Analisando estruturas amilóides em uma seção de tecido usando microscopia de imagem de fluorescência

Pegue uma seção de tecido com agregados amilóides representando depósitos anormais de proteínas.

O tecido é corado com o corante fluorescente heptamer-formyl thiophene acético acid ou hFTAA, que se liga especificamente às estruturas de folha beta das fibrilas amilóides.

Imagem da lâmina usando um microscópio confocal equipado com uma unidade de microscopia de imagem de fluorescência, que mede a vida útil de fluorescência das moléculas de corante.

Otimize as configurações do microscópio para excitação eficaz das moléculas de corante.

Quando a luz do laser ilumina o tecido, o hFTAA excita e fluoresce.

A ligação de corante mais forte em estruturas compactas resulta em vida útil mais longa, enquanto a ligação de corante mais fraca em estruturas menos compactas leva a uma vida útil mais curta.

Posteriormente, o software gera uma imagem codificada por cores do agregado.

Cores, como vermelho e amarelo, aparecem na periferia, indicando tempos de vida de fluorescência mais curtos que refletem estruturas amilóides menos compactas e instáveis.

Enquanto cores como azul e verde no núcleo representam tempos de vida de fluorescência mais longos, refletindo estruturas amilóides mais compactas e estáv