक व्यक्तिगत आरआर अंतराल की पहचान करें। चूंकि ब्रैडीकार्डिया को एक से अधिक लम्बी आरआर अंतराल की आवश्यकता होती है, इसलिए ब्रैडीकार्डिया के रूप में 120 एमएस से अधिक लंबे 20 लगातार आरआर अंतराल ों की पहचान करने के लिए एक अतिरिक्त खोज नियम को परिभाषित करें: ब्रैडीकार्डिया-सिंगल एएस वैल्यू (एचआरसाइक0) <500, और ब्रैडीकार्डिया सीरीज के रूप में (ब्रैडीकार्डिया-सिंगल, 1) > = 20। इस खोज नियम को सूची में जोड़ने के लिए ठीक पर क्लिक करें.
- टैचीकार्डिया के लिए एक ही दृष्टिकोण का पालन करते हुए, टैचीकार्डिया-सिंगल को वैल्यू (एचआरसाइक0) >724) के रूप में परिभाषित करें, प्रत्येक व्यक्तिगत आरआर अंतराल की पहचान करें जो 82 एमएस से कम है, और फिर अतिरिक्त खोज नियम टैचीकार्डिया को श्रृंखला (टैचीकार्डिया-सिंगल, 1) > = 20 के रूप में जोड़ें। इस खोज नियम को सूची में जोड़ने के लिए ठीक पर क्लिक करें.
- हृदय गति परिवर्तनशीलता विश्लेषण
नोट: हृदय गति परिवर्तनशीलता (एचआरवी) विश्लेषण अधिग्रहण सॉफ्टवेयर में नहीं किया जाता है और अधिग्रहण सॉफ्टवेयर से डेटा को पठनीय प्रारूप में निर्यात करने की आवश्यकता होती है। यहां, हम व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले यूरोपीय डेटा प्रारूप (ईडीएफ) में डेटा निर्यात के लिए एक छोटा चरण-दर-चरण मार्गदर्शिका प्रदान करते हैं।- सॉफ़्टवेयर प्रारंभ करें, उपयोगकर्ता नाम और सीरियल नंबर की पुष्टि करें, और जारी रखें पर क्लिक करें।
- उदाहरण के लिए, एचआरवी विश्लेषण के लिए ईसीजी ट्रेस निर्यात करने के लिए, प्रयोग पर क्लिक करें और ईडीएफ में निर्यात का चयन करें। ईडीएफ में निर्यात विंडो में, पशु संख्या का चयन करें, ईसीजी की जांच करें, एक समय सीमा का चयन करें जिसके लिए डेटा निर्यात किया जाएगा और निर्यात पर क्लिक करें।
नोट: सॉफ़्टवेयर द्वारा निर्धारित निर्यात की गई समय सीमा की कोई सीमा नहीं है, अधिक डेटा को संसाधित करने में अधिक समय लगेगा। निर्यात को वर्गों में विभाजित करना भी संभव है, उदाहरण के लिए, 24 घंटे और यदि आवश्यक हो तो बाद के समय में उन्हें फिर से एकीकृत करना। - एचआरवी विश्लेषण के लिए उपयोग किए जाने वाले विश्लेषण सॉफ़्टवेयर को प्रारंभ करें ( सामग्री की तालिका देखें), फ़ाइल पर क्लिक करें और वांछित ईडीएफ फ़ाइल लोड करने के लिए खोलें का चयन करें।
- एचआरवी पर क्लिक करें और सेटिंग्स का चयन करें। यह विभिन्न मापदंडों को सेट करने के लिए एक विंडो खोलेगा। बीट डिटेक्शन के तहत, उन प्रजातियों का चयन करें जिनके लिए एचआरवी विश्लेषण किया जाता है। प्रजातियों का चयन विश्लेषण पैनल के भीतर हिस्टोग्राम बिन चौड़ाई, पीआरआर सीमा और एसडीएआरआर औसत मूल्य के लिए मूल्यों को पूर्वनिर्धारित मानक पर सेट करेगा।
- HRV का चयन करें और रिपोर्ट दृश्य चुनें. आगे के सांख्यिकीय विश्लेषण के लिए परिणामों को एक सांख्यिकी सॉफ्टवेयर में कॉपी करें।
