Preparando uma emulsão adjuvante de antígeno para induzir encefalomielite autoimune

A encefalomielite autoimune experimental (EAE) é uma doença do sistema nervoso central. Os autoanticorpos têm como alvo a glicoproteína de oligodendrócitos de mielina, MOG, na bainha de mielina dos neurônios, causando destruição da mielina e degeneração nervosa.

A indução de EAE em camundongos requer a injeção de uma emulsão adjuvante de antígeno do autoantígeno MOG misturado com um adjuvante - contendo um antígeno bacteriano - para aumentar a resposta imune.

Para preparar a emulsão, tome uma suspensão aquosa de MOG em um tubo homogeneizador. Coloque o tubo no gelo, evitando a degradação do antígeno.

Adicione o adjuvante - bactérias patogênicas inativadas dispersas em uma fase oleosa. Coloque o tubo dentro de um homogeneizador agitador. O tremor causa turbulência no fluido, gerando uma emulsão.

Sob um microscópio, a emulsão mostra gotículas aquosas uniformemente dispersas, de tamanho micro - contendo MOG - dentro de uma fase oleosa contínua. A homogeneidade da emulsão garante maior reprodutibilidade da indução da doença.

Para injetar a emulsão em uma cepa suscetível de camundongos, coloque uma seringa na frente do tubo e transfira a emulsão para ele. Pegue um camundongo anestesiado