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Microscopia confocal revela agregação de receptores de superfície celular através de espectroscop...
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JoVE Journal Biology
Confocal Microscopy Reveals Cell Surface Receptor Aggregation Through Image Correlation Spectroscopy

Microscopia confocal revela agregação de receptores de superfície celular através de espectroscopia de correlação de imagem

Full Text
7,562 Views
06:51 min
August 2, 2018

DOI: 10.3791/57164-v

Adam C. Parslow1,2, Andrew H.A. Clayton3, Peter Lock4, Andrew M. Scott1,2,5,6,7

1Tumour Targeting Laboratory,Olivia Newton-John Cancer Research Institute, 2School of Cancer Medicine,La Trobe University, 3Centre for Micro-Photonics, Faculty of Science, Engineering and Technology,Swinburne University of Technology, 4LIMS Bioimaging Facility, La Trobe Institute for Molecular Science,La Trobe University, 5Department of Medical Oncology, Olivia Newton-John Cancer and Wellnes Centre,Austin Health, 6Department of Medicine,University of Melbourne, 7Department of Molecular Imaging and Therapy,Austin Health

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Anticorpos que se ligam a receptores de alvo na superfície da pilha podem conferir alterações clusterização e conformação. Estas mudanças dinâmicas têm implicações para caracterizar o desenvolvimento de drogas em células-alvo. Este protocolo utiliza a microscopia confocal e espectroscopia de correlação de imagem através do ImageJ/FIJI para quantificar a extensão do receptor na superfície das células de clustering.

O objetivo geral deste protocolo de espectroscopia de correlação de imagem é fornecer uma metodologia acessível para a quantificação de eventos de agrupamento que ocorrem na superfície da célula. Anticorpos que se ligam a receptores na superfície celular podem conferir alterações de confirmação e agrupamento. Análises desses processos dinâmicos são importantes para a caracterização de alvos de drogas.

A principal vantagem desta técnica é que ela fornece uma metodologia acessível para a quantificação de eventos de agrupamento na superfície celular usando aparelhos de imagem de fácil acesso. Para começar, semeie 10.000 células de carcinoma epidermóide A431 em cada poço de uma lâmina de imagem de oito câmaras. No dia seguinte, adicione 100 nanogramas por mililitro de ligante EGF imediatamente às células para estimular a agregação do receptor EGF.

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Biologia edição 138 microscopia Confocal espectroscopia de correlação de imagem (ICS) interações de anticorpo: receptor conjugado anticorpo-drogas-(ADC) imageJ Fiji imagem de processamento agrupamento agregação

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