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JoVE Journal Genetics
Wild-type Blocking PCR Combined with Sanger Sequencing for Detection of Low-frequency Somatic Mutation

PCR de bloqueio de tipo selvagem combinado com sequenciamento de Sanger para detecção de mutação somática de baixa frequência

Full Text
1,479 Views
07:17 min
August 23, 2024

DOI: 10.3791/65647-v

Haixia Xu*1, Junyan Lu*2, Zhou Li1, Ran Chen1

1Kindstar Global Technology Inc., 2Yongzhou Central Hospital

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Summary

Este artigo apresenta a aplicação de um método de detecção de baixa frequência baseado no sequenciamento de Sanger no linfoma angioimunoblástico. Forneça uma base para aplicar este método a outras doenças.

Transcript

Estamos interessados em entender a mutação somática de baixa frequência em tecidos cancerígenos. Este artigo apresenta a aplicação do método de detecção de mutação de baixa frequência com base em nosso sequenciamento de Sanger no teste de linfoma angioimunoblástico, fornecendo uma base para a aplicação desse método a outros testes de doenças. Atualmente, existem métodos de detecção de mutação de baixa frequência, como PCR quantitativo, PCR digital e NGS.

Mas não há relatório sobre a detecção de mutação de baixa frequência IGHV7-3 com base no sequenciamento de Sanger, do qual o limite de detecção é de apenas 5% a 20% Geralmente devido a limitações técnicas, a detecção de baixa frequência com base no sequenciamento de Sanger não pode ser quantificada com precisão. Nossa técnica oferece alta sensibilidade, baixo custo e forte flexibilidade, tornando-a a escolha ideal para detecção de mutações de baixa frequência. Estamos planejando projetar primers pseudogênicos, bem como primers GCR multiplex para explorar sua aplicação em doenças do sangue.

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