Zusammengesetzte Administration ich

Lab Animal Research
 

Overview

Quelle: Kay Stewart, RVT, RLATG, Anus; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Universität von Notre Dame, IN

wie viele Forschungsprotokolle verlangen, dass ein Tier eine Substanz injiziert werden, muss die Route und die Menge des Stoffes genau bestimmt werden. Gibt es mehrere Darreichungsformen in der Maus und Ratte. Welche Route zu verwenden, richtet sich nach mehreren Faktoren der Substanz injiziert werden: der pH-Wert der Lösung, die Lautstärke für die gewünschte Dosierung und die Viskosität der Lösung erforderlich. Schwere Gewebeschäden kann auftreten, wenn eine Substanz nicht richtig verwaltet wird. Dieses Video befasst sich mit den verschiedenen Methoden der Zurückhaltung und technischen Details für die meisten gängigen Injektion Routen.

Cite this Video

JoVE Science Education Database. Lab Animal Research. Zusammengesetzte Administration ich. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

Principles

wie viele von den Testverbindungen, die in der biomedizinischen Forschung genutzt werden neuartige Stoffe, die nicht im Handel erhältlich sind, richtige Substanz Vorbereitung ist unerlässlich. Grundsätzliche Bedenken der Sterilität, Viskosität und physiologische Verträglichkeit der Formulierung die Testverbindung und dem Medium- oder Fahrzeug-in denen es aufgelöst/suspendiert ist angegangen werden muss. Eine Dosierung Lösung muss ob enteral oder parenteral, physiologisch, der richtige pH-Wert für die Verbindung richtig absorbiert werden und Gewebeverletzungen zu verhindern, gepuffert werden. Die Viskosität einer Lösung möglicherweise der bestimmende Faktor für die Route der Injektion. Eine Substanz, die zu dick durchlaufen die kleinen Gauge-Nadel für die gängigen Injektionsstellen in eine Maus erforderlich ist erfordern Neuformulierung zur oralen Verabreichung. Alle Lösungen, die parenteral injiziert werden muss steril zu verhindern, dass Krankheitserreger in das Tier eingeführt. 1

Nadelauswahl für Injektionszwecke basiert auf die Art der Verabreichung, die Viskosität der Lösung und die Größe des Tieres. Im Allgemeinen sollte die kleinste Spurweite möglich, die Lösung verwalten gewählt werden; Dies ist in der Regel 22-30 Gauge in der Maus und 20-25 Gauge für die Ratte. Die Spritze ausgewählt werden ist wieder das kleinste mögliche mit die richtige Abstufungen für die genaue Dosierung erforderlich. 2,3,4

gibt es mehrere Routen für parenterale Injektionen. Für die Zwecke dieses Video sind die am häufigsten verwendeten Routen (subkutane [SQ], intraperitoneal [IP] intravenös [IV] und intramuskuläre [IM]) diskutiert. Andere Injektionstechniken, z. B. intradermale (ID), intrakranielle, intrakardialen, Straßenräuber Injektionen, intranasale und intravenöse über den Retro-Orbital-Plexus fallen in ein anderes Video.

die Absorptionsrate von Verbindungen variiert je nach Route. Die IV-Route stellt die Substanz direkt in die Blutbahn, Beseitigung jeder Zeit brauchte für die Absorption. Eine Substanz, die injizierten IM aufgrund der reichlich vorhandenen Anzahl von Schiffen innerhalb des Muskelgewebes schnell absorbiert wird. Obwohl eine IP-Injektion parenteraler Verabreichung gilt, ist der Absorption Mechanismus tatsächlich mehr Ähnlichkeit mit oralen Dosierung. Subkutane Dosierung ist eine bequeme Möglichkeit, eine große Menge an Flüssigkeit zu verabreichen. Die Absorptionsrate ist langsamer als andere Routen, die eine nachhaltige Wirkung. Die Wahl des Weges ist ein wesentlicher Bestandteil des experimentellen Protokolls. 4

subkutane Verabreichung stellt die Materialien zwischen den Hautschichten und die Muskeln in einem virtuellen Raum, geschaffen durch Anheben der Haut. Dies ermöglicht die sichere Injektion von größere Mengen wie die Flüssigkeit langsam absorbiert wird und die überschüssige Flüssigkeit wird schnell über die Nieren ausgeschieden. Dies vermeidet Fluid Überlast und Lungenödem, die sich aus großen Mengen intravenös injiziert werden kann. Die Nadel ausgewählt sollte die kleinstmögliche Größe, die für die Viskosität des Materials injiziert erlauben, in der Regel eine 22-30 gauge Nadel für Mäuse und eine 22-25 gauge Nadel für Ratten. Injektionsvolumina reichen von 0,1 ml bis 0,5 ml für Mäuse, und 0,1 ml bis 1,0 ml für Ratten pro Injektionsstelle.

die IP-Route ist in Nagetiere allgemein verwendet, weil es für die Lieferung von größeren Mengen als ein IV oder IM Route verwendet werden kann. Jedoch die Aufnahme von Material, das verwaltet IP ist deutlich langsamer, dass eine Sofortnachricht oder IV route. Substanzen, die mit dieser Methode verabreicht werden gedacht, um hepatischen Metabolismus vor dem Eintritt in die Blutbahn unterzogen werden. 5 Wieder, die Nadel ausgewählt sollte die kleinstmögliche Größe, die für die Viskosität des Materials injiziert erlauben, in der Regel eine 22-30 gauge Nadel für Mäuse und eine 22-25 gauge Nadel für Ratten. Bei Mäusen, Injektion Bände reichen von 0,05 ml bis 1,0 ml pro Injektion anhand der Größe der Maus. Für Ratten, die Reichweite beträgt 0,1 ml bis 1,5 ml pro Injektionsstelle.

IM Injektionen, obgleich in größeren Tieren verbreitet haben minimalen Gebrauch bei Mäusen und Ratten aufgrund ihrer geringen Muskelmasse. Unsachgemäße oder wiederholte Injektion in den Muskel kann Nervenschäden, was zu Lähmungen oder Muskel Nekrose verursachen. Die Nadel ausgewählt sollte die kleinstmögliche Größe sein, die für die Viskosität des Materials injiziert, in der Regel 27-30 Messen ermöglichen. Bei Mäusen, Injektion Bände reichen von 0,01 ml bis maximal 0,05 ml pro Injektionsstelle für den Gesäßmuskel. Injektionsvolumina für die Gastrocnemius haben maximal 0,05 ml. Im Gegensatz dazu Ratte Injektion Bände reichen von 0,01 ml bis maximal 0,3 ml pro Injektionsstelle für den Gesäßmuskel. Injektionsvolumina für die Gastrocnemius haben maximal 0,1 ml.

IV Injektion ist die effektivste Art der Verabreichung der Substanz, wie es unmittelbar in das Herz-Kreislauf-System eingeführt ist. Jedoch beschränkt sich mit der untermaßige Schiffe zur IV Dosierung in der Maus, seine Nützlichkeit. Wenn wiederholte intravenöse Verabreichung erforderlich ist, sollte die Verwendung von Gefäßzugang Häfen oder andere Dosierung Spezialgeräte für das Wohlergehen der Tiere betrachtet werden. Die Nadel ausgewählt sollte die kleinstmögliche Größe sein, die für die Viskosität des Materials injiziert, in der Regel 27-30 Messen ermöglichen. Injektion Bände reichen von 0,05 ml bis maximal 0,5 ml pro Injektion, basierend auf der Größe der Maus.

Route Maus Ratte
Nadel zu messen (g) Injektionsvolumen (mL) Nadel zu messen (g) Injektionsvolumen (mL)
SC 22 – 30 0,1 – 1,5 22 – 25 0,1 – 3.0
IP 22 – 30 0,05 – 1.0 20 – 25 0,1 – 1,5
IM 27 – 30 0,01 – 0,05 (gluteal/Gastrocnemius) 25 – 27 0.01-0.3 (Gesäßmuskel)

0,01-0,1 (Gastrocnemius)

IV 27 – 30 0 .05 – 0,5 22 – 25 0,05 – 4.0

Tabelle 1. Geeignete Nadel Gauge und Injektion Volumenbereich für Mäuse und Ratten je nach Route.

