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Quantificação de crescimento intracelular dentro de macrófagos é um rápido e confiável método par...
Quantificação de crescimento intracelular dentro de macrófagos é um rápido e confiável método par...
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Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
Quantification of Intracellular Growth Inside Macrophages is a Fast and Reliable Method for Assessing the Virulence of Leishmania Parasites

Quantificação de crescimento intracelular dentro de macrófagos é um rápido e confiável método para avaliar a virulência de Leishmania parasitas

Full Text
11,071 Views
10:01 min
March 16, 2018

DOI: 10.3791/57486-v

Amrita Sarkar1, Yousuf A. Khan1, Maria Fernanda Laranjeira-Silva1, Norma W. Andrews1, Bidyottam Mittra1

1Department of Cell Biology and Molecular Genetics,University of Maryland

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Todas as espécies de Leishmania patogênicas residem e replicam no interior de macrófagos de seus hospedeiros vertebrados. Aqui, apresentamos um protocolo para infectar murino macrófagos derivados da medula óssea em cultura com Leishmania, seguido por quantificação exacta da cinética de crescimento intracelular. Esse método é útil para estudar os fatores individuais que influenciam a interação patógeno-hospedeiro e virulência de Leishmania .

O objetivo geral deste experimento é avaliar a virulência de várias cepas de Leishmania através da infecção de macrófagos derivados da medula óssea murina in vitro e a subsequente quantificação da cinética de crescimento intracelular do parasita. Este método pode nos ajudar a responder a perguntas-chave sobre os fatores do macrófago do hospedeiro e do patógeno que determinam a virulência dos parasitas infecciosos de Leishmania. A principal vantagem dessa técnica é que é um método rápido, econômico e confiável que requer significativamente menos animais, em comparação com estudos in vivo.

As implicações dessa técnica se estendem à terapia da leishmaniose, pois pode ser usada para avaliar a infectividade de cepas mutadas de Leishmania ou a eficácia de compostos terapêuticos. A demonstração visual desse método é crítica, pois as etapas de isolamento de macrófagos derivados da medula óssea e quantificação de parasitas intracelulares são difíceis de aprender apenas com protocolos escritos. Comece prendendo um camundongo fêmea de quatro a seis semanas a uma placa de dissecação e desinfetando o animal com etanol a 70%.

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