Функционализированная изоляция клеток-мишеней на основе проводов: метод ex vivo для выделения раковых клеток из периферической крови с шипами

Молекулы адгезии эпителиальных клеток, или EpCAM, представляют собой поверхностные трансмембранные гликопротеины, сверхэкспрессируемые в быстро пролиферирующих эпителиальных клетках при раке предстательной железы. Чтобы выделить клетки, экспрессирующие EpCAM, начните с медицинской проволоки с функционализированным наконечником с золотым покрытием. Функционализация слоев полимерного геля, содержащего ковалентно связанные EpCAM-специфические антитела.

Погрузите проволоку в суспензию периферической крови, содержащую флуоресцентно меченые раковые клетки. Следите за тем, чтобы функционализированная часть оставалась смоченной в кровяной суспензии. EpCAMs на раковых клетках распознают и связываются со своими специфическими антителами, функционализированными на проводе.

Промойте с буфером, чтобы удалить все несвязанные элементы с поверхности провода. Согните провод и закрепите его на стеклянном предметном стекле, содержащем буфер, при этом функционализированная часть будет погружена в буфер. Используйте флуоресцентный микроскоп, чтобы проверить яркую флуоресценцию цитоплазмы и ядер клетки и подтвердить наличие захваченных клеток на проволоке.

Обработайте проволоку с помощью антиадгезионног