复合管理 (2)

Lab Animal Research

Your institution must subscribe to JoVE's Basic Biology collection to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Overview

来源: 凯斯图尔特, RVT, RLATG, CMAR;瓦莱丽. 施罗德, RVT, RLATG。圣母大学

复合管理通常是动物研究的一个不可分割的组成部分。需要对许多因素进行评估, 以确保该化合物正确交付。行政路径影响着吸收机制。要引入的物质的特性 (pH 值、粘度和浓度) 可以决定选择哪种管理途径. 12, 3

Cite this Video

JoVE Science Education Database. 实验动物研究精要. 复合管理 (2). JoVE, Cambridge, MA, (2018).

Principles

两个主要的管理路线是肠内 (通过消化道) 和肠外 (管理外消化道)。行政路线的选择主要取决于研究的要求。胃肠外用药的主要优点是该化合物不受肝代谢的影响, 从而提高了生物利用度。然而, 有许多实验的协议, 要求这些化合物的口服, 以更好地模仿自然摄入的物质。最佳的使用路线是由测试化合物的性质决定的。

口服剂量是人类最常用的药物管理方法。这是通过药片, 胶囊, 或液体形式的药物。片剂和胶囊的管理是不切实际的啮齿类动物, 因此普通的口服剂量的小鼠和大鼠是通过溶解化合物在饮用水中, 使用专门的食物, 把测试化合物纳入公式, 或通过放置化合物在款待。当通过饮用水加药量时, 蔗糖经常添加到水中以提高适口。然而, 它应该是精细平衡的, 以鼓励正常的饮水摄入, 而不是过量饮用, 因为糖的味道。

许多研究表明, 反复口服胃对小鼠和大鼠都有压力.45同时也是对动物护理人员的劳动密集型。有商业化的饲料, 有通常剂量的化合物, 如唑, 这是用来消除寄生虫的啮齿动物-纳入到它。其他公司提供含有消炎、止痛药、antiparasitics 或抗生素的药物治疗。饲料公司生产的小鼠和老鼠的配方食品将创建专门的测试饮食, 以满足实验要求。许多实验室用蜂蜜、花生酱或水果味的明胶来配制自己的治疗。45

口服剂量缺乏精确度, 因为化合物的摄入量取决于食物或水的接受程度、化合物的稳定性以及笼中存在的动物数量。然而, 如果精确的剂量不是实验的关键, 这种无创方法的剂量是最好的动物的福祉。

口服胃是一种更精确的肠内剂量方法, 因为它允许在特定的时间和指定的体积将化合物直接沉积到动物的胃中。但是, 必须进行培训以确保成功。适当地克制动物对这项技术的成功至关重要。口腔、咽、喉、气管、食道和胃部的损伤可能是由于头部和身体的定位不当造成的。动物必须紧紧地抓住, 这样头部无法扭转, 以防止这种伤害。

剂量针可重复使用或一次性使用的格式。虽然昂贵, 使用一次性针头消除了交叉污染的威胁时, 剂量多动物。有几个大小的胃针, 从20-22 计的小鼠和18-20 计的大鼠。针的选择取决于动物的大小, 液体的体积, 和要管理的溶液的粘度。

口服 gavaging 应在有意识的动物身上进行, 以减少将针头放入气管的可能性。有意识的动物会保留吞咽反射和呕吐反射, 促进适当的放置到食道。研究表明, 预的胃针与蔗糖诱导吞咽反射, 减少了需要的时间, 通过针进入食道。6 

直接放在皮肤表面的外用剂通常只会影响其应用的区域。这些可以是奶油, 乳液, 软膏, 泡沫, 或凝胶。由于动物会倾向于在使用该制剂的地区进行饲养, 因此必须考虑口服食用的毒性。

局部的化合物被公式化被吸收通过真皮层数和皮下空间通过毛囊和附属的腺体。影响化合物吸收的因素包括皮肤的状况、使用的表面积、物质的浓度、化合物的脂溶性以及与皮肤表面接触的时间长短。良好的水合和薄的皮肤层将减少吸收时间。

当在局部应用一种物质时, 由于动物对该区域的梳理, 有可能进行全身吸收。应采取预防措施, 避免意外摄入或及早清除该物质。小衣领或盾牌可以防止动物到达受影响的身体部位。个人住房也可能需要防止 allogrooming 的笼友。

Procedure

1. 专题应用

  1. 在涂抹任何软膏和药膏之前, 通过使用脱毛奶油或剃须, 将所有皮毛从该区域移走。
  2. 彻底清洁和干燥的皮肤。
  3. 将该物质直接涂抹在皮肤上, 用棉签或直接放置的下落, 以避免技术员的接触。
  4. 为了取得最佳效果, 应用几层薄薄的药膏或奶油, 而不是一层厚的一次性应用。
  5. 用分离的头发涂抹液体, 并在裸露的皮肤上涂抹一滴。
  6. 当在局部应用一种物质时, 由于动物对该区域的梳理, 有可能全身吸收。应采取预防措施, 避免意外摄入或及早清除该物质。小衣领或盾牌可以防止动物到达受影响的身体部位。个人住房也可能需要防止 allogrooming 的笼友。

Figure 1
图1。局部应用于小鼠。

2. 口服剂量

  1. 当通过饲料或水向动物提供化合物时, 必须计算出基于体重的最小日剂量。在实验中使用的老鼠或老鼠的平均重量可以用来做计算, 除非它指定每只动物被称重和药量为每个个体。
  2. 对于需要精确测量食物和/或水摄入的协议, 动物需要单独安置。
  3. 专门的饲料或治疗可以制造, 以满足实验需要。
    1. 用特制的食谱代替标准的饮食, 这可以让动物在一天内摄取这种化合物。
    2. 由于复合不稳定, 食品可能需要比标准食品更频繁地更换。
  4. 物质也可以通过溶解在饮用水中来管理, 允许动物在一天内接受一种化合物
    1. 在水中加入少量的糖使它可口。确切的增加量是由老鼠接受水所决定的。尽量使用最小的增量。
    2. 改变水的频率取决于化合物的稳定性。有些物质可能会随着时间的推移而感光或沉淀。

3. 胃程序

20-25 口径 x 1.5 在直或弯曲剂量针用于小鼠。对于大鼠, 18-20 口径 x 2-3 在直或弯曲剂量针使用。这些可用作可重复使用的不锈钢针或一次性针头。一次性针头可以有一个金属或柔性塑料轴与硅胶尖端。

