Um Método Simples Modificado para Indução de Infarto do Miocárdio em Camundongos
December 3rd, 2021
Sob anestesia adequada, o coração de camundongo foi exteriorizado através do espaço intercostal, e o infarto do miocárdio foi induzido com sucesso pela ligadura da artéria descendente anterior (DA) usando materiais prontamente disponíveis na maioria dos laboratórios.
Este relato apresenta uma abordagem única para a indução de infarto do miocárdio em camundongos. O método atual é fácil, economiza tempo e utiliza tubos cirúrgicos e equipamentos encontrados prontamente na maioria dos laboratórios. O estabelecimento de modelos de infarto do miocárdio fornece uma premissa para investigar os mecanismos passados de remodelação pós-IAM e variação de novas terapêuticas.
Aplique o creme depilatório no peito do rato e aguarde um minuto. Em seguida, limpe suavemente o creme depilatório e os cabelos com gaze molhada. Fixe o mouse em uma plataforma cirúrgica na posição supina.
Desinfetar a área cirúrgica conforme descrito no texto. Em seguida, coloque um pano estéril ao redor da área desinfetada. Faça um corte de 0,5 centímetro na pele ao longo da linha que liga o xifoide e a axila, e separe sem rodeios os músculos peitoral maior e peitoral menor usando pinças.
Abra o quarto espaço intercostal usando um hemostático Micro-Mosquito. Exteriorizar o coração empurrando-o em direção ao quarto espaço intercostal com o dedo indicador da mão esquerda. Fixar o coração com a mão esquerda e ligar o ramo descendente anterior esquerdo com sutura 6/0 a três milímetros de sua origem.
Coloque o coração de volta na cavidade torácica rapidamente. Evacue o ar para fora da cavidade torácica pressionando suavemente a cavidade torácica. Para o controle da dor pós-operatória, injetar buprenorfina por via subcutânea a cada quatro a seis horas por até setenta e duas horas pós-operatórias.
Coloque o mouse em uma almofada de aquecimento para se recuperar da anestesia. Fixar o camundongo eutanasiado na plataforma cirúrgica na posição supina. Faça uma incisão ventral de aproximadamente três a quatro centímetros no abdome superior.
Corte as costelas de ambos os lados da cavidade torácica e, em seguida, remova o diafragma. Perfundir o coração com 10 mililitros de frio quatro graus celsius 1X PBS através de injeção intraventricular. Em seguida, colete o coração cortando a raiz da aorta e armazenando-o imediatamente a 80 graus Celsius negativos.
Corte o coração congelado em seções de um milímetro de espessura no gelo usando lâminas de barbear. Incubar as fatias de coração preparadas em solução de TTC a 1% dissolvida em um PBS 1X a 37 graus Celsius por 10 a 15 minutos. Em seguida, fotografe as fatias usando uma câmera digital.
Após a ligadura da artéria coronária, a análise da coloração TTC indicou indução bem-sucedida de infarto do miocárdio e mudanças temporais do tamanho da cicatriz pós-IM. Os resultados da análise de sobrevivência mostraram mortalidade evidente dentro de sete dias após o IM em camundongos C57BL/6J machos e fêmeas. A ruptura ventricular foi uma causa comum de morte pós-IAM.
A avaliação ecocardiográfica pós-IM demonstrou indução bem-sucedida de disfunção contrátil e remodelamento ventricular. Ao tentar exteriorizar o coração, não pressione a cavidade torácica em primeiro lugar e, seguindo nossa resistência, indica a necessidade de ajustar a direção contra o elogio ponderado. Após esse procedimento, a injeção intramiocárdica de vetores ou células virais pode ser realizada para testar a eficácia de terapias gênicas ou terapias celulares em questões de doenças cardíacas.
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Visão Geral
Este artigo apresenta um método para induzir infarto do miocárdio em camundongos, utilizando materiais cirúrgicos prontamente disponíveis. A técnica permite o estudo da remodelação pós-IM e a avaliação de novas terapias.