- प्रशिक्षण चरणों के दौरान सिग्नल की गुणवत्ता काफी कम हो सकती है। यदि हां, तो बाद के विश्लेषण के लिए दृश्यमान पी और क्यूआरएस के साथ चक्रों का मैन्युअल रूप से चयन करें। विश्लेषण से स्पष्ट पी तरंगों के बिना खराब डेटा मार्क और डेटा मार्क को बाहर रखें। अच्छे डेटा बिंदुओं को खत्म करने से बचने के लिए एक अनुभवी ईसीजी विश्लेषक के सावधानीपूर्वक विचार के तहत ऐसा करें।
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Representative Results
व्यक्तिगत अनुसंधान उद्देश्यों के आधार पर, प्राप्त टेलीमेट्री डेटा के बाद के विश्लेषण व्यापक रूप से भिन्न होंगे। यहां, हम प्रशिक्षण अवधि के दौरान दर्ज किए गए अच्छी गुणवत्ता वाले डेटा प्राप्त करके विधि की व्यवहार्यता का प्रदर्शन करते हैं और प्रशिक्षण से पहले, दौरान और बाद में ईसीजी और हृदय गति परिवर्तनशीलता विश्लेषण के अनुकरणीय परिणाम प्रदान करते हैं। डेटा को माध्य ± मानक त्रुटि (एसईएम) के रूप में प्रस्तुत किया जाता है, सभी सांख्यिकीय विश्लेषण एक उपयुक्त सांख्यिकीय सॉफ्टवेयर के साथ आयोजित किए गए थे ( सामग्री की तालिका देखें)। सांख्यिकीय महत्व का मूल्यांकन छात्र के टी टेस्ट द्वारा किया गया था। QT अंतराल को सही किया जाता है जैसा कि पहले रूसेल एट अल द्वारा चर्चा की गई थी, सूत्र QTC = QT / (√ (RR / 100))29 का उपयोग करके।
प्रशिक्षण के दौरान सफल टेलीमेट्रिक ईसीजी रिकॉर्डिंग
इस प्रोटोकॉल के साथ, प्रशिक्षण के दौरान जानवरों में स्पष्ट पी, क्यू, आर, एस और टी तरंगों के साथ ईसीजी डेटा प्राप्त करना संभव है जैसा कि चित्रा 3 में दिखाया गया है।
एक जानवर से सभी माप उसी दिन से लिए गए थे। प्रशिक्षण से पहले सुबह 10 बजे ± 10 मिनट में बेसलाइन माप लिया गया था जब जानवर अभी भी अपने स्थायी आवास में थे। प्रशिक्षण के दौरान माप 60 मिनट प्रशिक्षण सत्र के मध्य से ± प्रशिक्षण के तीसरे सप्ताह में दिन 3 पर 10 मिनट से लिया गया था, प्रशिक्षण के बाद के माप प्रशिक्षण के बाद 5 मिनट की आराम अवधि से और स्थायी आवास में पुन: स्थानांतरण से पहले लिए गए थे और 10 मिनट ± प्रशिक्षण के 1 घंटे बाद बरामद माप लिया गया था। विश्लेषण के लिए ईसीजी अनुरेखण के उपयुक्त अनुभागों को रीडआउट के संबंध में इन परिभाषित वर्गों से मैन्युअल रूप से चुना गया था, उदाहरण के लिए, चित्रा 4 में प्रस्तुत डेटा के लिए लगातार 40 चक्र।
ईसीजी-व्युत्पन्न मापदंडों का मूल्यांकन
डेटा का उपयोग व्यायाम से पहले, दौरान और बाद में शारीरिक परिवर्तनों का विश्लेषण करने के लिए किया जाता है जैसा कि चित्रा 4 में एक उदाहरण जानवर के लिए दिखाया गया है। हृदय गति (चित्रा 4 ए), पीआर अंतराल (चित्रा 4 बी), क्यूआरएस अवधि (चित्रा 4 सी), और क्यूटीसी अंतराल (चित्रा 4 डी) का मूल्यांकन लगातार 40 ईसीजी चक्रों के औसत से किया जाता है। जब जानवर व्यायाम कर रहा होता है तो हृदय गति लगभग 800 बीपीएम तक बढ़ जाती है और प्रशिक्षण के बाद धीरे-धीरे बेसलाइन की ओर ठीक हो जाती है। पीआर अंतराल, क्यूआरएस अवधि और क्यूटीसी अंतराल तनाव के तहत कम हो जाते हैं और एक बार तनाव खत्म हो जाने के बाद, बेसलाइन पर वापस आ जाएं। एक जानवर से अनुकरणीय डेटा दिखाया गया है।