Procedure

1. subkutane Injektion

  1. manuell Restrain die Maus über die einhändige Zurückhaltung halten. Einmal erfasst, ermöglichen Sie die Maus, um auf einen Tisch oder eine andere sichere Oberfläche aufliegen. Achten Sie darauf, zu vermeiden, dass Druck auf den Körper der Maus.
  2. Ruhen die Ferse der Hand auf den Tisch zu vermeiden unnötige Gewicht des Mausrads die Atmungen gefährden können. Mäuse können auch in einem kommerziellen Gerät zurückgehalten werden. Für Ratten, ist es am besten verwenden Sie eine kommerzielle Rückhalteeinrichtung.
  3. Die Haut fassen und nach oben ziehen, ein Zelt der Haut zu schaffen. Wenn eine Rückhalteeinrichtung benutzen, Zange müssen gegebenenfalls die Haut durch den Schlitz auf der Oberseite zu erfassen.
  4. Stechen Sie die Nadel parallel zur Wirbelsäule, geleitet vom Kopf an der Basis der Hautfalte des Zeltes. Lenken Sie die Nadel vom Kopf auf die Möglichkeit der Einstiche an den Schädel zu vermeiden, wie die Schädelknochen der Maus sehr dünn ist. Ratten haben die Tendenz, ihren Kopf nach hinten, die die Injektion in die Nackenmuskulatur platziert werden könnte.
  5. Setzen Sie die Nadel Abschrägung ermöglicht ein sanftes Gleiten in die Haut ein. Beachten Sie, dass die Nadel unter die Finger greifen die Haut eingeführt wird. Zur Verbesserung der Sicherheit beim Einspritzen biogefährlichen Artikel wird die Haut mit einer Pinzette, wodurch die Möglichkeit einer Nadel Stick Verletzungen ergriffen.
  6. Ziehen Sie den Kolben, um für die richtige Platzierung zu überprüfen. Wenn Luft in die Spritze gezogen wird, bedeutet dies, dass die Spitze der Nadel sich nicht unter der Haut befindet und muss zurückgezogen und neu positioniert werden. Wenn es Gegendruck, gibt wenn der Kolben zog sich zurück, es zeigt die richtige Platzierung der Nadel, die die Injektion kann fortfahren.
  7. Spritzen die Substanz langsam mit einer stetigen Bewegung. Zur Vermeidung von Verlust des Artikels Injektion anhalten nach der Injektion, leicht drehen Sie die Nadel unter die Haut und drücken Sie die Haut an der Injektionsstelle beim Zurückziehen der Nadelöhrs.

Figure 1
Abbildung 1. Subkutane Injektion in den Mäusen.

2. intraperitoneale Injektion

  1. die einhändige manuelle Zurückhaltung-Methode dient dieser Injektionstechnik bei Mäusen. Passen Sie die Hand, so dass es auf den Hals, um die Maus verhindern hoch genug positioniert.
  2. Die schlaffe Haut am Nacken des Ansatzes zwischen Daumen und Zeigefinger fassen.
  3. Stabilisieren die Hinterhand von entweder fixieren die lose Haut entlang des Rückens zwischen der zweiten, dritten und vierten Finger und die Basis des Daumens, oder indem man die Rute zwischen dem dritten und vierten Finger.
  4. Die IP-Injektion bei der Ratte sind zwei Personen, eine Ratte und andererseits die Injektion durchführen zurückhalten erforderlich.
    1. Griff die Ratte über die Schultern mit den zeige- und Mittelfinger auf jeder Seite des Halses und der Handfläche auf der Rückseite. Der Daumen und die dritten und vierten Finger sollte die Truhe, um vorwärts oder rückwärts Bewegung verhindern umschließen. Die Position der Finger auf jeder Seite des Halses verhindert, dass die Ratte den Kopf drehen.
    2. Die Ratte anheben und drehen, damit sich die ventralen Bauch.
    3. Der Hinterhand durch fassen die Füße und die Rute sicher und erweitern sie vom Körper Weg zu stabilisieren.
  5. Positionieren Sie die Maus oder Ratte aussetzen den Bauch, um sicherzustellen, dass es nach oben blickt.
  6. Kippen Sie das Tier mit dem Kopf nach unten auf ca. 30°-Winkel, um den Darm zu nach vorne fallen lassen.
  7. Injektion Wahrzeichen sind wie folgt:
    1. Bereich injiziert werden, grenzt an eine imaginäre Linie erstreckt sich horizontal über den Körper an der Spitze der Hüfte (von Flanke zu Flanke) cranially.
    2. Ist die Mittellinie der medialen Rand, als Haare wachsen in entgegengesetzte Richtungen trifft. In haarlose Tiere die Mittellinie erstreckt sich in einer geraden Linie von der Xiphoid bis zum Anus.
    3. Der seitlichen Rahmen ist eine Linie von oben von der Hüfte bis die Vorhaut des Mannes und von der Oberseite der Hüfte und im Anschluss an die Zitzen in das Weibchen.
    4. Dadurch eine dreieckige Fläche für sicheren Injektion.
  8. Injektion eines Artikels innerhalb der Wahrzeichen
    1. Nadel senkrecht zur Wirbelsäule, ab der Mittellinie im Dreieck wie oben beschrieben. Platzieren die Nadel in einem 90° Winkel zur Ebene des Körpers ermöglicht eine sichere Injektion unter Verwendung beider Seiten des Bauches. Dies ist besonders wichtig bei mehreren Injektionen, wie es Gewebetrauma minimiert, indem es ermöglicht Wechsel der Injektionsstellen.
    2. , Wenn die Nadel in einem Winkel von 90° gesetzt ist, wird es " Pop-" in die Bauchhöhle, zulassend einfacher Bestimmung der Tiefe. Dies ist auch ein optisches und haptisches Stichwort, dass die Nadel richtig positioniert ist.
    3. Aspirieren Sie die Spritze um Platzierung innerhalb der Bauchhöhle und nicht innerhalb der Harnblase, Darm oder vaskulären Strukturen gewährleisten.
    4. Vermeiden Sie injizieren kaudal in der männlichen Maus um zu verhindern, Verwaltung des Artikels in das Skrotum Sac. Vermeiden Sie Einspritzen in die Zitzen des Weibchens, Trauma zu verhindern.

Figure 2
Abbildung 2. Wahrzeichen für intraperitoneale Injektion bei Mäusen.

3. intramuskuläre Injektion

  1. Zurückhaltung für diese Technik für Mäuse und Ratten erfordert entweder zwei Personen oder die Verwendung eines Schlauches Zurückhaltung. Hier beschriebenen nutzt eine ein-Mann-Methode eine Haltevorrichtung.
    1. Legen Sie das Tier in der Rückhalteeinrichtung.
    2. Sobald das Tier in der Röhre ist, fassen Sie das Heck um das Tier mit den Hinterbeinen aus der Tube zu positionieren.
    3. Greifen die Haut der Flanke am kranialen Teil des Oberschenkelknochens verlängern das Bein und verhindern, dass die Knie biegen.
    4. Die Rückhalteeinrichtung so positionieren, dass es auf dem Tisch mit dem Tier steht ' s Kopf spitz nach unten, oder auf dem Tisch liegen deutete auf den Körper des Technikers zur Stabilisierung des Gerätes zu ermöglichen, während die Injektion durchgeführt wird.
    5. Injektion Sehenswürdigkeiten sind wie folgt: die Maus und Ratte Bein sind klein und die Gesäßmuskulatur (der kaudalen Oberschenkelmuskulatur) bestehend aus der größten Muskelmasse in den hinteren Gliedmaßen; die zweitgrößte Muskelmasse in den hinteren Gliedmaßen ist der Gastrocnemius (Wadenmuskel). Die Injektion erfolgt aus der kaudalen Aspekt des Beines.
      1. Locate die gluteal Muskeln Masse posterior in den Oberschenkelknochen. Die Knochen palpiert werden kann und leicht fühlte die große Muskeln.
      2. Beachten Sie, dass die Mittellinie des Beines von der hinteren Seite unter dem Gesichtspunkt der Hock am Schwanz läuft. Das Haar hat oft einen Kamm, woher es kommt, wie es in entgegengesetzte Richtungen von den seitlichen und inneren Oberflächen wächst.
      3. Injektionen erfolgen auf der lateralen Seite des Oberschenkels ab der Mittellinie. Dies verringert die Wahrscheinlichkeit einer Beschädigung der Nerven und Blutgefäße befindet sich auf der medialen Fläche der Leg
      4. Injektionen in den Gastrocnemius gemacht werden durchgeführt von der hinteren Seite und mit sorgfältiger Prüfung des Standortes der seitlichen Stammvenen.
    6. Injektion eines Artikels innerhalb der Wahrzeichen
      1. stechen Sie die Nadel senkrecht in den Oberschenkelknochen aus der Mittellinie, wie oben beschrieben, auf eine maximale Tiefe von 5 mm für den Gesäßmuskel und ein Maximum von 3 mm für die Gastrocnemius.
      2. , Trauma auf den Muskel, überflüssige Bewegung der Nadel in das Gewebe zu vermeiden muss verhindert werden. Die Spritze sollte gehalten werden, in einer Weise, die nicht Neuausrichtung der Hand erfordert, um die Injektion durchführen.
      3. Aspirieren Sie die Spritze um Platzierung innerhalb des Muskels und nicht in ein Blutgefäß zu gewährleisten.
      4. Injizieren Sie das Material in einer stetigen, fließenden Bewegung. Nicht injizieren Sie, schnell langsame Erweiterung des Muskels zu ermöglichen. Schnelle Injektion verursacht Gewebetrauma.

