Анализ амилоидных структур в срезе ткани с помощью флуоресцентной пожизненной микроскопии

Возьмите срез ткани с амилоидными агрегатами, представляющими аномальные белковые отложения.

Ткань окрашена флуоресцентным красителем гептамер-формилтиофен уксусной кислотой или hFTAA, который специфически связывается с бета-листами структур амилоидных фибрилл.

Визуализируйте предметное стекло с помощью конфокального микроскопа, оснащенного микроскопом для флуоресцентной визуализации, который измеряет время жизни флуоресценции молекул красителя.

Оптимизируйте настройки микроскопа для эффективного возбуждения молекул красителя.

Когда лазерный свет освещает ткань, hFTAA возбуждается и флуоресцирует.

Более сильное связывание красителя в компактных структурах приводит к увеличению срока службы, в то время как более слабое связывание красителя в менее компактных структурах приводит к сокращению срока службы.

Позже программное обеспечение генерирует изображение агрегата с цветовой кодировкой.

Цвета, такие как красный и желтый, появляются на периферии, указывая на более короткие сроки жизни флуоресценции, которые отражают менее компактные, нестабильные структуры амилоида

.

В то время как цвета, такие как синий и зеленый в ядре, представляют более длительные сроки жизни флуоресценции, отражая