टैचीकार्डिया का पता लगाना
टैचीकार्डिया और ब्रैडीकार्डिया एपिसोड का पता लगाने के लिए चरण 3.2.4 में वर्णित खोज परिभाषाओं का उपयोग किया गया था। चित्रा 5 ए बेसलाइन पर साइनस ताल दिखाता है। प्रशिक्षण के दौरान साइनस टैचीकार्डिया का एक प्रतिनिधि निशान चित्रा 5 बी में दिखाया गया है। एक जानवर से अनुकरणीय डेटा यहां दिखाया गया है।
हृदय गति परिवर्तनशीलता मापदंडों के मूल्यांकन द्वारा डेटा गुणवत्ता मूल्यांकन।
एचआरवी विश्लेषण चरण 3.3 में वर्णित के रूप में किया जाता है। एचआरवी विश्लेषण के लिए 5 मिनट अनुभाग चित्रा 6 में प्रस्तुत किया गया है। चित्रा 6 ए एक प्रयोग के दौरान एक एकल जानवर की हृदय गति को दर्शाता है। प्रशिक्षण के दौरान हृदय गति बढ़ जाती है और धीरे-धीरे बेसलाइन पोस्ट ट्रेनिंग पर लौट आती है, इस प्रवृत्ति को औसत आरआर अंतराल द्वारा भी देखा जा सकता है जैसा कि चित्रा 6 बी में दिखाया गया है। चित्रा 6 सी बेसलाइन पर और स्वचालित आरआर एनोटेशन द्वारा प्रशिक्षण के दौरान प्राप्त आरआर अंतराल (एसडीआरआर) के तुलनीय मानक विचलन को दर्शाता है, जो डेटा गुणवत्ता का प्रदर्शन करता है। प्राप्त डेटा तीन चूहों से है। एसडीआरआर सभी इंटरबीट अंतराल (आईबीआई) का मानक विचलन है और इसकी गणना सॉफ्टवेयर द्वारा सूत्र का उपयोग करके माध्य आईबीआई के आसपास आईबीआई विचरण के सकारात्मक वर्ग मूल के रूप में स्वचालित रूप से की जाती है:
σx = 
चित्रा 1: टेलीमेट्री ट्रांसमीटर और लीड पोजिशनिंग का योजनाबद्ध चित्रण। माउस लापरवाह स्थिति में है; ट्रांसमीटर को इंट्रापरिटोनियल रूप से रखा जाता है, और लीड को लीड II कॉन्फ़िगरेशन में चमड़े के नीचे तय किया जाता है। बायोरेंडर के साथ बनाया गया। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्र 2: प्रायोगिक सेटअप । (ए) पशु पिंजरे के नीचे सिग्नल रिसीवर के साथ प्रशिक्षण से पहले और बाद में प्रत्यारोपण योग्य टेलीमेट्री का उपयोग करके ईसीजी रिकॉर्डिंग के लिए सेटअप। (बी) ट्रेडमिल प्रशिक्षण के दौरान वास्तविक समय ईसीजी निगरानी के लिए सेटअप। इष्टतम सिग्नल गुणवत्ता के लिए, सिग्नल रिसीवर पारदर्शी बॉक्स पर रखा गया है। बायोरेंडर के साथ बनाया गया। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्र 3: प्रशिक्षण के दौरान प्रतिनिधि ईसीजी। सामान्य साइनस ताल, पी-वेव, क्यूआरएस और टी-वेव को बड़े अक्षरों का उपयोग करके इंगित किया जाता है, आरआर-अंतराल को बार के साथ चिह्नित किया जाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्र 4: समय के साथ टेलीमेट्री। ट्रेंड ग्राफ (ए) हृदय गति (बीपीएम) के लिए प्रतिनिधि परिणाम दिखाते हैं। (बी) पीआर अंतराल (एमएस)। (सी) क्यूआरएस अवधि (एमएस)। (डी) क्यूटीसी अंतराल (एमएस) पहले (बेसलाइन), प्रशिक्षण के दौरान (प्रशिक्षण के