В пробирке SUMOylation Assay для изучения сумо E3 лигаза активность

Общая цель этого эксперимента состоит в том, чтобы проверить интересующий нас белок, который может быть SUMOylated или является SUMO E3 лигазой. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области SUMOylation, такие как идентификация лигазы SUMO E3. Основное преимущество этой методики заключается в том, что она может быть использована для исследования специфичности лигазы SUMO E3 по отношению к различным изоформам SUMO.

Демонстрировать процедуру будет Ван-Шань Янг, аспирант из моей лаборатории. Чтобы очистить метку K-bZIP, сначала инкубируйте 10 миллилитров клеточного лизата с 50 микролитрами магнитных шариков, помеченных антителами, в 14-миллилитровой полипропиленовой пробирке. Затем вращайте трубку со скоростью 50 оборотов в минуту при четырех градусах Цельсия в течение трех часов в суспензионном миксере.