Figure 3
Abbildung 3. Intramuskuläre Injektion in den Gesäßmuskel in Ratten.

4. intravenöse Injektion, die unter Verwendung der Rute Ader

  1. Zurückhaltung des Tieres ist abhängig, ob das Tier betäubt ist oder wach.
    1. Verwendung einer zylindrischen Zurückhaltung Röhre für bewusste Mäusen oder Ratten, mit Ausnahme der haarlosen oder nackt Tiere. Aufgrund der öligen Beschaffenheit der haarlose Tiere ist es schwierig zu positionieren und entfernen sie aus dem Acryl Wachstumsbefürworter, wie ihre Haut zur Einhaltung des starren Kunststoffs neigt. So ein flexiblen Kunststoff Kegel verwendet.
    2. Andere Injektionsgeräten gehören beleuchtete Plattformen, beheizten Plattformen und starre Kunststoff Kegel, wo die Maus ist in der Kegel streng mit Spannung auf das Heck gehalten.
    3. Anesthetized Mäuse benötigen keinen Zurückhaltung.
    4. Wärmen den ganzen Körper oder nur die Rute zu Vasodilatation der Schweif Schiffe zu gewährleisten.
      1. Den ganzen Körper mit einer elektrischen Heizkissen gesetzt auf Medium oder eine zirkulierende Wasser Decke warm.
      2. Legen Sie das Tier in der Rückhalteeinrichtung, eingehüllt in die Wärmequelle.
      3. Das Tier genau beobachten, und von der Wärmequelle zu entfernen, sobald die Blutgefäße erweitern. Ganzkörper-Erwärmung kann auch mit der Verwendung einer Wärmelampe in einen Käfig geleitet erreicht werden. Bei Verwendung eine Wärmelampe die Tiere genau eingehalten werden, da es einfach sie zu überhitzen.
      4. Bei Erwärmung des ganzen Körpers nicht machbar, heizen die Rute allein kann erreicht werden, mit Hilfe von einem beheizten Handtuch, Wärmflasche, warme Kompressen oder das Heck ins warme Wasser eintauchen. Vorsicht muss eingesetzt werden, um nicht zu verbrennen das Heck, weil Wärmflaschen vorgewärmte Handtücher und Warmwasser Temperaturregler nicht verfügen. Es ist üblich für die Wärmequellen, zunächst überhitzt werden. Diese Wärmequellen auch abkühlen schnell.
    5. Die Verwendung von Gewebe-Öl ist eine weitere Möglichkeit, die Visualisierung der Schiffe zu verbessern.
      1. Dip einen Baumwolle-gespitzten Applikator in das Gewebe-Öl, und gelten die Ölquelle entfernt den Teil des Hecks, die zur Stabilisierung Griff ist. Das Gewebe Öl bewirkt, dass die Schiffe, die mehr klar definierten erscheinen.
      2. Es sind ungiftig Öle im Handel erhältlich, die eine Chemikalie in der Formulierung enthalten, die Erwärmung der Haut und Vasodilatation mit Verdunstung erzeugt. Diese Öle werden angewendet, und nach wenigen Augenblicken, wenn die Gefäße sichtbar sind, wird das überschüssige Öl mit einem Wattebausch entfernt abgewischt.
      3. Alle Öle können erschweren die Rute halten.
      4. Bei der Verwendung von Ölen die Injektion erfolgen muss sofort bei der Visualisierung der Schiffe.
    6. Injektion Wahrzeichen sind wie folgt:
      1. die seitlichen Schweif Venen befinden sich auf den Seiten des Hecks. Es gibt auch Schiffe, die entlang der dorsalen und ventralen Mittellinien der Rute, die nicht für Injektion Zwecke geeignet sind.
      2. Das Tier in die Restrainer kann gedreht werden, so dass die seitlichen Schiffe für eine einfache Injektion gerichtet sind. Alternativ ist die Rute drehbar, um die Schiffe in ein akzeptabler Injektionslösung bringen.
      3. Sind die Schiffe sehr oberflächlich. Sie werden mehr oberflächlich, wie sie die Schwanzwurzel erreichen.
    7. Injektion eines Artikels in die Rute Vene erfordert Geschick. Zur Vermeidung von Verletzungen der Blutgefäße muss überflüssige Bewegung der Nadel verhindert werden. Die Spritze wird in einer Art und Weise gehalten, die nicht Neuausrichtung der Hand erfordert, um die Injektion durchführen.
      1. Die Rute so positionieren, dass das Schiff sichtbar und unter Spannung gehalten wird. Gelten nicht übermäßige Spannung am Schwanz oder das Schiff kann gestreckt werden und die Durchblutung vermindert.
      2. Die Nadel direkt über das Schiff soweit distal wie möglich platzieren.
      3. Leichten Druck ausüben und schieben Sie die Nadel in die Rute Parallel zu den Wirbeln. Vermeiden Sie Angeln die Nadel nach unten die Nadel wird das Schiff Transekt. Die Nadel in das Gefäß sichtbar sein soll, da es mindestens 2 mm in das Lumen weit fortgeschritten ist.
      4. Injizieren, das Material in einer langsamen, fließenden Bewegung, Bruch des Schiffes zu vermeiden.
      5. Besonderes Augenmerk auf die Rute beim Einspritzen. Wenn das Schiff richtig eingesteckt, ist das Injektionsmaterial fließt in das Gefäß mit keinen Widerstand spüren. Das Blutgefäß blanchieren sollte, wie das Blut durch das Injektionsmaterial herausgedrückt wird.
      6. Wenn die Nadel nicht in das Schiff, es wird stark sein Widerstand beim Einspritzen. Wenn mit Kraft zu injizieren, wird das Material den subkutanen Raum füllen und die Rute wird mit Positionsnummern versehen. Beenden Sie sofort, wie Material intravenös injiziert werden soll auf das umliegende Gewebe ätzend sein kann. Ziehen Sie die Nadel heraus und versuchen Sie eine weitere Injektion mehr cranially auf dem Tail.
      7. Nach der erfolgreichen Injektion, ziehen Sie die Nadel heraus und üben Druck auf die Injektionsstelle, gute Hämostase zu versichern, bevor er das Tier an den Käfig.

Figure 4
Abbildung 4. Vene Injektion bei Mäusen Tail.

zusammengesetzte Verwaltung ist oft Bestandteil einer Tierstudie, und viele Faktoren müssen bewertet werden, um sicherzustellen, dass die Verbindung korrekt und auf humane Weise geliefert wird. Die zwei wichtigsten Verwaltung Routen sind enteral-über den Verdauungstrakt und parenterale-außerhalb des Verdauungstraktes. Der Hauptunterschied ist, wird die Verbindung über die enterale Route angegeben hepatischen Metabolismus vor dem Eintritt in die Blutbahn erfährt. In der Erwägung, dass die Substanz über eine parenterale Route wie intravenöse oder intramuskuläre, diesem ersten Durchgang durch die Leber, wodurch in der Regel eine höhere Bioverfügbarkeit überspringt.

In diesem ersten Video der Serie auf zusammengesetzte Verwaltung, beginnen wir die Faktoren, die die Wahl der Art der Verabreichung im Allgemeinen zu diskutieren. Und dann werden wir die häufigsten parenteralen Injektionen, die Methoden, einschließlich subkutane SC oder SubQ, intraperitoneal oder IP, intramuskuläre oder IM und intravenöse AKA IV abgekürzt überprüfen.

lassen Sie uns zunächst ein paar Dinge, die man bedenken sollte vor jeder Art von zusammengesetzten Verwaltungsverfahren Vorformen. Der erste Schritt ist, bereiten Sie die Lösung oder Suspension injiziert werden, und die erste grundlegende Überlegung Vorbereitung Substanz ist Sterilität. Um zu verhindern führt man Erreger in das Tier, es ist wichtig, dass das Injektionsmaterial sowie die Nadeln und Spritzen zu verwendenden steril sind.

Die zweite Überlegung ist physiologische Verträglichkeitkeit. Eine Dosierung Lösung muss ob enteral oder parenteral, verabreicht physiologisch zu geeigneten pH-Wert für die Verbindung richtig absorbiert werden und zu Gewebeschäden zu vermeiden, gepuffert werden. Der dritte Faktor ist die Viskosität der Injektion-Artikels, der in Nadelauswahl eine entscheidende Rolle spielt. In der Regel 20 bis 30 g-Nadeln in parenteralen Verwaltungsverfahren für Mäuse und Ratten eingesetzt. Die Naben der diese Nadeln sind in der Regel farbkodiert zur leichteren Identifizierung.