दौरान), प्रशिक्षण के तुरंत बाद (प्रशिक्षण के बाद), और पूर्ण वसूली के बाद (पुनर्प्राप्त)। एक जानवर से डेटा लगातार 40 ईसीजी चक्रों के औसत से प्राप्त किया जाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्रा 5: प्रशिक्षण से पहले और दौरान प्रतिनिधि ईसीजी। (ए) प्रशिक्षण से पहले साइनस ताल। (बी) प्रशिक्षण के दौरान साइनस टैचीकार्डिया। डेटा एक जानवर से लिया गया है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्रा 6: एचआरवी विश्लेषण द्वारा डेटा गुणवत्ता मूल्यांकन । (ए) व्यायाम से पहले (बेसलाइन), (प्रशिक्षण) के दौरान और बाद में (प्रशिक्षण के बाद) एक जानवर की प्रतिनिधि हृदय गति प्रवृत्ति। (बी) औसत आरआर अंतराल (बेसलाइन) से पहले और प्रशिक्षण (प्रशिक्षण) के दौरान और पूर्ण वसूली (पुनर्प्राप्त) के बाद, एसईएम ± औसत के रूप में दिखाया गया है, अप्रकाशित छात्र का टी-टेस्ट, ***पी < 0.001। (सी) एसडीआरआर पहले (बेसलाइन) और प्रशिक्षण (प्रशिक्षण) के दौरान और पूर्ण वसूली (बरामद) के बाद, एन = 3, एसईएम ± औसत के रूप में दिखाया गया है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
| 5-दिवसीय अनुकूलन चरण | ||
| दिन | गति (सेमी/सेकंड) | समय (मिनट) |
| 1 | 16.7 | 10 |
| 2 | 18.3 | 20 |
| 3 | 20 | 30 |
| 4 | 21.7 | 40 |
| 5 | 23.3 | 50 |
| टिप्पणी: हर 15 मिनट के बाद 2 मिनट आराम अंतराल | ||
तालिका 1: अनुकूलन चरण के दौरान प्रशिक्षण व्यवस्था।
| 5-दिवसीय प्रशिक्षण चरण | ||
| दिन | गति (सेमी/सेकंड) | समय (मिनट) |
| 1 | 25.0 | 60 |
| 2 | 25.0 | 60 |
| 3 | 25.0 | 60 |
| 4 | 25.0 | 60 |
| 5 | 25.0 | 60 |
| टिप्पणी: हर 15 मिनट के बाद 2 मिनट आराम अंतराल | ||
तालिका 2: प्रशिक्षण चरण के दौरान प्रशिक्षण व्यवस्था।
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Discussion
वर्तमान दिशानिर्देश नियमित शारीरिक गतिविधि की सलाह देते हैं क्योंकि यह कार्डियोवैस्कुलरजोखिम कारकों का एक महत्वपूर्ण संशोधक साबित हुआ है। इस बात के भी प्रमाण बढ़ रहे हैं कि मध्यम शारीरिक गतिविधि प्राथमिक और माध्यमिक रोकथाम31,32,33 दोनों में एट्रियल फाइब्रिलेशन (एएफ) से रक्षा कर सकती है। इसके विपरीत, मैराथन धावकों जैसे धीरज एथलीटों को एएफ विकसित करने का अधिक जोखिम होता है, यह दर्शाता है कि धीरज प्रशिक्षण का नकारात्मक प्रभाव भी हो सकता है34,35. अतालता जोखिम और प्रशिक्षण तीव्रता के बीच इस तरह के यू-आकार के संबंध को एएफ के लिए अन्यथा स्वस्थ एथलीटों 9,36,37,38 और अंतर्निहित हृदय रोग वाले रोगियों में स्पष्ट रूप से दिखाया गया है, हालांकि, प्रशिक्षण तीव्रता और अरिदमोजेनेसिस 4,5,6,7 के बारे में बहुत कम जानकारी है।