  1. 根据测试溶液的体积和粘度, 将加药针连接到所选的注射器上。对于加浓液体, 口锁注射器是首选。这些通常可以从 3 cc 大小开始, 有100µl 毕业。这可能不适合较小的体积或当需要精确剂量体积较小的增量。
  2. 将注射器贴在针头上, 这样, 枪管上的刻度就可以在不转动针头的情况下读取。一旦针被放置到食道, 任何旋转都能使食道破裂, 导致动物死亡。
  3. 填装注射器与将被管理的文章的适当的容量 (优选的容量 = 5 毫升/公斤和最大容量 = 20 毫升/千克)4
  4. 适当的克制对这个过程是必要的。7
    1. 通过抓住头部底部的皮肤并 scruffing 它们来手动抑制小鼠。重要的是, 身体保持这样, 它被悬挂在一条直线从头部到尾部。任何扭曲的身体将阻碍胃针放置在食道。
    2. 紧紧抓住颈背, 使头部有最小的侧向运动。后躯必须稳定, 以防止身体旋转。
    3. gavaging 一只老鼠, 用食指和中指放在肩上, 在动物背上用手掌抓住它。拇指, 第三, 和第四手指应包围胸部, 以防止动物能够向前或向后移动。手指在颈部两侧的位置可以防止老鼠转动头部。
    4. 重要的是, 身体是在一条直线, 而不是扭曲, 以协助放置的胃针不损害口腔, 咽, 食道, 或胃。
    5. 确保头部没有多余的侧向运动。
    6. 后躯可稳定以防止身体旋转。这是通过允许后面的脚在计数器或保持架顶部休息来完成的。
  5. 物质的管理
    1. 定位针与曲线的向下和内联与自然曲线的颈部。将针头从右侧或左侧引入口腔, 在门牙和臼齿之间以一个角度向咽背部。
    2. 一旦针头在口腔内, 用胃针将头部向后倾斜, 直到鼻子指向。这在使用直针时尤其重要。针应该容易地滑入食道。不要用力把针放下。如果有任何阻力的感觉, 背部的针头, 并再次尝试。
    3. 一旦针在胃的位置, 轻轻地存放化合物。
    4. 取下针, 确保没有弯曲的针的旋转发生。
    5. 如果动物开始挣扎, 取出剂量针, 并更安全地抑制动物。
    6. 当执行过程中, 如果动物显示青紫或呼吸窘迫的征兆, 或者, 如果有解答从它的嘴流动, 药量针应该立刻被去除, 并且动物被释放入它的笼子。
    7. 一般而言, 当 gavaging 鼠和小鼠, 尤其是有腐蚀性的物质时, 推荐的做法是在给出整个体积之前, 最初提供少量的 (用于咳嗽的测试)。这样, 如果针头不正确定位, 传递到肺部的体积小, 动物有更好的恢复机会。

Figure 2
图2。口服胃小鼠 (左) 和大鼠 (右)。

许多实验要求一种化合物通过口服或局部的途径被管理成动物, 这样该方法就能更好地模仿实验物质的自然摄取。

为口服剂量, 该化合物可溶入饮用水或纳入动物食用的食物。另一种更精确的口服剂量方法是口服胃, 用大针将化合物直接放入胃中。另一方面, 外用剂可以直接放在皮肤表面上, 并且通常只影响它的应用范围。这些策略都有优势和局限性, 我们将在本视频中讨论。接下来, 我们将演示如何在实验室动物中执行这些复合管理技术, 以及它们的一些应用。

在钻研协议之前, 让我们回顾一下这些技术的考虑、好处和缺点。口服药片、胶囊或液体是人类最常用的药物管理方法。然而, 片剂和胶囊是不切实际的啮齿类动物, 所以普通口服剂量是通过溶解在饮用水或食物中的化合物。

当通过饮用水加药量时, 蔗糖经常添加到水中以提高适口。然而, 它应该是精细平衡的, 以鼓励正常的饮水摄入, 而不是过量饮用, 因为糖的味道。一个好的规则是从10% 蔗糖溶液开始, 然后根据摄入量调整。另一种口服剂量的动物是通过专门的食物。市面上有可供使用的饲料, 有常用的化合物, 如唑, 加入其中。啮齿类饲料公司还可以创建专门的测试食谱, 以满足实验要求。

这种口服剂量的优点是, 它是无创的, 连续管理化合物, 模仿人类口服药物。然而, 它缺乏精确度, 因为复合摄入量取决于食物或水的接受程度、化合物的稳定性以及笼中存在的动物数量。如果精确的剂量对实验是不重要的, 这种非侵入性的方法是最好的动物的好。

为了更精确的口服, 你可以使用口服胃, 它在特定的时间和指定的体积内直接将化合物存入胃中。然而, 需要进行适当的训练来执行这项技术, 因为如果它们没有受到适当的限制, 就会发生严重的动物损伤。

来的外用剂, 这些包括奶油, 乳液, 软膏, 喷雾和凝胶。通常情况下, 局部代理的目的是只影响他们的应用领域。然而, 它们也可以被吸收到血液中, 这可能是有意或无意的。这种吸收依赖于: 皮肤的状况, 使用的表面积, 物质的浓度, 接触的持续时间, 以及剂的脂溶性。

