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DOI: 10.3791/65856-v
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This study presents a protocol for the efficient production of 3D-bioprinted cocultures of iPSC-derived neurons and astrocytes within hydrogel scaffolds. The developed model operates in 96- or 384-well formats and demonstrates high post-print viability and neurite outgrowth within seven days, while expressing maturity markers for both cell types. This approach aims to enhance the throughput and automation of 3D cell culture systems.
Aqui, apresentamos um protocolo para produzir coculturas bioimpressas em 3D de neurônios e astrócitos derivados de iPSC. Este modelo de cocultura, gerado dentro de um arcabouço de hidrogel em formatos de 96 ou 384 poços, demonstra alta viabilidade pós-impressão e crescimento de neuritos em 7 dias e mostra a expressão de marcadores de maturidade para ambos os tipos celulares.
A modelagem de células 3D é um campo novo que se expandiu exponencialmente na última década. Esses modelos têm demonstrado facilitar o crescimento neuronal e representar com mais precisão os fenótipos da doença. No entanto, acreditamos que há uma mudança no sentido de tornar esses modelos de maior rendimento e uma necessidade de adotar a automação dentro do desenvolvimento.
Os métodos tradicionais de desenvolvimento de culturas 3D podem ser trabalhosos e demorados para serem estabelecidos, mas a bioimpressão 3D é uma tecnologia que pode ser aplicada para escalar esses processos de desenvolvimento. Essa tecnologia permite que centenas de modelos idênticos sejam criados de forma eficiente e sem erro humano. Este protocolo desenvolve culturas complexas porque as células neurais são cultivadas em 3D em matrizes hidrogéis biologicamente ativas.
Mas, criticamente, esse protocolo prioriza a velocidade e a conveniência no desenvolvimento do modelo, o que pode faltar nesse campo e dificultar a implementação na indústria. Este protocolo define um método para estabelecer muitas coculturas 3D de forma muito eficiente com entrada limitada dos usuários. Esperamos que isso remova as barreiras ao uso de modelos complexos de cultura de células em ensaios de alto rendimento e facilite a investigação adicional do efeito da cultura 3D em tipos de células neurais.
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