Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:20 min. • May 29th, 2025
Coloque um tecido retiniano isolado de um camundongo transgênico com células ganglionares da retina marcadas com fluorescência, ou RGCs, em uma câmara de registro.
A informação visual é retransmitida para os RGCs, cujos axônios a transmitem ao cérebro através do nervo óptico.
Os subtipos RGC são distinguidos pelos padrões de ramificação de seus dendritos, que se estratificam em subcamadas dentro da camada interna da retina.
Achate o tecido da retina e prenda-o usando uma âncora de tecido.
Transfira a câmara para um estágio de microscópio e perfunda uma solução oxigenada para manter a viabilidade do RGC.
Usando iluminação infravermelha, identifique os RGCs fluorescentes.
Posicione uma pipeta contendo um traçador fluorescente em um RGC.
Aplique pressão positiva para evitar entupimento.
Mude para pressão negativa, puxando a membrana para dentro da pipeta para formar uma vedação.
Aplique sucção para romper a membrana, estabelecendo uma configuração de célula inteira que facilita a difusão do traçador nos dendritos.
Observe a morfologia dendrítica e a estratificação para identificar os subtipos de RGC.
Lave a retina na solução extracelular oxigenada e transfira-a para uma câmara de gravação co
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