现在, 我们已经讨论了口头和局部管理方法的背景, 让我们学习的协议从口头管理开始通过饲料或水。

对于剂量计算, 首先您需要知道要执行的预期剂量。第二, 你要确定体重。除非另有规定, 您可以使用鼠标或大鼠的平均重量来计算, 而不是称量单个动物。第三, 你应该了解每个笼子里的动物数量, 第四, 你需要知道每个笼子的平均每日用水量或食物消耗量。

请记住, 配制的食物或饮用的水与溶解的化合物可能需要更频繁地替换比标准食物或水由于复合不稳定。有些化合物可能是轻的敏感或可能沉淀随着时间的推移。

现在, 让我们学习如何口服胃在小鼠和大鼠口服精确剂量。

第一步是为程序选择合适的针。这些要么可重复使用不锈钢或一次性与灵活的塑料轴和硅胶尖端。对于小鼠, 20-25 口径直或弯曲剂量针, 1.5 英寸的长度是适当的。对于大鼠, 选择18-20 口径直或弯曲剂量针, 是2-3 英寸长。正确的针规和注射器的选择也取决于体积和粘度。查看复合管理 I 视频, 了解这些因素的影响。对于加浓液体, 口锁注射器是首选。

在做出选择后, 将注射器贴在针头上, 这样, 枪管上的刻度就可以在不转动针头的情况下读取。这是重要的, 一旦针被放置到食道任何旋转可以破裂的食道壁导致动物死亡。接下来, 用正确的容积填充注射器来管理。

这种方法应始终对有意识的动物进行完整的吞咽反应, 以防止意外放置到气管。使用适当的约束技术是这一过程的关键。对于鼠标, 抓住头部底部的皮肤, 紧紧握住颈背。这确保头部有最小的机会进行侧向运动。此外, 要确保身体悬挂在一条直线从头部到尾部;任何扭曲都会阻碍胃针进入食道。后腿也必须稳定, 以防止身体旋转。

为了抑制老鼠, 用食指和颈部两侧的中指抓住它的肩部。这将防止老鼠把头从一边转到另一侧。拇指, 第三, 和第四手指环绕胸部, 以防止动物向前或向后移动。

一旦你已经适当地克制了动物, 定位针与曲线朝向向下和与自然曲线的颈部。然后, 将针头从右侧或左侧引入口腔, 通过 diastemata 和门牙和臼齿之间的角度向咽背。现在, 针被放置在口腔内, 用它来倾斜头部, 直到鼻子被指出。此时, 针应该容易地滑入食道。一旦针定位在胃里, 轻轻地把化合物沉积。然后, 从动物身上取出针头, 确保不转动它。重要的是不要强行把针放下。如果您感到有任何阻力, 请删除它, 然后重试。在执行过程中, 如果动物出现青紫或呼吸窘迫的迹象, 或如果有溶液从它的嘴流出, 剂量针应该立刻被去除, 并且动物应该被释放入它的笼子。

最后, 让我们回顾一下实验室动物的局部管理程序。从动物麻醉开始。这通常是使用快速行动吸入, 这使得动物快速恢复。有关麻醉管理的详细信息, 请参阅本系列的其他视频。

接下来, 使用理发剪除所有的毛皮从应用领域。为了避免任何削减, 把剪刀的平坦表面对皮肤和剃须的方向相反的头发增长。然后, 用水擦拭皮肤, 用纱布垫擦干。现在, 用棉签将这种物质直接涂抹在皮肤上。为了得到最好的效果, 应用几层薄薄的药膏或奶油, 而不是厚层的 one-time 应用。为了防止意外摄入局部应用的复合物, 请放置一个小衣领或一个盾牌, 以防止动物到达受影响的身体部分。此外, 为了防止 allogrooming 与笼友, 动物应单独安置。