Sollte die Lösung ausreichend Flüssigkeit mindestens eines dieser Nadeln durchlaufen haben. Wenn die Lösung durch mehrere passieren kann, dann ist die Wahl in der Regel die kleinste Spurweite machbar. Der nächste Faktor ist Verwaltung Volumen, dass Affekte Auswahl Spritze. Ähnlich wie Nadeln, die kleinste mögliche Spritze benötigt für die genaue Dosierung mit richtigen Promotionen, gewählt werden. Die Nadelstärke und die Verwaltung Volumen sind auch abhängig von der Route und die Art, Größe und Alter des Tieres verabreicht wird. Siehe Tabelle 1 unten, überprüfen Sie die Werte, die im Zusammenhang mit den Routen diskutiert in diesem Video. Die letzte wichtige Überlegung ist die Absorptionsrate, die erheblich variiert mit jeder Art der Verabreichung und möglicherweise eine Rolle bei der Auswahl der am besten geeigneten Methode.

nun, reden wir über die besonderen Eigenschaften der routinemäßig eingesetzten Injektionsmethoden.

SC oder SubQ Injektion stellt das Material zwischen die Hautschichten und der Muskel in einem virtuellen Raum durch Anheben der Haut geschaffen. Dies ermöglicht eine sichere Injektion von größeren Mengen, aber die Absorptionsrate ist langsamer als andere Routen, die eine länger anhaltende Wirkung. Während IP-Administration ist die Verbindung direkt in die Bauchhöhle injiziert. Dies ist eine weitere verbreitete Methode verwendet, um große Mengen von Lösung zu liefern. Obwohl eine IP-Injektion parenteraler Verabreichung gilt, ist der Absorption Mechanismus tatsächlich mehr Ähnlichkeit mit oralen Dosierung.

Eine I.M. Injektion liefert eine Verbindung direkt in den Gesäßmuskel oder der Gastrocnemius Muskel. Eine Substanz, die injizierten IM schnell wegen der reichlich vorhandenen Anzahl der Schiffe innerhalb des Muskelgewebes absorbiert wird, die es in einigen Fällen eine bevorzugte Route machen könnte. Unsachgemäße oder wiederholte Injektion in den Muskel kann Nervenschäden, was zu Lähmungen oder Muskel Nekrose verursachen. Schließlich ist eine IV-Injektion in die Vene der Schweif des Tieres die effektivste Art der Verabreichung, da die Substanz direkt in das Herz-Kreislauf-System eingeführt wird. Beachten Sie, dass die Verbindung in einer der seitlichen kaudalen Schweif Venen befindet sich auf den Seiten des Hecks injiziert werden soll. Es ist ein Schiff, die entlang der ventralen Mittellinie der Rute, die nicht für Injektion Zwecke geeignet ist.

nun, da wir den Hintergrund diskutiert haben, lernen wir die Verfahren, beginnend mit SC-Injektionen. Wählen Sie für Mäuse das Tier seinen Schwanz und lassen Sie es auf einem anderen sicheren Oberfläche, wie Draht-Bar Deckel. Dann manuell zurückhalten Sie das Tier durch Anheben der Haut um den Hals, ein Zelt bilden. Als nächstes legen Sie das Tier auf dem Tisch mit den hinteren Füßen ruht auf der Oberfläche und ruhen Sie die Ferse der Hand auf den Tisch um unnötige Gewicht auf das Tier zu vermeiden, die Atmung beeinträchtigen können.

Zu injizieren, nehmen Sie die Spritze mit der Lösung injiziert werden, und leiten Sie die Nadel Parallel zur Wirbelsäule und vom Kopf auf die Möglichkeit der Einstiche an den Schädel zu vermeiden. Fügen Sie dann die Nadel mit Fase nach oben, die für ein sanftes Gleiten in die Haut ermöglicht. Ziehen Sie den Kolben für korrekte Nadelplatzierung zu überprüfen. Gegendruck ist bei der Kolben zurück gezogen wird, dann die Nadel in die richtige Position. Wenn Luft in den Kolben gesaugt wird, müssen die Nadel neu positioniert werden.

Nach der Bestätigung, dass die Nadel richtig positioniert ist, langsam injizieren mit einer stetigen Bewegung. Pause nach der Injektion und drehen Sie die Nadel leicht unter die Haut um die Injektion-Artikel zu verhindern. Dann drücken Sie die Haut an der Injektionsstelle und ziehen Sie die Nadel heraus. Diese Methode kann in Weanling Ratten verwendet.

Für Erwachsenen Ratten, zuerst das Tier hat zurückgehalten werden mit einem Gerät, das Verfahren für die wird in "Grundlagen der Handhabung und Zurückhaltung" Video dieser Sammlung besprochen. Dann kann eine SC Injektion in gleicher Weise durchführen, wie bei Mäusen.

als Nächstes lernen wir wie eine IP-Injektion durchgeführt. Verwenden Sie bei Mäusen die zweihändige Zurückhaltung Technik um das Tier wieder in den "Grundlagen der Handhabung und Zurückhaltung" Video beschrieben manuell zurückzuhalten. Stellen Sie sicher, dass die nicht-dominanten Hand auf den Nacken, um das Tier verhindern hoch genug liegt. Die Hinterhand zu stabilisieren, indem man die Rute zwischen dem dritten und vierten Finger oder durch Festhalten der Haut fest zwischen die restlichen Finger und die Basis des Daumens.

Positionieren Sie als nächstes das Tier um seinen Bauch verfügbar zu machen. Kippen Sie das Tier mit dem Kopf nach unten in einem Winkel von 30° um den Darm zu nach vorne fallen lassen. Das Wahrzeichen der Injektion kann wie folgt umrissen werden: zeichnen Sie eine imaginäre Linie, die horizontal über den Körper, an der Spitze der Hüfte, von Flanke zu Flanke reicht. Dann ziehen Sie die mediale Grenze oder der Mittellinie entlang der Linie, wo die Haare wachsen in entgegengesetzte Richtungen trifft. Zu guter Letzt vorstellen der seitlichen Grenze, die eine Zeile von oben ist die Hüften, die Vorhaut bei Männern und im Anschluss an die Zitzen bei Frauen. Dies bietet die dreieckige Fläche für sichere IP-Injektion.

die nächste Methode, die wir besprechen ist I.M. Injektion. Zurückhaltung bei dieser Technik für Mäuse und Ratten erfordert entweder zwei Personen oder die Verwendung eines Schlauches Zurückhaltung. Hier beschreiben wir die ein-Personen-Methode unter Verwendung einer Haltevorrichtung.

Legen zunächst das Tier in der Röhre und mit den Hinterbeinen aus, ziehen Sie das Heck, das Tier zu positionieren. Als Nächstes greifen Sie die Haut der Flanke am kranialen Teil des Oberschenkelknochens zu verlängern das Bein und verhindern, dass die Knie beugen. Dann positionieren Sie die Rückhalteeinrichtung zur Visualisierung der Injektionsstelle zu ermöglichen.

Um Gesäss-Wahrzeichen identifizieren, suchen Sie die Masse in den Oberschenkelknochen hinteren Gesäßmuskel. Der Knochen kann getastet und leicht fühlte die großen Muskeln. Beachten Sie die Mittellinie, die unter dem Gesichtspunkt der Hock am Schwanz läuft. Oft kann man den Grat, wo das Haar von den seitlichen und inneren Oberflächen vereinen sich, in entgegengesetzte Richtungen wachsen. In der Regel sind Injektionen in Richtung seitlicher Aspekt aus der Mittellinie gemacht. Der Gastrocnemius ist der Wadenmuskel und Injektion in dieses Muskels ist auch am besten von der hinteren Seite durchgeführt.

Für den Gesäßmuskel im befindet sich Landmark, stechen Sie die Nadel auf eine maximale Tiefe von etwa 5 mm. vermeiden Sie Neupositionierung der Spritze während der Injektion, Schädigung der Muskulatur zu verhindern. Aspirieren Sie weiter, um sicherzustellen, dass die Platzierung in den Muskel, kein Blutgefäß. Und zu guter Letzt das Material in eine langsame und stetige Art und Weise, zu injizieren, da schnelle Injektion Gewebetrauma führen wird. Entfernen Sie die Nadel senkrecht Weise nach den gleichen Weg wie der Einfügung. Für Gastrocnemius Muskel, die Nadel zu einer maximalen Tiefe von 3 mm Einpresstiefe und durchführen die Injektion in der gleichen Weise wie für den Gesäßmuskel.

zu guter Letzt lasst uns lernen, wie eine IV-Injektion in den Schweif Venen von Nagetieren durchgeführt. Die gleiche Methode ist apbenenfalls für Mäuse und Ratten.

