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Um sistema de cultura 3D baseado em Inserir Filtro Rápido para próstata primário Diferenciação Ce...
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Cancer Research
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JoVE Journal Cancer Research
A Rapid Filter Insert-based 3D Culture System for Primary Prostate Cell Differentiation

Um sistema de cultura 3D baseado em Inserir Filtro Rápido para próstata primário Diferenciação Celular

Full Text
8,938 Views
09:23 min
February 13, 2017

DOI: 10.3791/55279-v

Lucas Tricoli1, Deborah L. Berry2, Chris Albanese1

1Department of Oncology,Lombardi Comprehensive Cancer Center, 2Department of Oncology,Georgetown University Medical Center

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aqui, apresentamos um método para o estabelecimento de um sistema in vitro rápido que suporta a cultura tridimensional e subsequente diferenciação luminal de células epiteliais primárias da próstata.

O objetivo geral deste sistema de cultura 3D baseado em inserção de filtro para células primárias derivadas de pacientes é estabelecer um sistema modelo in vitro mais biologicamente relevante para a pesquisa do câncer de próstata. Ao usar células humanas primárias, esse método pode ajudar a responder a questões-chave na biologia do desenvolvimento da próstata, bem como no câncer de próstata. A principal vantagem desta técnica é que é uma metodologia in vitro relativamente rápida para o estabelecimento de células primárias da próstata diferenciadas que também permite o rápido isolamento de biomoléculas como RNA, DNA e proteína.

A demonstração visual desses métodos é crítica, pois o processamento de células no inserto do filtro para histologia ou para coleta de RNA e proteínas é delicado e sensível ao tempo. Para ajudar a limitar a difusão entre as câmaras em um gabinete de segurança biológica, aplique uma fina camada de gelatina a 0,1% na parte inferior das inserções e deixe-as secar. Repita este procedimento mais duas vezes.

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