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Microscopia de dois fótons sensível à polarização para caracterização estrutural amiloide livre d...
Microscopia de dois fótons sensível à polarização para caracterização estrutural amiloide livre d...
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JoVE Journal Chemistry
Polarization-Sensitive Two-Photon Microscopy for a Label-Free Amyloid Structural Characterization

Microscopia de dois fótons sensível à polarização para caracterização estrutural amiloide livre de marcação

Full Text
1,683 Views
05:54 min
September 8, 2023

DOI: 10.3791/65670-v

Maciej Lipok1, Patryk Obstarczyk1, Joanna Olesiak-Bańska1

1Institute of Advanced Materials,Wrocław University of Science and Technology

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Este trabalho descreve como a microscopia de dois fótons sensível à polarização pode ser aplicada para caracterizar a organização local dentro de superestruturas-esferulitos amiloides livres de marcação. Também descreve como preparar e medir a amostra, montar a configuração necessária e analisar os dados para obter informações sobre a organização local das fibrilas amiloides.

Nosso objetivo é desenvolver novos marcadores ópticos e técnicas para a detecção de agregados proteicos denominados amiloides. Eles estão envolvidos em uma série de doenças, como a doença de Alzheimer e diabetes tipo dois. Então, para curar essas doenças, precisamos ter técnicas para visualizar amiloides.

Nós demonstramos que a microscopia de dois fótons pode ser usada para detectar a orientação da fibrila amiloide dentro de superestruturas amiloides. Ela pode ser obtida não apenas usando corantes amilóide-específicos, mas também utilizando a autofluorescência de amiloides. Como nossa técnica opera em fenômenos ópticos não lineares, ela pode alcançar fotoseleção angular reduzida, melhorar a resolução axial, menor espalhamento de luz, menor fototoxicidade e penetração mais profunda da amostra quando comparada à técnica microscópica de fluorescência de um fóton.

A microscopia de fluorescência de dois fótons sensível à polarização é uma ferramenta promissora para obter imagens da estrutura interna de várias estruturas biológicas complexas, não apenas agregados proteicos, mas também vesículas de DNA e membranas lipídicas.

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