现在, 您已经了解了这些替代的管理路线, 让我们看看它们是如何被用于生物医学研究今天。

口腔胃的一个重要应用是对物质的精确管理, 以研究其对胃肠道的直接作用。在这里, 研究人员用这种方法将一种转化的益生菌酵母直接送到动物的胃里。然后, 他们解剖了 Peyer 的补丁, 这是组织淋巴结核从小肠, 研究所提供的微生物的粘附。

无创的口服途径可用于模拟食物感染的自然运作。在这个实验中, 科学家开发了一个模型, 通过摄入受污染的食物, 在小鼠体内传播李斯特菌。继感染后, 研究人员采集了小肠、结肠、脾、肝、胆等多种器官, 分析感染对这些组织的影响。

最后, 一些研究人员有兴趣研究紫外线辐射可能导致晒的机理。在这里, 科学家们使用了局部路线来应用一种能诱导表皮黑色素产生的药理物质--紫外线保护剂。随后, 他们使用了类似于人类研究的协议来研究局部应用剂对紫外线辐射引起的红斑的保护作用。

你刚刚看了朱庇特的第二期的复合管理方法处理口服和局部剂量。你现在应该了解如何使用饲料或水来口服动物, 以及如何进行更精确的口服胃管理。最后, 您应该了解局部管理的考虑和方法, 以及这些不同技术的应用。一如既往, 感谢收看!

Summary

最安全和最人性化的复合管理方法是通过口服剂量, 如果有可能将其纳入饲料或水。口服胃是一种精确的配料方法, 但对动物也很有压力, 需要技术熟练。局部管理通常是完成了很少或没有限制的动物, 一旦该地区是适当的准备。仔细考虑政府的路线应该会影响到动物的潜在压力。

References

  1. Turner, P.V., Pekow, C., Vasbinder, M. A., and Brabb, T. 2011. Administration of substances to laboratory animals: equipment and considerations, vehicle selection, and solution preparation. JAALAS. 50:5. 614-627.
  2. Shimizu, S. 2004. Routes of Administration in The Laboratory Mouse. Elsevier.
  3. Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. 2012. Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats. J. Vis. Exp. (67), e2771, doi:10.3791/2771.
  4. Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. 2011. Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider. JAALAS. 50, 600-613.
  5. Hoggart, A.F., Hoggart, J., Honerlaw, M., and Pelus, L.M. 2010. A spoonful of sugar helps the medicine go down: a novel technique to improve oral gavage in mice. JAALAS. 49:3. 329-334.
  6. Gonzales, C., Zaleska, M.M., Riddell, D.R., Atchison, K.P., Robshaw, A., Zhou, H., and Rizzo, S.J. 2014. Alternative method of oral administration by peanut butter pellet formulation results in target engagement of BACE1 and attenuation of gavage-induced stress responses in mice. Pharmacology, Biochemistry, and Behavior. 126:28-35.
  7. Zumkehr, B., Hermann, C., Theurillat, R., Thormann, W., Gottstein, B., and Hemphill, A. 2012. Voluntary ingestion of antiparasitic drugs emulsified in honey represents an alternative to gavage in mice. JAALAS. 51:2. 219-223.

1. 专题应用

  1. 在涂抹任何软膏和药膏之前, 通过使用脱毛奶油或剃须, 将所有皮毛从该区域移走。
  2. 彻底清洁和干燥的皮肤。
  3. 将该物质直接涂抹在皮肤上, 用棉签或直接放置的下落, 以避免技术员的接触。
  4. 为了取得最佳效果, 应用几层薄薄的药膏或奶油, 而不是一层厚的一次性应用。
  5. 用分离的头发涂抹液体, 并在裸露的皮肤上涂抹一滴。
  6. 当在局部应用一种物质时, 由于动物对该区域的梳理, 有可能全身吸收。应采取预防措施, 避免意外摄入或及早清除该物质。小衣领或盾牌可以防止动物到达受影响的身体部位。个人住房也可能需要防止 allogrooming 的笼友。

