Estimulação optogenética e registro eletrofisiológico de eventos sinápticos em fatias de cérebro de rato

0 visualizações • 3:18 min. • July 8th, 2025

Comece com uma fatia de cérebro de rato contendo a região do neurônio alvo conectada a um axônio sensível à luz de uma região diferente do cérebro.

Coloque a fatia na câmara de gravação submersa e prenda-a com uma âncora de fatia.

Sob um microscópio, localize a camada desejada e identifique o neurônio piramidal alvo.

Levante a objetiva do microscópio para criar um menisco com a superfície da fatia.

Abaixe uma micropipeta de vidro cheia de solução de registro intracelular neste menisco.

Toque na célula piramidal identificada com a ponta da pipeta para criar um recuo na membrana.

Aplique sucção para formar uma vedação.

Aumente a sucção até que a membrana se rompa, estabelecendo uma configuração de célula inteira.

Usando uma fonte de luz montada, aplique pulsos de luz na fatia.

Esses pulsos de luz desencadeiam um potencial de ação no axônio sensível à luz, liberando neurotransmissores na fenda sináptica.

Registre as respostas do neurônio piramidal a essas liberações para analisar a eficiência sináptica.

Para identificação da célula-alvo, coloque a fatia na câmara de gravação e imobilize-a usando uma âncora de fatia. Sob baixa ampliação, usando iluminação infravermelha, navegue até a c

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