Legen Sie das Tier in einem zylindrischen Zurückhaltung Rohr und erwärmen den gesamten Körper des Tieres durch den Einsatz einer elektrischen Heizkissen für ca. 2-5 Minuten auf Mittel festgelegt. Weiter um das Tier zu wärmen, bis die Blutgefäße erweitert werden, die deutlich größer ist. Denken Sie daran, dass die seitlichen kaudalen Schweif Adern an den Seiten des Hecks befinden. Die Arterie, die in der ventralen Mittellinie ist eignet sich nicht für Zwecke der Injektion. Drehen Sie die Rückhalteeinrichtung und positionieren Sie das Heck so, dass die seitlichen Schweif Venen sind nach oben und unter Spannung gehalten. Gelten nicht übermäßige Spannung oder das Schiff kann gestreckt werden und die Durchblutung vermindert.

Legen Sie die Nadel Abschrägung-Up direkt distal wie möglich über das Blutgefäß und leichten Druck die Nadel in die Rute Parallel zur Wirbelsäule schieben. Injizieren Sie das Material in einer langsamen, fließenden Bewegung zu und beachten Sie, dass das Schiff blanches wie Blut durch das Injektionsmaterial herausgedrückt wird. Wenn die Nadel in das Gefäß nicht richtig positioniert ist, werden starke Widerstände beim Einspritzen, und wenn Sie mit Kraft injizieren das Material füllen den subkutanen Raum und die Rute wird mit Positionsnummern versehen. Beenden Sie sofort das Material -, das intravenös injiziert werden soll - auf das umliegende Gewebe ätzend sein mag. Ziehen Sie die Nadel heraus und versuchen Sie eine weitere Injektion mehr cranially am Heck. Nach der erfolgreichen Injektion, ziehen Sie die Nadel heraus und üben Druck auf die Injektionsstelle, gute Hämostase zu versichern, bevor er das Tier an den Käfig.

nun, da Sie gemeinsame Injektionsmethoden kennen, lassen Sie uns betrachten einige Anwendungen der diese Applikationsformen, als Drug-Delivery.

In mehreren Experimenten werden Mäuse injiziert mit einem spezifischen Erreger, Infektion zu studieren. Hier nutzten die Forscher die subkutane einzuführen Antibiotika-resistente Bakterien, die Läsionen verursacht, und die Größe dieser Läsionen diente als eine Anzeige für die Virulenz des Erregers. Verschiedene Wissenschaftler interessieren sich für die Studium Verteilung und das Überleben der Stammzellen nach systemischen Lieferung. In dieser Studie die Ermittler Schweif Vene Injektion von genetisch tagged neurale Stammzellen in einem Tiermodell der multiplen Sklerose durchgeführt und befindet sich die Verteilung der injizierten Zellen in Rückenmark und Gehirnregionen.

In einem anderen Experiment Forscher injiziert Eindringmittel getaggt Myoblasten intramuskulär in einem Tiermodell der Muskeldystrophie. Im Anschluss daran erfolgte die Biolumineszenz um erfolgreiche Implantation der Stammzellen zu analysieren. Zu guter Letzt Injektionen auch einsetzbar, Tiermodellen zu generieren. Diese Wissenschaftler durchgeführt intraperitoneale Injektion von Dimethylnitrosamine - eine starke Leber Toxin - in männliche Wistar-Ratten, einem Tiermodell der Leberfibrose, generieren, die dann verwendet werden, um die Entwicklung der Lebererkrankung untersuchen.

habe Sie nur Jupiters erste Rate auf zusammengesetzte Verwaltung diskutieren die verwendeten parenteralen Injektionen beobachtet. Denken Sie daran, die optimale Route basiert auf mehreren Faktoren, einschließlich der pH-Wert, die Volumen und die Viskosität der injizierten Lösung. Und jede Technik hat vor- und Nachteile, die in Bezug auf die experimentelle Bedürfnisse berücksichtigt werden müssen. Wie immer vielen Dank für das ansehen!

Summary

Stoff-Verwaltung ist ein üblicher Bestandteil der experimentelle Protokolle, die Tiere zu nutzen. Wenn Sie eine Route der Lieferung wählen, müssen viele Faktoren einschließlich die technische Kompetenz der Personen, die verantwortlich für die Dosierung, die Tiere, die Größe des Tieres, die Viskosität der Flüssigkeit und die Menge verabreicht werden beraten. Sorgfältige Berücksichtigung dieser Faktoren erhöhen das Wohlbefinden des Tieres und das Gesamtergebnis des Experiments.

References

  1. Turner, P.V., Pekow, C., Vasbinder, M. A. and Brabb, T. 2011. Administration of substances to laboratory animals: equipment and considerations, vehicle selection, and solution preparation. JAALAS. 50:5. 614-627.
  2. Shimizu, S. 2004. Routes of Administration in The Laboratory Mouse. Elsevier.
  3. Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. 2012. Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats. J. Vis. Exp. (67), e2771, doi:10.3791/2771
  4. Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. 2011. Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider. JAALAS. 50, 600-613

1. subkutane Injektion

  1. manuell Restrain die Maus über die einhändige Zurückhaltung halten. Einmal erfasst, ermöglichen Sie die Maus, um auf einen Tisch oder eine andere sichere Oberfläche aufliegen. Achten Sie darauf, zu vermeiden, dass Druck auf den Körper der Maus.
  2. Ruhen die Ferse der Hand auf den Tisch zu vermeiden unnötige Gewicht des Mausrads die Atmungen gefährden können. Mäuse können auch in einem kommerziellen Gerät zurückgehalten werden. Für Ratten, ist es am besten verwenden Sie eine kommerzielle Rückhalteeinrichtung.
  3. Die Haut fassen und nach oben ziehen, ein Zelt der Haut zu schaffen. Wenn eine Rückhalteeinrichtung benutzen, Zange müssen gegebenenfalls die Haut durch den Schlitz auf der Oberseite zu erfassen.
  4. Stechen Sie die Nadel parallel zur Wirbelsäule, geleitet vom Kopf an der Basis der Hautfalte des Zeltes. Lenken Sie die Nadel vom Kopf auf die Möglichkeit der Einstiche an den Schädel zu vermeiden, wie die Schädelknochen der Maus sehr dünn ist. Ratten haben die Tendenz, ihren Kopf nach hinten, die die Injektion in die Nackenmuskulatur platziert werden könnte.
  5. Setzen Sie die Nadel Abschrägung ermöglicht ein sanftes Gleiten in die Haut ein. Beachten Sie, dass die Nadel unter die Finger greifen die Haut eingeführt wird. Zur Verbesserung der Sicherheit beim Einspritzen biogefährlichen Artikel wird die Haut mit einer Pinzette, wodurch die Möglichkeit einer Nadel Stick Verletzungen ergriffen.
  6. Ziehen Sie den Kolben, um für die richtige Platzierung zu überprüfen. Wenn Luft in die Spritze gezogen wird, bedeutet dies, dass die Spitze der Nadel sich nicht unter der Haut befindet und muss zurückgezogen und neu positioniert werden. Wenn es Gegendruck, gibt wenn der Kolben zog sich zurück, es zeigt die richtige Platzierung der Nadel, die die Injektion kann fortfahren.
  7. Spritzen die Substanz langsam mit einer stetigen Bewegung. Zur Vermeidung von Verlust des Artikels Injektion anhalten nach der Injektion, leicht drehen Sie die Nadel unter die Haut und drücken Sie die Haut an der Injektionsstelle beim Zurückziehen der Nadelöhrs.

Figure 1
Abbildung 1. Subkutane Injektion in den Mäusen.

2. intraperitoneale Injektion

  1. die einhändige manuelle Zurückhaltung-Methode dient dieser Injektionstechnik bei Mäusen. Passen Sie die Hand, so dass es auf den Hals, um die Maus verhindern hoch genug positioniert.
  2. Die schlaffe Haut am Nacken des Ansatzes zwischen Daumen und Zeigefinger fassen.
  3. Stabilisieren die Hinterhand von entweder fixieren die lose Haut entlang des Rückens zwischen der zweiten, dritten und vierten Finger und die Basis des Daumens, oder indem man die Rute zwischen dem dritten und vierten Finger.
  4. Die IP-Injektion bei der Ratte sind zwei Personen, eine Ratte und andererseits die Injektion durchführen zurückhalten erforderlich.
    1. Griff die Ratte über die Schultern mit den zeige- und Mittelfinger auf jeder Seite des Halses und der Handfläche auf der Rückseite. Der Daumen und die dritten und vierten Finger sollte die Truhe, um vorwärts oder rückwärts Bewegung verhindern umschließen. Die Position der Finger auf jeder Seite des Halses verhindert, dass die Ratte den Kopf drehen.
    2. Die Ratte anheben und drehen, damit sich die ventralen Bauch.
    3. Der Hinterhand durch fassen die Füße und die Rute sicher und erweitern sie vom Körper Weg zu stabilisieren.
  5. Positionieren Sie die Maus oder Ratte aussetzen den Bauch, um sicherzustellen, dass es nach oben blickt.
  6. Kippen Sie das Tier mit dem Kopf nach unten auf ca. 30°-Winkel, um den Darm zu nach vorne fallen lassen.
  7. Injektion Wahrzeichen sind wie folgt:
    1. Bereich injiziert werden, grenzt an eine imaginäre Linie erstreckt sich horizontal über den Körper an der Spitze der Hüfte (von Flanke zu Flanke) cranially.
    2. Ist die Mittellinie der medialen Rand, als Haare wachsen in entgegengesetzte Richtungen trifft. In haarlose Tiere die Mittellinie erstreckt sich in einer geraden Linie von der Xiphoid bis zum Anus.
    3. Der seitlichen Rahmen ist eine Linie von oben von der Hüfte bis die Vorhaut des Mannes und von der Oberseite der Hüfte und im Anschluss an die Zitzen in das Weibchen.
    4. Dadurch eine dreieckige Fläche für sicheren Injektion.
  8. Injektion eines Artikels innerhalb der Wahrzeichen
    1. Nadel senkrecht zur Wirbelsäule, ab der Mittellinie im Dreieck wie oben beschrieben. Platzieren die Nadel in einem 90° Winkel zur Ebene des Körpers ermöglicht eine sichere Injektion unter Verwendung beider Seiten des Bauches. Dies ist besonders wichtig bei mehreren Injektionen, wie es Gewebetrauma minimiert, indem es ermöglicht Wechsel der Injektionsstellen.
    2. , Wenn die Nadel in einem Winkel von 90° gesetzt ist, wird es " Pop-" in die Bauchhöhle, zulassend einfacher Bestimmung der Tiefe. Dies ist auch ein optisches und haptisches Stichwort, dass die Nadel richtig positioniert ist.
    3. Aspirieren Sie die Spritze um Platzierung innerhalb der Bauchhöhle und nicht innerhalb der Harnblase, Darm oder vaskulären Strukturen gewährleisten.
    4. Vermeiden Sie injizieren kaudal in der männlichen Maus um zu verhindern, Verwaltung des Artikels in das Skrotum Sac. Vermeiden Sie Einspritzen in die Zitzen des Weibchens, Trauma zu verhindern.

Figure 2
Abbildung 2. Wahrzeichen für intraperitoneale Injektion bei Mäusen.

3. intramuskuläre Injektion

  1. Zurückhaltung für diese Technik für Mäuse und Ratten erfordert entweder zwei Personen oder die Verwendung eines Schlauches Zurückhaltung. Hier beschriebenen nutzt eine ein-Mann-Methode eine Haltevorrichtung.
    1. Legen Sie das Tier in der Rückhalteeinrichtung.
    2. Sobald das Tier in der Röhre ist, fassen Sie das Heck um das Tier mit den Hinterbeinen aus der Tube zu positionieren.
    3. Greifen die Haut der Flanke am kranialen Teil des Oberschenkelknochens verlängern das Bein und verhindern, dass die Knie biegen.
    4. Die Rückhalteeinrichtung so positionieren, dass es auf dem Tisch mit dem Tier steht ' s Kopf spitz nach unten, oder auf dem Tisch liegen deutete auf den Körper des Technikers zur Stabilisierung des Gerätes zu ermöglichen, während die Injektion durchgeführt wird.
    5. Injektion Sehenswürdigkeiten sind wie folgt: die Maus und Ratte Bein sind klein und die Gesäßmuskulatur (der kaudalen Oberschenkelmuskulatur) bestehend aus der größten Muskelmasse in den hinteren Gliedmaßen; die zweitgrößte Muskelmasse in den hinteren Gliedmaßen ist der Gastrocnemius (Wadenmuskel). Die Injektion erfolgt aus der kaudalen Aspekt des Beines.
      1. Locate die gluteal Muskeln Masse posterior in den Oberschenkelknochen. Die Knochen palpiert werden kann und leicht fühlte die große Muskeln.
      2. Beachten Sie, dass die Mittellinie des Beines von der hinteren Seite unter dem Gesichtspunkt der Hock am Schwanz läuft. Das Haar hat oft einen Kamm, woher es kommt, wie es in entgegengesetzte Richtungen von den seitlichen und inneren Oberflächen wächst.
      3. Injektionen erfolgen auf der lateralen Seite des Oberschenkels ab der Mittellinie. Dies verringert die Wahrscheinlichkeit einer Beschädigung der Nerven und Blutgefäße befindet sich auf der medialen Fläche der Leg
      4. Injektionen in den Gastrocnemius gemacht werden durchgeführt von der hinteren Seite und mit sorgfältiger Prüfung des Standortes der seitlichen Stammvenen.
    6. Injektion eines Artikels innerhalb der Wahrzeichen
      1. stechen Sie die Nadel senkrecht in den Oberschenkelknochen aus der Mittellinie, wie oben beschrieben, auf eine maximale Tiefe von 5 mm für den Gesäßmuskel und ein Maximum von 3 mm für die Gastrocnemius.
      2. , Trauma auf den Muskel, überflüssige Bewegung der Nadel in das Gewebe zu vermeiden muss verhindert werden. Die Spritze sollte gehalten werden, in einer Weise, die nicht Neuausrichtung der Hand erfordert, um die Injektion durchführen.
      3. Aspirieren Sie die Spritze um Platzierung innerhalb des Muskels und nicht in ein Blutgefäß zu gewährleisten.
      4. Injizieren Sie das Material in einer stetigen, fließenden Bewegung. Nicht injizieren Sie, schnell langsame Erweiterung des Muskels zu ermöglichen. Schnelle Injektion verursacht Gewebetrauma.

Figure 3
Abbildung 3. Intramuskuläre Injektion in den Gesäßmuskel in Ratten.

4. intravenöse Injektion, die unter Verwendung der Rute Ader

  1. Zurückhaltung des Tieres ist abhängig, ob das Tier betäubt ist oder wach.
    1. Verwendung einer zylindrischen Zurückhaltung Röhre für bewusste Mäusen oder Ratten, mit Ausnahme der haarlosen oder nackt Tiere. Aufgrund der öligen Beschaffenheit der haarlose Tiere ist es schwierig zu positionieren und entfernen sie aus dem Acryl Wachstumsbefürworter, wie ihre Haut zur Einhaltung des starren Kunststoffs neigt. So ein flexiblen Kunststoff Kegel verwendet.
    2. Andere Injektionsgeräten gehören beleuchtete Plattformen, beheizten Plattformen und starre Kunststoff Kegel, wo die Maus ist in der Kegel streng mit Spannung auf das Heck gehalten.
    3. Anesthetized Mäuse benötigen keinen Zurückhaltung.
    4. Wärmen den ganzen Körper oder nur die Rute zu Vasodilatation der Schweif Schiffe zu gewährleisten.
      1. Den ganzen Körper mit einer elektrischen Heizkissen gesetzt auf Medium oder eine zirkulierende Wasser Decke warm.
      2. Legen Sie das Tier in der Rückhalteeinrichtung, eingehüllt in die Wärmequelle.
      3. Das Tier genau beobachten, und von der Wärmequelle zu entfernen, sobald die Blutgefäße erweitern. Ganzkörper-Erwärmung kann auch mit der Verwendung einer Wärmelampe in einen Käfig geleitet erreicht werden. Bei Verwendung eine Wärmelampe die Tiere genau eingehalten werden, da es einfach sie zu überhitzen.
      4. Bei Erwärmung des ganzen Körpers nicht machbar, heizen die Rute allein kann erreicht werden, mit Hilfe von einem beheizten Handtuch, Wärmflasche, warme Kompressen oder das Heck ins warme Wasser eintauchen. Vorsicht muss eingesetzt werden, um nicht zu verbrennen das Heck, weil Wärmflaschen vorgewärmte Handtücher und Warmwasser Temperaturregler nicht verfügen. Es ist üblich für die Wärmequellen, zunächst überhitzt werden. Diese Wärmequellen auch abkühlen schnell.
    5. Die Verwendung von Gewebe-Öl ist eine weitere Möglichkeit, die Visualisierung der Schiffe zu verbessern.
      1. Dip einen Baumwolle-gespitzten Applikator in das Gewebe-Öl, und gelten die Ölquelle entfernt den Teil des Hecks, die zur Stabilisierung Griff ist. Das Gewebe Öl bewirkt, dass die Schiffe, die mehr klar definierten erscheinen.
      2. Es sind ungiftig Öle im Handel erhältlich, die eine Chemikalie in der Formulierung enthalten, die Erwärmung der Haut und Vasodilatation mit Verdunstung erzeugt. Diese Öle werden angewendet, und nach wenigen Augenblicken, wenn die Gefäße sichtbar sind, wird das überschüssige Öl mit einem Wattebausch entfernt abgewischt.
      3. Alle Öle können erschweren die Rute halten.
      4. Bei der Verwendung von Ölen die Injektion erfolgen muss sofort bei der Visualisierung der Schiffe.
    6. Injektion Wahrzeichen sind wie folgt:
      1. die seitlichen Schweif Venen befinden sich auf den Seiten des Hecks. Es gibt auch Schiffe, die entlang der dorsalen und ventralen Mittellinien der Rute, die nicht für Injektion Zwecke geeignet sind.
      2. Das Tier in die Restrainer kann gedreht werden, so dass die seitlichen Schiffe für eine einfache Injektion gerichtet sind. Alternativ ist die Rute drehbar, um die Schiffe in ein akzeptabler Injektionslösung bringen.
      3. Sind die Schiffe sehr oberflächlich. Sie werden mehr oberflächlich, wie sie die Schwanzwurzel erreichen.
    7. Injektion eines Artikels in die Rute Vene erfordert Geschick. Zur Vermeidung von Verletzungen der Blutgefäße muss überflüssige Bewegung der Nadel verhindert werden. Die Spritze wird in einer Art und Weise gehalten, die nicht Neuausrichtung der Hand erfordert, um die Injektion durchführen.
      1. Die Rute so positionieren, dass das Schiff sichtbar und unter Spannung gehalten wird. Gelten nicht übermäßige Spannung am Schwanz oder das Schiff kann gestreckt werden und die Durchblutung vermindert.
      2. Die Nadel direkt über das Schiff soweit distal wie möglich platzieren.
      3. Leichten Druck ausüben und schieben Sie die Nadel in die Rute Parallel zu den Wirbeln. Vermeiden Sie Angeln die Nadel nach unten die Nadel wird das Schiff Transekt. Die Nadel in das Gefäß sichtbar sein soll, da es mindestens 2 mm in das Lumen weit fortgeschritten ist.
      4. Injizieren, das Material in einer langsamen, fließenden Bewegung, Bruch des Schiffes zu vermeiden.
      5. Besonderes Augenmerk auf die Rute beim Einspritzen. Wenn das Schiff richtig eingesteckt, ist das Injektionsmaterial fließt in das Gefäß mit keinen Widerstand spüren. Das Blutgefäß blanchieren sollte, wie das Blut durch das Injektionsmaterial herausgedrückt wird.
      6. Wenn die Nadel nicht in das Schiff, es wird stark sein Widerstand beim Einspritzen. Wenn mit Kraft zu injizieren, wird das Material den subkutanen Raum füllen und die Rute wird mit Positionsnummern versehen. Beenden Sie sofort, wie Material intravenös injiziert werden soll auf das umliegende Gewebe ätzend sein kann. Ziehen Sie die Nadel heraus und versuchen Sie eine weitere Injektion mehr cranially auf dem Tail.
      7. Nach der erfolgreichen Injektion, ziehen Sie die Nadel heraus und üben Druck auf die Injektionsstelle, gute Hämostase zu versichern, bevor er das Tier an den Käfig.

Figure 4
Abbildung 4. Vene Injektion bei Mäusen Tail.

zusammengesetzte Verwaltung ist oft Bestandteil einer Tierstudie, und viele Faktoren müssen bewertet werden, um sicherzustellen, dass die Verbindung korrekt und auf humane Weise geliefert wird. Die zwei wichtigsten Verwaltung Routen sind enteral-über den Verdauungstrakt und parenterale-außerhalb des Verdauungstraktes. Der Hauptunterschied ist, wird die Verbindung über die enterale Route angegeben hepatischen Metabolismus vor dem Eintritt in die Blutbahn erfährt. In der Erwägung, dass die Substanz über eine parenterale Route wie intravenöse oder intramuskuläre, diesem ersten Durchgang durch die Leber, wodurch in der Regel eine höhere Bioverfügbarkeit überspringt.

In diesem ersten Video der Serie auf zusammengesetzte Verwaltung, beginnen wir die Faktoren, die die Wahl der Art der Verabreichung im Allgemeinen zu diskutieren. Und dann werden wir die häufigsten parenteralen Injektionen, die Methoden, einschließlich subkutane SC oder SubQ, intraperitoneal oder IP, intramuskuläre oder IM und intravenöse AKA IV abgekürzt überprüfen.

lassen Sie uns zunächst ein paar Dinge, die man bedenken sollte vor jeder Art von zusammengesetzten Verwaltungsverfahren Vorformen. Der erste Schritt ist, bereiten Sie die Lösung oder Suspension injiziert werden, und die erste grundlegende Überlegung Vorbereitung Substanz ist Sterilität. Um zu verhindern führt man Erreger in das Tier, es ist wichtig, dass das Injektionsmaterial sowie die Nadeln und Spritzen zu verwendenden steril sind.

Die zweite Überlegung ist physiologische Verträglichkeitkeit. Eine Dosierung Lösung muss ob enteral oder parenteral, verabreicht physiologisch zu geeigneten pH-Wert für die Verbindung richtig absorbiert werden und zu Gewebeschäden zu vermeiden, gepuffert werden. Der dritte Faktor ist die Viskosität der Injektion-Artikels, der in Nadelauswahl eine entscheidende Rolle spielt. In der Regel 20 bis 30 g-Nadeln in parenteralen Verwaltungsverfahren für Mäuse und Ratten eingesetzt. Die Naben der diese Nadeln sind in der Regel farbkodiert zur leichteren Identifizierung.

Sollte die Lösung ausreichend Flüssigkeit mindestens eines dieser Nadeln durchlaufen haben. Wenn die Lösung durch mehrere passieren kann, dann ist die Wahl in der Regel die kleinste Spurweite machbar. Der nächste Faktor ist Verwaltung Volumen, dass Affekte Auswahl Spritze. Ähnlich wie Nadeln, die kleinste mögliche Spritze benötigt für die genaue Dosierung mit richtigen Promotionen, gewählt werden. Die Nadelstärke und die Verwaltung Volumen sind auch abhängig von der Route und die Art, Größe und Alter des Tieres verabreicht wird. Siehe Tabelle 1 unten, überprüfen Sie die Werte, die im Zusammenhang mit den Routen diskutiert in diesem Video. Die letzte wichtige Überlegung ist die Absorptionsrate, die erheblich variiert mit jeder Art der Verabreichung und möglicherweise eine Rolle bei der Auswahl der am besten geeigneten Methode.

nun, reden wir über die besonderen Eigenschaften der routinemäßig eingesetzten Injektionsmethoden.

SC oder SubQ Injektion stellt das Material zwischen die Hautschichten und der Muskel in einem virtuellen Raum durch Anheben der Haut geschaffen. Dies ermöglicht eine sichere Injektion von größeren Mengen, aber die Absorptionsrate ist langsamer als andere Routen, die eine länger anhaltende Wirkung. Während IP-Administration ist die Verbindung direkt in die Bauchhöhle injiziert. Dies ist eine weitere verbreitete Methode verwendet, um große Mengen von Lösung zu liefern. Obwohl eine IP-Injektion parenteraler Verabreichung gilt, ist der Absorption Mechanismus tatsächlich mehr Ähnlichkeit mit oralen Dosierung.

Eine I.M. Injektion liefert eine Verbindung direkt in den Gesäßmuskel oder der Gastrocnemius Muskel. Eine Substanz, die injizierten IM schnell wegen der reichlich vorhandenen Anzahl der Schiffe innerhalb des Muskelgewebes absorbiert wird, die es in einigen Fällen eine bevorzugte Route machen könnte. Unsachgemäße oder wiederholte Injektion in den Muskel kann Nervenschäden, was zu Lähmungen oder Muskel Nekrose verursachen. Schließlich ist eine IV-Injektion in die Vene der Schweif des Tieres die effektivste Art der Verabreichung, da die Substanz direkt in das Herz-Kreislauf-System eingeführt wird. Beachten Sie, dass die Verbindung in einer der seitlichen kaudalen Schweif Venen befindet sich auf den Seiten des Hecks injiziert werden soll. Es ist ein Schiff, die entlang der ventralen Mittellinie der Rute, die nicht für Injektion Zwecke geeignet ist.

nun, da wir den Hintergrund diskutiert haben, lernen wir die Verfahren, beginnend mit SC-Injektionen. Wählen Sie für Mäuse das Tier seinen Schwanz und lassen Sie es auf einem anderen sicheren Oberfläche, wie Draht-Bar Deckel. Dann manuell zurückhalten Sie das Tier durch Anheben der Haut um den Hals, ein Zelt bilden. Als nächstes legen Sie das Tier auf dem Tisch mit den hinteren Füßen ruht auf der Oberfläche und ruhen Sie die Ferse der Hand auf den Tisch um unnötige Gewicht auf das Tier zu vermeiden, die Atmung beeinträchtigen können.

Zu injizieren, nehmen Sie die Spritze mit der Lösung injiziert werden, und leiten Sie die Nadel Parallel zur Wirbelsäule und vom Kopf auf die Möglichkeit der Einstiche an den Schädel zu vermeiden. Fügen Sie dann die Nadel mit Fase nach oben, die für ein sanftes Gleiten in die Haut ermöglicht. Ziehen Sie den Kolben für korrekte Nadelplatzierung zu überprüfen. Gegendruck ist bei der Kolben zurück gezogen wird, dann die Nadel in die richtige Position. Wenn Luft in den Kolben gesaugt wird, müssen die Nadel neu positioniert werden.

Nach der Bestätigung, dass die Nadel richtig positioniert ist, langsam injizieren mit einer stetigen Bewegung. Pause nach der Injektion und drehen Sie die Nadel leicht unter die Haut um die Injektion-Artikel zu verhindern. Dann drücken Sie die Haut an der Injektionsstelle und ziehen Sie die Nadel heraus. Diese Methode kann in Weanling Ratten verwendet.

Für Erwachsenen Ratten, zuerst das Tier hat zurückgehalten werden mit einem Gerät, das Verfahren für die wird in "Grundlagen der Handhabung und Zurückhaltung" Video dieser Sammlung besprochen. Dann kann eine SC Injektion in gleicher Weise durchführen, wie bei Mäusen.

als Nächstes lernen wir wie eine IP-Injektion durchgeführt. Verwenden Sie bei Mäusen die zweihändige Zurückhaltung Technik um das Tier wieder in den "Grundlagen der Handhabung und Zurückhaltung" Video beschrieben manuell zurückzuhalten. Stellen Sie sicher, dass die nicht-dominanten Hand auf den Nacken, um das Tier verhindern hoch genug liegt. Die Hinterhand zu stabilisieren, indem man die Rute zwischen dem dritten und vierten Finger oder durch Festhalten der Haut fest zwischen die restlichen Finger und die Basis des Daumens.

Positionieren Sie als nächstes das Tier um seinen Bauch verfügbar zu machen. Kippen Sie das Tier mit dem Kopf nach unten in einem Winkel von 30° um den Darm zu nach vorne fallen lassen. Das Wahrzeichen der Injektion kann wie folgt umrissen werden: zeichnen Sie eine imaginäre Linie, die horizontal über den Körper, an der Spitze der Hüfte, von Flanke zu Flanke reicht. Dann ziehen Sie die mediale Grenze oder der Mittellinie entlang der Linie, wo die Haare wachsen in entgegengesetzte Richtungen trifft. Zu guter Letzt vorstellen der seitlichen Grenze, die eine Zeile von oben ist die Hüften, die Vorhaut bei Männern und im Anschluss an die Zitzen bei Frauen. Dies bietet die dreieckige Fläche für sichere IP-Injektion.

die nächste Methode, die wir besprechen ist I.M. Injektion. Zurückhaltung bei dieser Technik für Mäuse und Ratten erfordert entweder zwei Personen oder die Verwendung eines Schlauches Zurückhaltung. Hier beschreiben wir die ein-Personen-Methode unter Verwendung einer Haltevorrichtung.

Legen zunächst das Tier in der Röhre und mit den Hinterbeinen aus, ziehen Sie das Heck, das Tier zu positionieren. Als Nächstes greifen Sie die Haut der Flanke am kranialen Teil des Oberschenkelknochens zu verlängern das Bein und verhindern, dass die Knie beugen. Dann positionieren Sie die Rückhalteeinrichtung zur Visualisierung der Injektionsstelle zu ermöglichen.

Um Gesäss-Wahrzeichen identifizieren, suchen Sie die Masse in den Oberschenkelknochen hinteren Gesäßmuskel. Der Knochen kann getastet und leicht fühlte die großen Muskeln. Beachten Sie die Mittellinie, die unter dem Gesichtspunkt der Hock am Schwanz läuft. Oft kann man den Grat, wo das Haar von den seitlichen und inneren Oberflächen vereinen sich, in entgegengesetzte Richtungen wachsen. In der Regel sind Injektionen in Richtung seitlicher Aspekt aus der Mittellinie gemacht. Der Gastrocnemius ist der Wadenmuskel und Injektion in dieses Muskels ist auch am besten von der hinteren Seite durchgeführt.

Für den Gesäßmuskel im befindet sich Landmark, stechen Sie die Nadel auf eine maximale Tiefe von etwa 5 mm. vermeiden Sie Neupositionierung der Spritze während der Injektion, Schädigung der Muskulatur zu verhindern. Aspirieren Sie weiter, um sicherzustellen, dass die Platzierung in den Muskel, kein Blutgefäß. Und zu guter Letzt das Material in eine langsame und stetige Art und Weise, zu injizieren, da schnelle Injektion Gewebetrauma führen wird. Entfernen Sie die Nadel senkrecht Weise nach den gleichen Weg wie der Einfügung. Für Gastrocnemius Muskel, die Nadel zu einer maximalen Tiefe von 3 mm Einpresstiefe und durchführen die Injektion in der gleichen Weise wie für den Gesäßmuskel.

zu guter Letzt lasst uns lernen, wie eine IV-Injektion in den Schweif Venen von Nagetieren durchgeführt. Die gleiche Methode ist apbenenfalls für Mäuse und Ratten.

Legen Sie das Tier in einem zylindrischen Zurückhaltung Rohr und erwärmen den gesamten Körper des Tieres durch den Einsatz einer elektrischen Heizkissen für ca. 2-5 Minuten auf Mittel festgelegt. Weiter um das Tier zu wärmen, bis die Blutgefäße erweitert werden, die deutlich größer ist. Denken Sie daran, dass die seitlichen kaudalen Schweif Adern an den Seiten des Hecks befinden. Die Arterie, die in der ventralen Mittellinie ist eignet sich nicht für Zwecke der Injektion. Drehen Sie die Rückhalteeinrichtung und positionieren Sie das Heck so, dass die seitlichen Schweif Venen sind nach oben und unter Spannung gehalten. Gelten nicht übermäßige Spannung oder das Schiff kann gestreckt werden und die Durchblutung vermindert.

Legen Sie die Nadel Abschrägung-Up direkt distal wie möglich über das Blutgefäß und leichten Druck die Nadel in die Rute Parallel zur Wirbelsäule schieben. Injizieren Sie das Material in einer langsamen, fließenden Bewegung zu und beachten Sie, dass das Schiff blanches wie Blut durch das Injektionsmaterial herausgedrückt wird. Wenn die Nadel in das Gefäß nicht richtig positioniert ist, werden starke Widerstände beim Einspritzen, und wenn Sie mit Kraft injizieren das Material füllen den subkutanen Raum und die Rute wird mit Positionsnummern versehen. Beenden Sie sofort das Material -, das intravenös injiziert werden soll - auf das umliegende Gewebe ätzend sein mag. Ziehen Sie die Nadel heraus und versuchen Sie eine weitere Injektion mehr cranially am Heck. Nach der erfolgreichen Injektion, ziehen Sie die Nadel heraus und üben Druck auf die Injektionsstelle, gute Hämostase zu versichern, bevor er das Tier an den Käfig.

nun, da Sie gemeinsame Injektionsmethoden kennen, lassen Sie uns betrachten einige Anwendungen der diese Applikationsformen, als Drug-Delivery.

In mehreren Experimenten werden Mäuse injiziert mit einem spezifischen Erreger, Infektion zu studieren. Hier nutzten die Forscher die subkutane einzuführen Antibiotika-resistente Bakterien, die Läsionen verursacht, und die Größe dieser Läsionen diente als eine Anzeige für die Virulenz des Erregers. Verschiedene Wissenschaftler interessieren sich für die Studium Verteilung und das Überleben der Stammzellen nach systemischen Lieferung. In dieser Studie die Ermittler Schweif Vene Injektion von genetisch tagged neurale Stammzellen in einem Tiermodell der multiplen Sklerose durchgeführt und befindet sich die Verteilung der injizierten Zellen in Rückenmark und Gehirnregionen.

In einem anderen Experiment Forscher injiziert Eindringmittel getaggt Myoblasten intramuskulär in einem Tiermodell der Muskeldystrophie. Im Anschluss daran erfolgte die Biolumineszenz um erfolgreiche Implantation der Stammzellen zu analysieren. Zu guter Letzt Injektionen auch einsetzbar, Tiermodellen zu generieren. Diese Wissenschaftler durchgeführt intraperitoneale Injektion von Dimethylnitrosamine - eine starke Leber Toxin - in männliche Wistar-Ratten, einem Tiermodell der Leberfibrose, generieren, die dann verwendet werden, um die Entwicklung der Lebererkrankung untersuchen.

habe Sie nur Jupiters erste Rate auf zusammengesetzte Verwaltung diskutieren die verwendeten parenteralen Injektionen beobachtet. Denken Sie daran, die optimale Route basiert auf mehreren Faktoren, einschließlich der pH-Wert, die Volumen und die Viskosität der injizierten Lösung. Und jede Technik hat vor- und Nachteile, die in Bezug auf die experimentelle Bedürfnisse berücksichtigt werden müssen. Wie immer vielen Dank für das ansehen!

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