Figure 1
图1。局部应用于小鼠。

2. 口服剂量

  1. 当通过饲料或水向动物提供化合物时, 必须计算出基于体重的最小日剂量。在实验中使用的老鼠或老鼠的平均重量可以用来做计算, 除非它指定每只动物被称重和药量为每个个体。
  2. 对于需要精确测量食物和/或水摄入的协议, 动物需要单独安置。
  3. 专门的饲料或治疗可以制造, 以满足实验需要。
    1. 用特制的食谱代替标准的饮食, 这可以让动物在一天内摄取这种化合物。
    2. 由于复合不稳定, 食品可能需要比标准食品更频繁地更换。
  4. 物质也可以通过溶解在饮用水中来管理, 允许动物在一天内接受一种化合物
    1. 在水中加入少量的糖使它可口。确切的增加量是由老鼠接受水所决定的。尽量使用最小的增量。
    2. 改变水的频率取决于化合物的稳定性。有些物质可能会随着时间的推移而感光或沉淀。

3. 胃程序

20-25 口径 x 1.5 在直或弯曲剂量针用于小鼠。对于大鼠, 18-20 口径 x 2-3 在直或弯曲剂量针使用。这些可用作可重复使用的不锈钢针或一次性针头。一次性针头可以有一个金属或柔性塑料轴与硅胶尖端。

  1. 根据测试溶液的体积和粘度, 将加药针连接到所选的注射器上。对于加浓液体, 口锁注射器是首选。这些通常可以从 3 cc 大小开始, 有100µl 毕业。这可能不适合较小的体积或当需要精确剂量体积较小的增量。
  2. 将注射器贴在针头上, 这样, 枪管上的刻度就可以在不转动针头的情况下读取。一旦针被放置到食道, 任何旋转都能使食道破裂, 导致动物死亡。
  3. 填装注射器与将被管理的文章的适当的容量 (优选的容量 = 5 毫升/公斤和最大容量 = 20 毫升/千克)4
  4. 适当的克制对这个过程是必要的。7
    1. 通过抓住头部底部的皮肤并 scruffing 它们来手动抑制小鼠。重要的是, 身体保持这样, 它被悬挂在一条直线从头部到尾部。任何扭曲的身体将阻碍胃针放置在食道。
    2. 紧紧抓住颈背, 使头部有最小的侧向运动。后躯必须稳定, 以防止身体旋转。
    3. gavaging 一只老鼠, 用食指和中指放在肩上, 在动物背上用手掌抓住它。拇指, 第三, 和第四手指应包围胸部, 以防止动物能够向前或向后移动。手指在颈部两侧的位置可以防止老鼠转动头部。
    4. 重要的是, 身体是在一条直线, 而不是扭曲, 以协助放置的胃针不损害口腔, 咽, 食道, 或胃。
    5. 确保头部没有多余的侧向运动。
    6. 后躯可稳定以防止身体旋转。这是通过允许后面的脚在计数器或保持架顶部休息来完成的。
  5. 物质的管理
    1. 定位针与曲线的向下和内联与自然曲线的颈部。将针头从右侧或左侧引入口腔, 在门牙和臼齿之间以一个角度向咽背部。
    2. 一旦针头在口腔内, 用胃针将头部向后倾斜, 直到鼻子指向。这在使用直针时尤其重要。针应该容易地滑入食道。不要用力把针放下。如果有任何阻力的感觉, 背部的针头, 并再次尝试。
    3. 一旦针在胃的位置, 轻轻地存放化合物。
    4. 取下针, 确保没有弯曲的针的旋转发生。
    5. 如果动物开始挣扎, 取出剂量针, 并更安全地抑制动物。
    6. 当执行过程中, 如果动物显示青紫或呼吸窘迫的征兆, 或者, 如果有解答从它的嘴流动, 药量针应该立刻被去除, 并且动物被释放入它的笼子。
    7. 一般而言, 当 gavaging 鼠和小鼠, 尤其是有腐蚀性的物质时, 推荐的做法是在给出整个体积之前, 最初提供少量的 (用于咳嗽的测试)。这样, 如果针头不正确定位, 传递到肺部的体积小, 动物有更好的恢复机会。