इस सीमा को दूर करने और रोगी की देखभाल में सुधार करने के लिए, कार्डियक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी पर व्यायाम से संबंधित प्रभावों पर आगे के शोध की आवश्यकता है। कई पशु प्रजातियों में विभिन्न मॉडलों को प्रशिक्षित करने के जवाब में मौलिक तंत्र और आणविक / सेलुलर अनुकूलन की जांच करने के लिए15 विकसित किए गए हैं। प्रत्येक मॉडल / प्रजाति की सीमाओं को देखते हुए, शोधकर्ताओं को प्रत्येक व्यक्तिगत शोध प्रश्न के लिए सबसे उपयुक्त चुनना होगा; इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी और अतालता अनुसंधान माउस 13,14,39,40 और सुअर मॉडल का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है 13,14,41,42,43। यद्यपि सूअरों में मोटरचालित ट्रेडमिल का उपयोग करके प्रशिक्षण प्रोटोकॉल विकसित किए गए हैं, लेकिन कई महत्वपूर्ण चुनौतियां हैं जिनमें (i) सूअरों का गतिहीन व्यवहार, जिसके लिए प्रयोग से पहले समय और श्रम-गहन कंडीशनिंग की आवश्यकता होती है और साथ ही प्रयोग के दौरान सूअरों को अनुपालन रखने के लिए उत्तेजना और (ii) शरीर का आकार और वजन, जो पुराने सूअरों में प्रशिक्षण यालंबे समय तक प्रशिक्षण को रोक सकता है। 44. चूहों में, मोटरचालित ट्रेडमिल प्रशिक्षण, वीडब्ल्यूआर, या तैराकी17,18 सहित कई व्यायाम प्रोटोकॉल विकसित किए गए हैं। यद्यपि वीडब्ल्यूआर कृन्तकों में प्राकृतिक दौड़ने के पैटर्न की नकल करता है और तैराकी और ट्रेडमिल प्रशिक्षण जैसे मजबूर व्यायाम विधियों की तुलना में कम तनावपूर्ण है, लेकिन इसके कुछ नुकसान भीहैं। वीडब्ल्यूआर की सहज प्रकृति व्यायाम की तीव्रता, अवधि या आवृत्ति को नियंत्रित करने की अनुमति नहीं देती है, इस प्रकार अच्छी तरह से नियंत्रित प्रयोगों को रोकती है। तैराकी मॉडल में, प्रशिक्षण की अवधि और तीव्रता को आसानी से विनियमित किया जा सकता है, आवश्यक उपकरण सरल हैं और कम लागत पर उपलब्ध हैं, और विधि को अधिकांश अनुसंधान प्रयोगशालाओं मेंस्थापित किया जा सकता है। इन फायदों के बावजूद, तैराकी मॉडल में इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी का अध्ययन करना मुश्किल है क्योंकि वर्तमान में तैराकी के दौरान ईसीजी की निगरानी करने का कोई विकल्प नहीं है। इस प्रोटोकॉल में वर्णित दृष्टिकोण एक ट्रेडमिल व्यायाम मॉडल के साथ एक प्रत्यारोपण योग्य टेलीमेट्री प्रणाली को जोड़ता है और इस प्रकार, इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी अनुसंधान47,48 के संदर्भ में अन्य प्रशिक्षण मॉडल की सीमाओं को दूर करता है। ट्रेडमिल का उपयोग करने से विभिन्न व्यायाम स्थितियों जैसे तीव्रता (ढलान झुकाव और दौड़ने की गति) या अवधि को नियंत्रित करने की अनुमति मिलती है। इसके अलावा, धीरज व्यायाम प्रशिक्षण, अंतराल प्रशिक्षण और तीव्र अभ्यास सहित विभिन्न प्रशिक्षण प्रोटोकॉल का अध्ययन किया जा सकता है। इस प्रोटोकॉल का पालन करते हुए, अब ट्रेडमिल पर माउस चलने के दौरान इम्प्लांटेबल टेलीमेट्री ट्रांसमीटरों का उपयोग करके ईसीजी को रिकॉर्ड और मॉनिटर करना भी संभव है।
