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Um método simplificado para Ultra-Baixa Densidade, Long-Term Primária do hipocampo Neuron Cultura
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JoVE Journal Neuroscience
A Simplified Method for Ultra-Low Density, Long-Term Primary Hippocampal Neuron Culture

Um método simplificado para Ultra-Baixa Densidade, Long-Term Primária do hipocampo Neuron Cultura

Full Text
16,713 Views
11:19 min
March 5, 2016

DOI: 10.3791/53797-v

Zhongming Lu*1,2, Mariel Piechowicz*1, Shenfeng Qiu1

1Department of Basic Medical Sciences,University of Arizona College of Medicine-Phoenix, 2Jiangsu Provincial Center for Disease Control and Prevention

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Culturas de baixa densidade de neurônios primários do hipocampo geralmente requerem camada alimentadora da glia para suprir fatores neurotróficos e sustentar a longevidade. Descrevemos aqui um método simplificado para cultivar neurônios de densidade ultrabaixa em lamínulas de vidro na presença de uma camada alimentadora neuronal de alta densidade, o que facilita a investigação de mecanismos neuronais autônomos específicos.

O objetivo geral deste procedimento é estabelecer culturas saudáveis de longo prazo de neurônios primários do hipocampo de camundongos em densidade ultrabaixa, a fim de facilitar a marcação imunocitoquímica e o estudo dos mecanismos autônomos das células neuronais. Este estudo pode ajudar a entender algumas questões-chave no campo da pesquisa em neurociências, como os estudos sobre a especificidade da proteína na neuromorfologia da função do desenvolvimento. A principal vantagem dessa técnica é que ela permite que os neurônios cresçam em densidade ultrabaixa em uma lamínula sem o suporte de uma camada alimentadora glial.

Demonstrando o procedimento estará Mariel Piechowicz, uma estudante do meu laboratório. Prepare duas placas de 24 poços de alta densidade e duas de baixa densidade. Usando uma agulha de calibre 28, grave o fundo de placas de 24 poços, de modo que os plásticos deslocados atuem como suporte para as lamínulas com neurônios de baixa densidade crescendo nelas.

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