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DOI: 10.3791/61713-v
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This study presents a protocol for simultaneous live imaging of multiple specimens using light sheet-based fluorescence microscopy, addressing issues of ambient variance in developmental biology. By utilizing a cobweb holder for stacking embryos, the method enhances the efficacy of imaging while minimizing inconsistencies.
A microscopia de fluorescência à base de folha de luz é a ferramenta mais valiosa na biologia do desenvolvimento. Um grande problema em estudos comparativos é a variância ambiente. Nosso protocolo descreve uma estrutura experimental para imagens ao vivo simultâneas de múltiplos espécimes e, portanto, aborda essa questão de forma pró-ativa.
Os microscópios de florescência de folha de luz baseados em câmara de amostra são projetados para alto conteúdo em vez de alto rendimento. Os ensaios de imagem ao vivo devem, portanto, ser realizados sequencialmente e, portanto, menos afetados pela variação do ambiente. Nosso suporte de teia de aranha permite o empilhamento e a geração simultânea de imagens de vários embriões, eliminando a variação do ambiente e aumentando o rendimento.
A montagem de embriões no suporte da teia de aranha requer uma certa sutileza. Um vídeo explicativo é ideal para ilustrar a sequência dos muitos gestos curtos de conduta. Para calibração da câmara de amostra do microscópio de fluorescência de folha de luz.
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