Мультиплексное количественное обнаружение бактерий с использованием магнитных микросфер, меченных красителями
Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 3:54 мин. • December 23rd, 2025
Возьмите пробную пластину, содержащую смесь микросфер магнитного полистирола, окрашенных изнутри спектрально разными флуорофорами.
Каждый набор микросфер ковалентно связан с различными антителами захвата, специфичными для патогенных бактерий.
Добавьте убитую теплом смесь патогенных бактерий. Инкубировать.
Антитела захвата связываются с целевыми бактериальными антигенами, образуя комплексы микросфера-бактерия.
Используйте магнитный сепаратор для осаждения комплексов. Выбросьте несвязанные бактерии и промойте с помощью буфера.
Добавьте буфер и биотинилированные антитела для обнаружения, которые специфически связываются с бактериями, связанными с микросферами.
Магнитно отделите комплексы и промойте с буфером.
Восстановите суспендию комплексов в буфере. Репортерные молекулы пипетки, содержащие стрептавидин с флуорофорной связью, которые связываются с биотинилированными детектирующими антителами.
Магнитно отделите и промойте комплексы. Снова приостановка в буфере.
Во время анализа на основе потока первый лазер возбуждает внутренние флуорофоры микросферы, генерируя уникальные спектральные сигнатуры и идентифицируя уникальные наборы микросфер.
Второй лазер возбуждает флуорофорные репортер
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео