小鼠横位主动脉缩窄术

该操作首先对小鼠进行麻醉，做好无菌手术准备，并将其仰卧置于加热垫上。使用PE 90导管进行气管插管，随后连接至啮齿类动物呼吸机。接着行第二肋间部分开胸术，并牵开胸骨。

识别出横位主动脉，并在无名动脉与左颈动脉之间进行结扎。随后关闭肋骨笼，再以连续缝合方式缝合皮肤。最后拔除气管插管，使小鼠恢复。

大家好，我是来自贝勒医学院分子生理学与生物物理学系Zander Wars博士实验室的Angela Dal Meda。今天我们将向您展示小鼠横主动脉缩窄术的操作流程。在我们的实验室中，利用该技术研究心肌肥厚和心力衰竭发生发展的潜在机制。

那么我们开始吧。在进行横断主动脉缩窄术（TAC手术）之前，使用75%异丙醇对术区进行消毒。打开加热垫并将其调至合适的温度。

我们推荐的系统是将一款游戏用循环水泵连接至一个维持在37±1°C的热疗垫。手术前，需使用热珠灭菌器对手术器械进行灭菌。进行该手术操作时，需要以下手术器械。

一把钝头剪刀、两把粗弯镊子（用于寻找呈45度角的镊子）、一把角形弹簧剪刀、一个胸腔牵开器以及一把持针器。此外，还应备好棉签，以应对可能发生的出血情况。在手术区域准备就绪后，即可开始对小鼠进行插管操作。

为插管做准备，将小鼠置于诱导麻醉室中进行麻醉，并使用毛发剪从颈部至胸部中段剃除毛发。将小鼠仰卧位放置在加热垫上。手术期间维持正常体温至关重要，以避免心率迅速下降及可能发生的猝死。

按压小鼠的爪垫以确认小鼠已完全麻醉。将橡皮筋置于动物的门齿上以伸展颈部。一手持弯头镊子，另一手轻轻将舌头拨向一侧。将PE 90导管插入气管中。

接下来，将气管插管连接至哈佛容量循环式啮齿类动物呼吸机。呼吸机的通气频率应设置为每分钟125至150次，潮气量根据小鼠的体重设定为0.1至0.3毫升。使用聚维酮碘溶液对术区内的皮肤进行消毒，随后用70%酒精脱碘。重复此消毒步骤三次，以防止手术过程中术区污染。然后在小鼠身上覆盖无菌手术巾，仅暴露手术区域。

现在我们已准备好在此手术过程中进行横主动脉结扎。以每分钟0.5至1升的100%氧气为载体，维持1.5%至2%异氟烷的麻醉状态。通过按压小鼠趾甲床来确认麻醉深度是否合适。

为确认无令牌反射，开始手术时进行部分胸廓切开术。从胸骨头端开始，向下切至第二肋水平。

使用手术显微镜，利用胸腔牵开器牵开胸骨。接着，使用尖端精细的45度角镊子轻轻分离主动脉弓处的胸腺和脂肪组织。在确认横主动脉后，在无名动脉和左颈总动脉之间放置一小段6.0丝线缝线。

在横行主动脉上打两个松结，并放置一段27号半规格的钝头针。将针平行于主动脉放置。迅速将第一个结紧贴针体扎紧，接着扎紧第二个结，然后立即取出针头，从而获得直径为0.4毫米的缩窄。

夹闭横行主动脉后，移除胸腔牵开器，并阻断呼吸机的输出气流两秒钟。为谨慎地重新扩张肺部，使用6.0普理灵缝线采取间断缝合方式关闭肋骨。最后，使用6.0普理灵缝线采取连续缝合方式关闭皮肤。

用于术后镇痛。通过腹腔注射给予小鼠布托啡诺。如果术后出现脱水迹象，可腹腔注射0.3至1毫升无菌生理盐水。

逐渐将麻醉气体调至关闭状态。当出现自主呼吸迹象时，拔除气管插管，然后将小鼠置于俯卧位，并将其放置在加热垫上恢复。在横主动脉缩窄术后一周，重新麻醉小鼠，以评估横主动脉结扎所诱导的压力超负荷程度。

麻醉和体温的维持方法如前所述。将20兆赫的多普勒探头以45度角放置于颈部左右两侧。为检测颈动脉血流速度，我们采用基于计算机的多普勒信号处理器来显示和存储多普勒信号。

根据实验方案所需的压力超负荷程度，仅将右颈动脉（RC）与左颈动脉（lc）血流比值在特定范围内的小鼠纳入进一步分析。例如，中度压力超负荷对应的比值为5至8，而更严重的缩窄导致重度压力超负荷时，该比值为8至10。然而，假手术动物的比值预计约为1。

野生型小鼠在进行TAC手术后的典型存活率约为80%至90%。对横行主动脉进行手术结扎后，右颈动脉与左颈动脉（即RC/LC）之间的多普勒血流速度比值将达到5至10，而假手术小鼠则无此变化。根据缩窄程度的不同，承受压力超负荷的小鼠通常在1至2周内出现心脏肥厚，并在6至8周后发展为心脏扩张。

我们刚刚向您展示了如何在小鼠中实施横断主动脉缩窄术，但进行该操作时，维持正常的体温并尽量减少失血至关重要。就这些。感谢您的观看，祝您的实验顺利。