यह देखते हुए कि चूहे आमतौर पर केवल कुछ मिनटों के लिए स्वेच्छा से दौड़ते हैं, छोटी छड़ों के साथ अपनी पीठ को टैप करना, संपीड़ित हवा या विद्युत उत्तेजनाओं के कश उड़ाना जैसी उत्तेजनाएं आवश्यक हैं। ये उत्तेजनाएं, हालांकि, मनोवैज्ञानिक तनाव को प्रेरित कर सकती हैं, जो प्रयोगात्मक डेटा की गुणवत्ता को काफी प्रभावित कर सकती हैं। इसलिए, हमने इन तनाव कारकों को कम करने की कोशिश की, जिससे माउस को अनुकूलन चरण के दौरान ट्रेडमिल के अनुकूल होने दिया जा सके, गति में लगातार वृद्धि के साथ और न्यूनतम-से-शून्य सदमे की तीव्रता का उपयोग करके जैसा कि पहले वर्णित15,17,45 था।
सामान्य तौर पर, ईसीजी रिकॉर्ड करते समय, मोशन आर्टिफैक्ट्स एक प्रमुख मुद्दा हैं, खासकर शारीरिक गतिविधि के दौरान। हमारे प्रस्तावित प्रोटोकॉल के बाद, शोधकर्ता अच्छी गुणवत्ता में ईसीजी सिग्नल प्राप्त करने में सक्षम होंगे, जिससे पी, क्यू, आर, एस, टी (चित्रा 3) को स्पष्ट रूप से अलग और एनोटेट करने की अनुमति मिलेगी। इस प्रकार, विभिन्न ईसीजी पैरामीटर जैसे हृदय गति, हृदय गति परिवर्तनशीलता, पीआर अंतराल, क्यूआरएस अवधि, या क्यूटी अवधि को स्वचालित सॉफ्टवेयर एल्गोरिदम का उपयोग करके प्रशिक्षण से पहले, दौरान और बाद में विश्वसनीय रूप से मूल्यांकन किया जा सकता है। इसके अलावा, अतालता जैसे कि टैचीएरिथमिया, ब्रैडीएरिथमिया, या ठहराव का पता लगाया जा सकता है। चूंकि हृदय गति परिवर्तनशीलता विश्लेषण - आमतौर पर हृदय पर स्वायत्त तंत्रिका तंत्र के प्रभावों की जांच करने के लिए किया जाता है27,28- पर्याप्त आर-वेव एनोटेशन पर निर्भर करता है, डेटा की गुणवत्ता को आराम से और प्रशिक्षण के दौरान प्राप्त इसी तरह कम एसडीआरआर मानों द्वारा सत्यापित किया जा सकता है जैसा कि चित्रा 6 में दिखाया गया है।
हर प्रयोगात्मक तकनीक के रूप में, यह विधि नुकसान के बिना नहीं आती है और इसमें कई महत्वपूर्ण कदम शामिल हैं। सफल ट्रांसमीटर आरोपण, उचित घाव भरने और सर्जरी के बाद तेजी से पशु वसूली के लिए बाँझ स्थितियां और एक छोटा ऑपरेशन समय आवश्यकताएं हैं। सीवन बहुत तंग नहीं होना चाहिए, या वे त्वचा परिगलन का कारण बनेंगे। सामान्य तौर पर, शल्य चिकित्सा प्रक्रिया के लिए व्यावहारिक अनुभव की आवश्यकता होती है, और समय के साथ परिणाम में सुधार होगा। लीड पोजिशनिंग रिकॉर्ड किए गए मुख्य वेक्टर को प्रभावित करती है, सर्वोत्तम परिणाम एक खड़ी लीड टू स्थिति के साथ प्राप्त किए जाते हैं, क्योंकि इसके परिणामस्वरूप उच्च पी- और आर-वेव आयाम होते हैं, जो बाद में ईसीजी विश्लेषण के लिए महत्वपूर्ण आवश्यकताएं हैं। चूहों को प्रशिक्षित करना चुनौतीपूर्ण हो सकता है क्योंकि सभी जानवर स्वेच्छा से प्रशिक्षित नहीं होते हैं। ट्रेडमिल वातावरण का परिचय, कन्वेयर बेल्ट की गति में धीमी वृद्धि और अच्छे प्रशिक्षण व्यवहार की सकारात्मक वृद्धि सहित एक अच्छी तरह से डिज़ाइन किया गया अनुकूलन प्रोटोकॉल, उदाहरण के लिए, भोजन के छर्रों के साथ, जानवरों को बेहतर प्रशिक्षित करने और प्रयोगों के दौरान संभावित हस्तक्षेप उत्तेजनाओं की आवश्यकता को कम करने में मदद कर सकता है। सभी