Figure 2
图2。口服胃小鼠 (左) 和大鼠 (右)。

许多实验要求一种化合物通过口服或局部的途径被管理成动物, 这样该方法就能更好地模仿实验物质的自然摄取。

为口服剂量, 该化合物可溶入饮用水或纳入动物食用的食物。另一种更精确的口服剂量方法是口服胃, 用大针将化合物直接放入胃中。另一方面, 外用剂可以直接放在皮肤表面上, 并且通常只影响它的应用范围。这些策略都有优势和局限性, 我们将在本视频中讨论。接下来, 我们将演示如何在实验室动物中执行这些复合管理技术, 以及它们的一些应用。

在钻研协议之前, 让我们回顾一下这些技术的考虑、好处和缺点。口服药片、胶囊或液体是人类最常用的药物管理方法。然而, 片剂和胶囊是不切实际的啮齿类动物, 所以普通口服剂量是通过溶解在饮用水或食物中的化合物。

当通过饮用水加药量时, 蔗糖经常添加到水中以提高适口。然而, 它应该是精细平衡的, 以鼓励正常的饮水摄入, 而不是过量饮用, 因为糖的味道。一个好的规则是从10% 蔗糖溶液开始, 然后根据摄入量调整。另一种口服剂量的动物是通过专门的食物。市面上有可供使用的饲料, 有常用的化合物, 如唑, 加入其中。啮齿类饲料公司还可以创建专门的测试食谱, 以满足实验要求。

这种口服剂量的优点是, 它是无创的, 连续管理化合物, 模仿人类口服药物。然而, 它缺乏精确度, 因为复合摄入量取决于食物或水的接受程度、化合物的稳定性以及笼中存在的动物数量。如果精确的剂量对实验是不重要的, 这种非侵入性的方法是最好的动物的好。

为了更精确的口服, 你可以使用口服胃, 它在特定的时间和指定的体积内直接将化合物存入胃中。然而, 需要进行适当的训练来执行这项技术, 因为如果它们没有受到适当的限制, 就会发生严重的动物损伤。

来的外用剂, 这些包括奶油, 乳液, 软膏, 喷雾和凝胶。通常情况下, 局部代理的目的是只影响他们的应用领域。然而, 它们也可以被吸收到血液中, 这可能是有意或无意的。这种吸收依赖于: 皮肤的状况, 使用的表面积, 物质的浓度, 接触的持续时间, 以及剂的脂溶性。

现在, 我们已经讨论了口头和局部管理方法的背景, 让我们学习的协议从口头管理开始通过饲料或水。

对于剂量计算, 首先您需要知道要执行的预期剂量。第二, 你要确定体重。除非另有规定, 您可以使用鼠标或大鼠的平均重量来计算, 而不是称量单个动物。第三, 你应该了解每个笼子里的动物数量, 第四, 你需要知道每个笼子的平均每日用水量或食物消耗量。

请记住, 配制的食物或饮用的水与溶解的化合物可能需要更频繁地替换比标准食物或水由于复合不稳定。有些化合物可能是轻的敏感或可能沉淀随着时间的推移。

现在, 让我们学习如何口服胃在小鼠和大鼠口服精确剂量。

第一步是为程序选择合适的针。这些要么可重复使用不锈钢或一次性与灵活的塑料轴和硅胶尖端。对于小鼠, 20-25 口径直或弯曲剂量针, 1.5 英寸的长度是适当的。对于大鼠, 选择18-20 口径直或弯曲剂量针, 是2-3 英寸长。正确的针规和注射器的选择也取决于体积和粘度。查看复合管理 I 视频, 了解这些因素的影响。对于加浓液体, 口锁注射器是首选。

