Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Técnicas Biológicas
0 visualizações • 5:13 min. • July 8th, 2025
Para detectar interações ligante-analito usando interferometria de biocamada, BLI, comece com um biossensor de fibra óptica hidratado fixado em um suporte de instrumento BLI, definido para o programa desejado.
A ponta do biossensor é revestida com uma camada biocompatível imobilizada com grupos ácido nitrilotriacético níquel, Ni-NTA. Mergulhe a ponta do biossensor no tampão.
O instrumento emite luz branca em direção ao biossensor, que é refletida de duas interfaces: a referência interna ou camada óptica e a camada biocompatível. Os feixes refletidos interferem construtiva ou destrutivamente em diferentes comprimentos de onda de luz. Um fotodetector detecta o padrão de interferência resultante.
Após a medição da resposta interferométrica da linha de base, adicione uma solução de ligante marcada com histidina. As etiquetas de histidina se ligam a cátions de níquel no biossensor, imobilizando ligantes na ponta.
Após a associação, a luz branca emitida é refletida da camada óptica e a camada biocompatível imobilizada com ligantes com espessura óptica aumentada na ponta. Isso aumenta a distância entre as camadas reflexivas, causando mudança de padrão de interferência e uma mudança de com
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos