Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:42 min. • June 17th, 2025
Pegue um camundongo transgênico anestesiado expressando proteínas fluorescentes na microglia. Prenda-o em uma estrutura estereotáxica com um estágio motorizado sob um microscópio de dois fótons.
O crânio é equipado com um tubo de metal com fundo de vidro que achata suavemente o alvéus acima da região do corno ammonis 1 ou CA1 do hipocampo, garantindo uma interface óptica clara sem
pressão excessiva no tecido subjacente.
Encha o tubo de metal com água para otimizar a transmissão óptica.
Ative o laser pulsado no comprimento de onda de excitação.
Usando fluorescência do parênquima cerebral e luz refletida do tubo de metal, ajuste o foco na região CA1.
Reposicione a cabeça do mouse para alinhar o fundo do vidro paralelo ao plano de imagem, garantindo um foco uniforme em todo o campo de visão.
Ajuste a objetiva para uma resolução ideal e observe a dinâmica microglial in vivo na região CA1.
Em seguida, imagine o giro denteado, onde a microglia fluorescente confirma a integridade do CA1.
Coloque o mouse no dispositivo de fixação da cabeça sob a lente objetiva do microscópio de dois fótons e no estágio de varredura XY motorizado. Em seguida, preencha o espaço entre o fundo do vidro e a lente objet
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