Name: Cultura Slice organotípicas de E18 cérebros de ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-11T00:00:00.000+00:00
Duration: 18 min 48 s
Description: Aprenda a cultivar fatias organotípicas de cérebros de ratos E18 usando microscopia de dissecação, agarose de baixo ponto de fusão e vibratome. Esta técnica permite estudar desenvolvimento cortical e migração neuronal in vitro.

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cultura slice organotípicas de e18 cérebros de ratos

Organotypic Slice Culture of E18 Rat Brains

Culturas fatia organotípicas de cérebros de roedores embrionárias são amplamente utilizados para estudar o desenvolvimento do cérebro. Embora muitas vezes há vantagens para um sistema de in-vivo, culturas fatia organotípicas permitem realizar uma série de manipulações que não são actualmente viável in-vivo. Até à data, organtotypic culturas fatia embrionárias cérebro têm sido utilizados para acompanhar células individuais usando a microscopia de lapso de tempo, manipular a expressão de genes no emanances ganglionares (uma região que é difícil de alvo por in-utero eletroporação), bem como para farmacológicos estudos. Neste protocolo de vídeo demonstramos como fazer culturas fatia organotípicas de rato dia embrionário 18 embriões. O protocolo envolve dissecar os embriões, incorporando-os no gelo derreter em baixo agarose, cortando o cérebro incorporado na vibratome e, finalmente, as fatias de revestimento para filtros em placas de cultura. Este protocolo também é aplicável na sua forma actual de fazer culturas fatia organotípicas de diferentes idades embrionárias para ambos os ratos e camundongos.

Cultura Slice organotípicas de E18 cérebros de ratos

Culturas de fatias organotípicas de cérebros de roedores embrionários são amplamente utilizadas para estudar o desenvolvimento cerebral. Embora sistemas in vivo frequentemente apresentem vantagens, ...

Meu nome é Laura Elias. Sou aluna de pós-graduação em neurociência trabalhando no laboratório de Arnold K Stein. Estamos no Instituto de Medicina Regenerativa aqui na UCSF, e hoje vou mostrar a vocês como realizar o cultivo de fatias orgânicas de cérebros de ratos E18.Portanto, este procedimento envolve dissecar os cérebros, embuti-los em ágar de baixo ponto de fusão, cortá-los no viótomo e obter suas secções coronais, e então colocá-las no sistema de cultura de fatias. Existem algumas ferramentas e reagentes importantes que utilizamos neste procedimento de cultura de fatias. Você precisará de um microscópio estereoscópico para dissecar os cérebros.Também utilizamos este V como um vibram VT 1000 S, e esse é um bom sistema para cortar seus cortes. A cola pode ser importante. Utilizamos este tipo de travamento para cola que adere muito bem os cérebros, pois, às vezes, se você usar o tipo errado de cola, os cérebros podem se soltar quando você estiver tentando cortá-los, o que pode ser problemático.Também utilizamos esses filtros de célula milli, que são os filtros nos quais colocamos nossas fatias durante a cultura, e esta também é uma parte importante do processo. Muito bem, então a

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Biologia

O modelo de cultura organoptypic hipocampo é uma...

O modelo de Cultura organotípicas Hippocampal Slice para o exame das lesões neuronais

Este protocolo descreve um ensaio fatia organotípicas otimizado para o cérebro pós-natal e imagens de alta resolução de lapso de tempo de migração neuroblastos no fluxo migratório rostral.

Um Ensaio Slice organotípicas para High-Resolution Imaging Time Lapse de migração neuronal no cérebro pós-natal

Este é um protocolo para preparar e manter uma preparação fatia neocortical na cultura organotípicas com a finalidade de fazer gravações elétrica de neurônios piramidais.

Gravação de células inteiras a partir de uma preparação Slice organotípicas de Neocortex

Um método para gerar fatias organotípicas da E12.5 mesencéfalo embrionário murino é descrito. As culturas fatia organotípicas pode ser usado para observar o comportamento de neurônios dopaminérgicos ou outros neurônios do mesencéfalo ventral.

Organotípicas culturas de mesencéfalo ventral Slice Embrionárias: Um Sistema para o Estudo de Desenvolvimento Neuronal dopaminérgicos In vitro</em

Para realizar uma avaliação rápida da função de genes no desenvolvimento de córtex cerebral, que descrevem métodos que envolvem...

Métodos de Estudo da morfogênese neuronal:<em&gt; Ex vivo</em&gt; Eletroporação RNAi no Cortex Cerebral Murina embrionárias

Este vídeo demonstra um método para preparar culturas organotípicas de fatias de hipocampo a partir do cérebro de um filhote de rato. Ele descreve as etapas envolvidas na dissecação do hipocampo, fatiamento e condições de cultura necessárias para promover a viabilidade celular e o crescimento nas fatias do hipocampo, gerando culturas de fatias organotípicas.

Preparação de culturas organotípicas de fatias do hipocampo de um filhote de rato

O vídeo demonstra um método para obter fatias de córtex rinal-hipocampo do cérebro de um filhote de rato e cultivá-las em inserções membranosas dentro de uma placa de vários poços cheia de mídia para análise posterior.

Preparando fatias de córtex rinal-hipocampo de um cérebro de filhote de rato

Uma técnica para estudar células NG2 e oligodendrócitos usando um sistema de cultura de fatias do prosencéfalo e cerebelo é descrita.  Este método permite o exame da dinâmica de proliferação e diferenciação de células dentro da linhagem de oligodendrócitos, onde o ambiente extracelular pode ser facilmente manipulado, mantendo a citoarquitetura do tecido.

Culturas Organotípicas fatia para Estudar Oligodendrocyte Dynamics e Myelination

Aqui nós descrevemos uma técnica para estudar a neurogênese pós-natal do hipocampo utilizando a técnica de cultura fatia organotípica. Este método permite a manipulação in vitro da neurogénese adulto e permite a aplicação directa de agentes farmacológicos para o hipocampo cultivadas.

Cultures Organotípicas fatia de Estudos de Pós-natal Neurogênese

Descrevemos um protocolo para a expressão específica do tipo celular do sensor geneticamente codificado baseado em FRET ATeam1.03YEMK em culturas organotípicas do antecérebro do rato. Além disso, mostramos como usar este sensor para imagens dinâmicas dos níveis de ATP celular em neurônios e astrócitos.

Imagem de ATP intracelular em fatias organotípicas do tecido do cérebro do rato usando o sensor ateam1.03yEMK baseado em FRET

Aqui, descrevemos a preparação de fatias organotipicas do córtex-hipocampo rhinal. Sob uma privação gradual e controlada de soro, essas fatias retratam eventos epilépticos em evolução e podem ser consideradas um modelo ex vivo de episetogênese. Este sistema representa uma excelente ferramenta para monitorar a dinâmica da atividade espontânea, bem como para avaliar a progressão das características neuroinflamatórias ao longo do curso da epipesogênese.

Um Modelo de Epipetogênese em Culturas de Fatia Organotipica Do Cortex-Hipocampo Rhinal

Aprenda a cultivar fatias organotípicas de cérebros de ratos E18 usando microscopia de dissecação, agarose de baixo ponto de fusão e vibratome. Esta técnica permite estudar desenvolvimento cortical e migração neuronal in vitro.

Cultura Slice organotípicas de E18 cérebros de ratos

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