Um ensaio in vitro para estudar a interação entre neutrófilos e biofilme

Um biofilme é uma comunidade de bactérias aderidas à superfície incorporadas dentro de uma matriz de substâncias poliméricas extracelulares, EPS, de origem microbiana.

Para estudar as interações célula-biofilme imunológico in vitro, pegue uma lâmina com um canal contendo um biofilme de Staphylococcus aureus - um patógeno oportunista. As bactérias modificadas expressam uma proteína fluorescente para detecção microscópica. O canal se conecta a reservatórios cheios de meios para fornecer nutrientes às bactérias.

Adicione uma suspensão de neutrófilos marcados com um corante fluorescente de rastreamento de células. O meio também contém um homodímero de etídio, que mancha o DNA das células mortas. Incubar em condições fisiológicas.

Os receptores de reconhecimento de padrões nos neutrófilos se ligam aos padrões moleculares associados ao patógeno nas bactérias. A ligação induz os neutrófilos a fagocitar as bactérias e produzir espécies reativas extracelulares de oxigênio ou ROS, matando as bactérias.

Para evitar a resposta imune, as bactérias liberam enzimas desintoxicantes que diminuem as EROs e a toxina leucocidina que causa a morte celular. A leucocidina monomérica se liga a receptores