Um Método Simples Modificado para Indução de Infarto do Miocárdio em Camundongos

Sob anestesia adequada, o coração de camundongo foi exteriorizado através do espaço intercostal, e o infarto do miocárdio foi induzido com sucesso pela ligadura da artéria descendente anterior (DA) usando materiais prontamente disponíveis na maioria dos laboratórios.

Este relato apresenta uma abordagem única para a indução de infarto do miocárdio em camundongos. O método atual é fácil, economiza tempo e utiliza tubos cirúrgicos e equipamentos encontrados prontamente na maioria dos laboratórios. O estabelecimento de modelos de infarto do miocárdio fornece uma premissa para investigar os mecanismos passados de remodelação pós-IAM e variação de novas terapêuticas.

Aplique o creme depilatório no peito do rato e aguarde um minuto. Em seguida, limpe suavemente o creme depilatório e os cabelos com gaze molhada. Fixe o mouse em uma plataforma cirúrgica na posição supina.

Desinfetar a área cirúrgica conforme descrito no texto. Em seguida, coloque um pano estéril ao redor da área desinfetada. Faça um corte de 0,5 centímetro na pele ao longo da linha que liga o xifoide e a axila, e separe sem rodeios os músculos peitoral maior e peitoral menor usando pinças.

Abra o quarto espaço intercostal usando um hemostático Micro-Mosquito. Exteriorizar o coração empurrando-o em direção ao quarto espaço intercostal com o dedo indicador da mão esquerda. Fixar o coração com a mão esquerda e ligar o ramo descendente anterior esquerdo com sutura 6/0 a três milímetros de sua origem.

Coloque o coração de volta na cavidade torácica rapidamente. Evacue o ar para fora da cavidade torácica pressionando suavemente a cavidade torácica. Para o controle da dor pós-operatória, injetar buprenorfina por via subcutânea a cada quatro a seis horas por até setenta e duas horas pós-operatórias.

Coloque o mouse em uma almofada de aquecimento para se recuperar da anestesia. Fixar o camundongo eutanasiado na plataforma cirúrgica na posição supina. Faça uma incisão ventral de aproximadamente três a quatro centímetros no abdome superior.

Corte as costelas de ambos os lados da cavidade torácica e, em seguida, remova o diafragma. Perfundir o coração com 10 mililitros de frio quatro graus celsius 1X PBS através de injeção intraventricular. Em seguida, colete o coração cortando a raiz da aorta e armazenando-o imediatamente a 80 graus Celsius negativos.

Corte o coração congelado em seções de um milímetro de espessura no gelo usando lâminas de barbear. Incubar as fatias de coração preparadas em solução de TTC a 1% dissolvida em um PBS 1X a 37 graus Celsius por 10 a 15 minutos. Em seguida, fotografe as fatias usando uma câmera digital.

Após a ligadura da artéria coronária, a análise da coloração TTC indicou indução bem-sucedida de infarto do miocárdio e mudanças temporais do tamanho da cicatriz pós-IM. Os resultados da análise de sobrevivência mostraram mortalidade evidente dentro de sete dias após o IM em camundongos C57BL/6J machos e fêmeas. A ruptura ventricular foi uma causa comum de morte pós-IAM.

A avaliação ecocardiográfica pós-IM demonstrou indução bem-sucedida de disfunção contrátil e remodelamento ventricular. Ao tentar exteriorizar o coração, não pressione a cavidade torácica em primeiro lugar e, seguindo nossa resistência, indica a necessidade de ajustar a direção contra o elogio ponderado. Após esse procedimento, a injeção intramiocárdica de vetores ou células virais pode ser realizada para testar a eficácia de terapias gênicas ou terapias celulares em questões de doenças cardíacas.