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DOI: 10.3791/59915-v
Jenny Lazarus1, Yagiz Akiska1, Mirna Perusina Lanfranca1, Lawrence Delrosario1, Lei Sun1, Daniel Long2, Jiaqi Shi3, Howard Crawford2, Marina P. Di Magliano1, Weiping Zou1, Timothy Frankel1
1Department of Surgery,University of Michigan, 2Department of Molecular and Cellular Physiology,University of Michigan, 3Department of Pathology,University of Michigan
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Multiplex fluorescent immunohistochemistry is a technique that allows for the visualization of multiple cell types in intact formalin-fixed, paraffin-embedded tissue. This method facilitates both cell identification and spatial analysis of cell interactions, particularly in the tumor microenvironment.
Multiplex fluorescente imunoistoquímica é uma tecnologia emergente que permite a visualização de vários tipos de células dentro de formalina intacta-fixo, parafina incorporado (FFPE) tecido. Apresentados são diretrizes para garantir um multiplex de 7 cores bem sucedido com instruções para otimizar anticorpos e reagentes, preparando slides, design e dicas para evitar problemas comuns.
A imunohistoquímica fluorescente multiplex identifica vários tipos de células e suas localizações em tecido integrado à parafina fixa de formalina intacta, permitindo não apenas a identificação celular, mas também a análise espacial celular para célula. A principal vantagem desta técnica manual é o uso de múltiplos anticorpos da mesma espécie sem reatividade cruzada. Esta técnica permite uma visão aprofundada das interações das células imunes e cancerígenas no microambiente tumoral.
Ao experimentar essa técnica pela primeira vez, deixe aproximadamente três a quatro dias de coloração e acompanhe completamente cada etapa durante o processo. Um método mais fraco do processo de coloração e do design multiplex é fundamental para diminuir as armadilhas comuns e esperadas. Comece desparafinando e reidratando os slides.
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