Obtenção de células primárias de câncer de ovário a partir de amostras sólidas: um método para cultivar células epiteliais de câncer de ovário a partir de amostras de tumor ovariano

As células epiteliais presentes na superfície externa do ovário podem sofrer transformação maligna em células cancerígenas que podem se transformar em tumores ovarianos.

Para isolar essas células epiteliais de câncer de ovário ou EOCs, comece pegando uma amostra de tumor de ovário e pique-a em pequenos pedaços. Transfira os pedaços picados para um tubo contendo um tampão de digestão suplementado com a enzima protease desejada.

Essas proteases degradam as proteínas da matriz extracelular dentro do tecido, liberando células EOC, eritrócitos e alguns fibroblastos dissociados em suspensão.

Filtre a pasta celular através de um filtro para separar as células individuais suspensas dos pedaços de tecido não dissociados. Centrifugue a suspensão para peletizar as células EOC, eritrócitos e fibroblastos. Rejeitar o sobrenadante que contém enzimas.

Ressuspenda o pellet celular em um meio de crescimento epitelial e transfira-o para uma placa de cultura. Incube a cultura para permitir que as células EOC e os fibroblastos se fixem na base da placa enquanto os eritrócitos flutuam no meio.

Remova os eritrócitos suspensos atualizando a mídia. Com o tempo, o meio facilita o crescimento seletivo de cé