Principais Componentes do Estudo
Área da Ciência
- Pesquisa cardiovascular
- Modelos de infarto do miocárdio
- Técnicas cirúrgicas em estudos com animais
Fundo
- O infarto do miocárdio é uma área crítica de estudo na pesquisa cardiovascular.
- Compreender a remodelação pós-IM é essencial para o desenvolvimento de novos tratamentos.
- Métodos existentes podem ser complexos ou requerer equipamentos especializados.
- Este estudo visa simplificar o processo usando materiais laboratoriais comuns.
Propósito do Estudo
- Estabelecer um modelo confiável de infarto do miocárdio em camundongos.
- Facilitar a pesquisa sobre a remodelação cardíaca pós-IM.
- Permitir o teste de terapias genéticas e celulares em doenças cardíacas.
Métodos Usados
- Aplicação de creme depilatório para preparação cirúrgica.
- Exteriorização do coração através do espaço intercostal.
- Ligação da artéria descendente anterior esquerda.
- Cuidados pós-operatórios e avaliação do infarto do miocárdio.
Principais Resultados
- A indução bem-sucedida de infarto do miocárdio foi confirmada através da coloração TTC.
- As taxas de mortalidade foram observadas dentro de sete dias após o IM.
- Disfunção contrátil e remodelação ventricular foram documentadas.
- O método permite intervenções terapêuticas subsequentes.
Conclusões
- O método descrito é eficiente e reprodutível para induzir IM em camundongos.
- Ele fornece uma plataforma para pesquisas adicionais em terapias cardíacas.
- Estudos futuros podem se basear neste modelo para explorar várias intervenções.
Perguntas Frequentes
Executive Industry Relevance
Robust in vivo myocardial infarction (MI) models are essential for preclinical evaluation of cardiac therapeutics and mechanistic studies of post-MI remodeling. This streamlined coronary artery ligation protocol enables reproducible MI induction in mice, supporting translational research and early-stage therapeutic hypothesis testing. The method's accessibility and efficiency facilitate broader adoption across discovery and preclinical R&D portfolios.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables interrogation of cardiac injury pathways and post-MI remodeling mechanisms.
- Supports functional validation of therapeutic targets in a disease-relevant in vivo context.
- Facilitates mechanistic de-risking for candidate interventions targeting cardiac repair.
Screening & Assay Development
- Provides a standardized platform for evaluating efficacy of gene or cell therapies post-MI.
- Delivers reproducible infarct size and contractile dysfunction for quantitative assessment.
- Enables downstream integration with imaging and histological assays for robust readouts.
Translational & Preclinical Research
- Aligns with disease-relevant endpoints such as ventricular remodeling and survival analysis.
- Supports continuity from mechanistic discovery to preclinical therapeutic validation.
- Allows for assessment of intervention timing and impact on post-MI outcomes.
Pipeline & Workflow Integration
This MI induction protocol fits at the interface of early discovery and preclinical validation, enabling hypothesis-driven studies and candidate screening in a physiologically relevant model.
- Discovery Biology: Facilitates hypothesis testing on cardiac injury and repair mechanisms.
- Screening: Provides reproducible infarct induction for comparative efficacy studies.
- Analytics: Supports quantitative measurement of infarct size, contractile function, and survival.
- Translational Research: Bridges mechanistic insights to preclinical therapeutic evaluation in vivo.
- Enterprise Reuse: Offers a scalable, accessible model for diverse cardiac research programs.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence in target validation and mechanistic studies.
- Operational Value: Standardizes MI induction, reducing technical variability and training burden.
- Strategic Value: Accelerates go/no-go decisions for cardiac therapeutic candidates.
- Portfolio Impact: Enables risk-adjusted prioritization of interventions targeting post-MI remodeling.
Implementation Considerations
- Requires surgical proficiency and familiarity with murine cardiac anatomy.
- Needs access to basic surgical instruments and post-operative care infrastructure.
- Demands cross-team standardization for reproducibility in multi-site studies.
- Adaptable to gene or cell therapy delivery post-ligation for intervention studies.
- Mortality and technical variability must be monitored and reported for data integrity.