उत्तेजनाओं को पूर्ण न्यूनतम तक कम करना महत्वपूर्ण है क्योंकि वे डेटा की गुणवत्ता को प्रभावित कर सकते हैं। हालांकि, सबसे महत्वपूर्ण कदम ट्रेडमिल प्रशिक्षण के दौरान टेलीमेट्री रिसीवर की इष्टतम स्थिति है क्योंकि यह सीधे प्राप्त डेटा की गुणवत्ता निर्धारित करता है। रिसीवर की स्थिति एक ही समय में प्रशिक्षण लेने वाले जानवरों की प्रत्येक जोड़ी के लिए निर्धारित की जानी चाहिए, क्योंकि यह टेलीमेट्री डिवाइस की सटीक स्थिति और लीड के साथ-साथ व्यक्तिगत जानवरों के चलने के पैटर्न के आधार पर भिन्न होता है। स्थिति परीक्षण और त्रुटि द्वारा पाई जाती है, वास्तविक समय में सिग्नल की गुणवत्ता को नेत्रहीन रूप से आंकती है। प्रयोग शुरू करने से पहले विश्लेषण किए जाने वाले सभी ईसीजी लक्षण स्पष्ट रूप से दिखाई देने चाहिए। उच्च मुराइन हृदय गति को देखते हुए, कई डेटा बिंदु छोटी रिकॉर्डिंग अवधि के साथ भी जमा होते हैं। यह और समग्र कम सिग्नल आयाम, स्वाभाविक रूप से मनुष्यों या बड़े जानवरों की तुलना में कृन्तकों में कम सिग्नल-टू-शोर अनुपात की ओर ले जाता है, डेटा विश्लेषण को बेहद चुनौतीपूर्ण बनाता है, जैसा कि हमनेपहले चर्चा की है। टेलीमेट्री और ट्रेडमिल प्रशिक्षण करने के लिए आवश्यक महंगे उपकरणों के अलावा इस प्रोटोकॉल की एक बड़ी सीमा सर्जिकल प्रक्रिया और डेटा विश्लेषण पर उच्च तकनीकी मांग है, जो क्षेत्र में शुरुआती लोगों तक पहुंच को सीमित करती है।
संक्षेप में, ईसीजी कार्डियक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी और अर्रिदमोजेनेसिस का अध्ययन करने के लिए एक शानदार उपकरण है। मनुष्यों में, व्यायाम के दौरान ईसीजी रिकॉर्ड करने के लिए तनाव परीक्षण नियमित रूप से किए जाते हैं और कार्डियक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी पर प्रशिक्षण से जुड़े प्रभावों का आकलन करने की अनुमति देते हैं। अनुसंधान में चूहे सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली प्रजातियां हैं, कई व्यायाम प्रोटोकॉल विकसित किए गए हैं, लेकिन प्रशिक्षण के दौरान वास्तविक समय ईसीजी की निगरानी अब तक संभव नहीं थी। हमारा प्रस्तावित प्रोटोकॉल पहली बार चूहों में व्यायाम की अवधि के दौरान ईसीजी रिकॉर्डिंग प्राप्त करने की अनुमति देता है। यह शोधकर्ताओं को व्यायाम से संबंधित तंत्र दोनों का अध्ययन करने में सक्षम करेगा, जिससे लाभकारी हृदय अनुकूलन और कुरूप, प्रोरैडमिक रीमॉडेलिंग हो सकती है और इस प्रकार, अंततः भविष्य में रोगी देखभाल में सुधार होगा।
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Disclosures
लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है।
Acknowledgments
