JoVE Encyclopedia of Experiments
Microbiologia
0 vistas • 2:10 min • November 28th, 2025
Pegue um dispositivo microfluídico consistindo em um tubo de entrada conectado a uma câmara microfluídica feita de canais porosos para o movimento bacteriano.
A câmara é conectada a uma câmara de observação que é conectada a uma bomba de seringa por meio de um tubo de saída.
Sature as câmaras com um buffer para remover quaisquer bolhas de ar.
Coloque o dispositivo no palco do microscópio e posicione a lente objetiva acima da câmara de observação.
Ajuste as configurações do microscópio para visualizar claramente as células bacterianas individuais.
Coloque o tubo de entrada em uma suspensão de bactérias marcadas fluorescente.
Inicie o fluxo para atrair as bactérias para a câmara microfluídica, onde elas passam pelos canais porosos para chegar à câmara de observação.
Imagine a câmara de observação em intervalos regulares.
Gerar uma curva de avanço, que representa a fração de bactérias que passam pela matriz porosa ao longo do tempo.
Retire o microfluídico do vácuo e coloque-o no palco do microscópio. Use a bomba da seringa para saturá-lo com buffer de motilidade.
Usando microscopia de campo claro ou contraste de fase, ajuste a ampliação para visualizar células bacterianas individuais e foque no centro do canal de observação. Mude as configurações do caminho da luz para microscopia de fluorescência. Ajuste o foco com um deslocamento e o tempo de exposição da câmera para resolver células bacterianas individuais, neste caso, 100 milissegundos.
Em seguida, insira o tubo de entrada em um tubo de dois mililitros contendo a suspensão bacteriana. Inverta a direção da bomba e comece a retirar a suspensão com uma vazão de um microlitro por minuto.
Escaneie a seção transversal de todo o canal de observação, registrando uma imagem a cada minuto.
Este artigo descreve um método para visualizar o movimento bacteriano em um dispositivo microfluídico. A montagem permite a observação de células bacterianas individuais enquanto elas se deslocam por canais porosos.
A quantificação da motilidade bacteriana em matrizes porosas microfluídicas permite uma avaliação precisa do transporte microbiano relevante para modelos de infecção, pesquisa do microbioma e triagem de agentes anti-infecciosos. A curva de ruptura resultante fornece uma leitura quantitativa e reprodutível para comparar o movimento bacteriano em condições controladas. Essa capacidade apóia a descoberta precoce e a redução de riscos mecanicistas em pipelines de P&D biofarmacêutico.
Este ensaio de motilidade microfluídico insere-se na transição entre a descoberta inicial e a identificação de compostos líderes, proporcionando uma ponte entre a caracterização microbiana básica e a modelagem pré-clínica de infecções.
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Última atualização: 29 agosto 2026