Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:40 min. • June 17th, 2025
Comece com uma fatia de tecido cerebral de rato montada em uma lâmina de vidro e imersa em um tampão.
O rato sofre de tubulinopatia, uma condição causada por defeitos na tubulina, os blocos de construção dos microtúbulos, levando ao seu acúmulo e ruptura anormais.
Isso também afeta a produção de mielina no sistema nervoso central.
Coloque a fatia sob um microscópio de excitação de dois fótons coberto para obter imagens detalhadas.
Hidrate regularmente a fatia para manter sua integridade.
Defina o microscópio para um modo de imagem não digitalizado, uma técnica sem rótulo para detectar sinais fracos.
Exponha o tecido a um laser infravermelho pulsado.
Os microtúbulos emitem luz como sinais detectáveis conhecidos como geração de segundo harmônico ou sinais SHG.
Áreas com acúmulo anormal de microtúbulos amplificam esses sinais, aumentando sua detectabilidade.
Aplique filtros ópticos para refinar esses sinais.
A imagem capturada revela densidade e anormalidades dos microtúbulos, em que a alta intensidade e agrupamento de SHG indicam defeitos de tubulina e redução da produção de mielina.
Colocar a amostra ao microscópio e posicioná-la adequadamente sob a objetiva por observação direta através das
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