यह काम जर्मन रिसर्च फाउंडेशन (डीएफजी) द्वारा समर्थित था; संवहनी चिकित्सा में क्लिनिशियन वैज्ञानिक कार्यक्रम (प्राइम), एमए 2186/14-1 से पी. टॉमसिट्स, जर्मन सेंटर फॉर कार्डियोवैस्कुलर रिसर्च (डीजेडएचके; 81एक्स2600255 से एस क्लॉस), कोरोना फाउंडेशन (एस 199/10079/2019 से एस क्लॉस), और कार्डियोवैस्कुलर रोगों पर ईआरए-नेट (ईआरए-सीवीडी; 01केएल 1910 से एस क्लॉस)। पांडुलिपि तैयार करने में फंड र्स की कोई भूमिका नहीं थी।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 14-gauge needle | Sterican | 584125 | |
| Any mouse | e.g. Jackson Laboratories | ||
| Bepanthen | Bayer | 1578675 | |
| Carprofen 0.005 mg/µL | Zoetis | 53716-49-7 | |
| Data Exchange Matrix 2.0 (MX2) | Data Science International | Manages communication between PhysioTel and PhysioTel HD telemetry implants and the acquisition computer. | |
| Enrofloxacin 25 mg/ml | Baytril | 400614.00.00 | |
| Fentanyl 0.5 mg/10 mL | Braun Melsungen | ||
| Fine forceps | Fine Science Tools | 11295-51 | |
| Five Lane Treadmill for Mouse | Panlab - Harvard Apparatus | 76-0896 | Includes treadmill unit, touchscreen control unit, a sponge , and cables |
| Iris scissors | Fine Science Tools | 14084-08 | |
| Isoflurane 1 mL/mL | Cp-Pharma | 31303 | |
| Isoflurane vaporizer system | Hugo Sachs Elektronik | 34-0458, 34-1030, 73-4911, 34-0415, 73-4910 | Includes an induction chamber, a gas evacuation unit and charcoal filters |
| LabChart Pro 8.1.16 | ADInstruments | ||
| Magnet | Data Science International | ||
| Modified Bain circuit | Hugo Sachs Elektronik | 73-4860 | Includes an anesthesia mask for mice |
| Modular connectors | Data Science International | Connecting cables between Reciever, Signal Interface and Matrix 2.0 (MX2) | |
| Novafil s 5-0 | Medtrocin/Covidien | 88864555-23 | |
| Octal BioAmp | ADInstruments | FE238-0239 | Amplifier for recording Surface ECG |
| Octenisept | Schülke | 121418 | |
| Oxygen 5 L | Linde | 2020175 | Includes a pressure regulator |
| PhysioTel ETA-F10 transmitter | Data Science International | ||
| PhysioTel receiver RPC-1 | Data Science International | Signal reciever | |
| Ponemah 6.42 | Data Science International | ECG Analysis Software | |
| Powerlab | ADInstruments | 3516-1277 | Suface ECG Acquisition hardware device. Includes ECG electrode leads |
| Prism 8.0.1 | Graph Pad | ||
| Radio Device (Sony AF/AM) | Sony | ||
| Signal Interface | Data Science International | Acquires and synchronizes digital signals with telemetry data in Ponemah v6.x. | |
| Spring scissors | Fine Science Tools | 91500-09 | |
| Surgical platform | Kent Scientific | SURGI-M | |
| Tergazyme 1% | Alconox | 13051.0 | Commercial cleaning solution |
| Tweezers | Kent Scientific | INS600098-2 |
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