在做出选择后, 将注射器贴在针头上, 这样, 枪管上的刻度就可以在不转动针头的情况下读取。这是重要的, 一旦针被放置到食道任何旋转可以破裂的食道壁导致动物死亡。接下来, 用正确的容积填充注射器来管理。

这种方法应始终对有意识的动物进行完整的吞咽反应, 以防止意外放置到气管。使用适当的约束技术是这一过程的关键。对于鼠标, 抓住头部底部的皮肤, 紧紧握住颈背。这确保头部有最小的机会进行侧向运动。此外, 要确保身体悬挂在一条直线从头部到尾部;任何扭曲都会阻碍胃针进入食道。后腿也必须稳定, 以防止身体旋转。

为了抑制老鼠, 用食指和颈部两侧的中指抓住它的肩部。这将防止老鼠把头从一边转到另一侧。拇指, 第三, 和第四手指环绕胸部, 以防止动物向前或向后移动。

一旦你已经适当地克制了动物, 定位针与曲线朝向向下和与自然曲线的颈部。然后, 将针头从右侧或左侧引入口腔, 通过 diastemata 和门牙和臼齿之间的角度向咽背。现在, 针被放置在口腔内, 用它来倾斜头部, 直到鼻子被指出。此时, 针应该容易地滑入食道。一旦针定位在胃里, 轻轻地把化合物沉积。然后, 从动物身上取出针头, 确保不转动它。重要的是不要强行把针放下。如果您感到有任何阻力, 请删除它, 然后重试。在执行过程中, 如果动物出现青紫或呼吸窘迫的迹象, 或如果有溶液从它的嘴流出, 剂量针应该立刻被去除, 并且动物应该被释放入它的笼子。

最后, 让我们回顾一下实验室动物的局部管理程序。从动物麻醉开始。这通常是使用快速行动吸入, 这使得动物快速恢复。有关麻醉管理的详细信息, 请参阅本系列的其他视频。

接下来, 使用理发剪除所有的毛皮从应用领域。为了避免任何削减, 把剪刀的平坦表面对皮肤和剃须的方向相反的头发增长。然后, 用水擦拭皮肤, 用纱布垫擦干。现在, 用棉签将这种物质直接涂抹在皮肤上。为了得到最好的效果, 应用几层薄薄的药膏或奶油, 而不是厚层的 one-time 应用。为了防止意外摄入局部应用的复合物, 请放置一个小衣领或一个盾牌, 以防止动物到达受影响的身体部分。此外, 为了防止 allogrooming 与笼友, 动物应单独安置。

现在, 您已经了解了这些替代的管理路线, 让我们看看它们是如何被用于生物医学研究今天。

口腔胃的一个重要应用是对物质的精确管理, 以研究其对胃肠道的直接作用。在这里, 研究人员用这种方法将一种转化的益生菌酵母直接送到动物的胃里。然后, 他们解剖了 Peyer 的补丁, 这是组织淋巴结核从小肠, 研究所提供的微生物的粘附。

无创的口服途径可用于模拟食物感染的自然运作。在这个实验中, 科学家开发了一个模型, 通过摄入受污染的食物, 在小鼠体内传播李斯特菌。继感染后, 研究人员采集了小肠、结肠、脾、肝、胆等多种器官, 分析感染对这些组织的影响。

最后, 一些研究人员有兴趣研究紫外线辐射可能导致晒的机理。在这里, 科学家们使用了局部路线来应用一种能诱导表皮黑色素产生的药理物质--紫外线保护剂。随后, 他们使用了类似于人类研究的协议来研究局部应用剂对紫外线辐射引起的红斑的保护作用。

你刚刚看了朱庇特的第二期的复合管理方法处理口服和局部剂量。你现在应该了解如何使用饲料或水来口服动物, 以及如何进行更精确的口服胃管理。最后, 您应该了解局部管理的考虑和方法, 以及这些不同技术的应用。一如既往, 感谢收看!

A subscription to JoVE is required to view this article.
You will only be able to see the first 20 seconds.

RECOMMEND JoVE