Overview
출처: 케이 스튜어트, RVT, RLATG, CMAR; 발레리 A. 슈뢰더, RVT, RLATG. 노틀담 대학교, IN
화합물 투여는 종종 동물 연구의 필수적인 구성 요소입니다. 화합물이 올바르게 전달되는지 확인하기 위해 많은 요인을 평가해야 합니다. 투여 경로는 흡수 메커니즘에 영향을 미칩니다. 도입되는 물질의 특성(pH, 점도 및 농도)은 어느 투여 경로가 선택되나 지시할 수 있습니다.1,2,3
Principles
두 가지 주요 관리 경로는 장내 (소화관을 통해) 및 비경구 (소화관 외부에서 관리)입니다. 관리 경로의 선택은 주로 연구의 요구 사항에 의해 결정됩니다. 비경구 투약의 주요 장점은 화합물이 간 대사를 받지 않아 생체 이용률이 높다는 것입니다. 그러나, 더 나은 물질의 자연적인 섭취를 모방 하기 위해 구두로 관리 하는 화합물을 필요로 하는 많은 실험 프로토콜이 있다. 활용하는 가장 좋은 경로는 테스트 화합물의 특성에 의해 결정됩니다.
구강 투여는 인간에서 약물 투여의 가장 일반적으로 사용되는 방법입니다. 이것은 정제와 함께 이루어집니다., 캡슐, 또는 약물의 액체 형태. 정제 및 캡슐 투여는 설치류에서 비실용적이기 때문에 생쥐와 쥐에 대한 일반적인 구강 투여는 식수의 화합물을 용해하거나, 검사 화합물을 수식에 통합하는 전문 식품을 사용하거나, 화합물을 간식에 배치함으로써 수행됩니다. 식수를 통해 투약 할 때, 자당은 종종 궁전성을 향상시키기 위해 물에 추가됩니다. 그러나, 그것은 정상적인 물 섭취를 장려 하 고 설탕 맛 때문에 과도 한 마시는 하지 미세 하 게 균형을 해야 한다.
많은 연구는 반복 된 구강 영역은 쥐와 쥐 모두에 스트레스가 있음을 보여주었다. 4,5 동물 관리 직원을 위한 노동 집약성도 있습니다. 일반적으로 펜벤다졸과 같은 화합물을 주입하는 시판되는 사료가 있으며, 설치류에 있는 기생충을 제거하는 데 사용됩니다. 다른 회사는 항 염증제, 진통제, 항 기생충, 또는 항생제를 포함하는 약성 취급을 제공합니다. 쥐와 쥐에 대 한 공식된 다이어트를 제조 하는 피드 회사 실험 요구 사항을 충족 하기 위해 전문 적인 테스트 다이어트를 만들 것입니다. 많은 실험실에서 꿀, 땅콩 버터 또는 과일 맛 젤라틴을 사용하여 자신의 간식을 제조했습니다. 4,5
구강 침구는 화합물의 섭취가 음식이나 물의 수용, 화합물의 안정성 및 케이지에 존재하는 동물의 수에 의존하기 때문에 정밀도가 부족합니다. 그러나 정확한 주체가 실험에 중요하지 않은 경우 이 비침습적 인 치료 방법은 동물의 웰빙에 가장 적합합니다.
경구 관지는 특정 시간과 지정된 부피에서 동물의 위장으로 직접 화합물의 증착을 허용하기 때문에 장내 주입의 훨씬 더 정확한 방법입니다. 그러나 성공을 보장하기 위해 교육이 필요합니다. 동물의 적절한 구속은이 기술의 성공에 매우 중요합니다. 구강, 인두, 후두, 기관, 식도 및 위장에 대한 부상은 머리와 신체의 부적절한 위치로 인해 발생할 수 있습니다. 동물은 그러한 부상을 방지하기 위해 머리가 비틀릴 수 없도록 단단히 잡혀야합니다.
투약 바늘은 재사용 가능한 또는 일회용 형식으로 사용할 수 있습니다. 비용이 많이 들지만 일회용 바늘을 사용하면 여러 동물을 주입 할 때 교차 오염의 위협을 제거합니다. 쥐에 대 한 20-22 게이지와 쥐에 대 한 18-20 게이지에 이르기까지 gavage 바늘의 여러 크기가 있다. 바늘의 선택은 동물의 크기, 액체의 부피 및 투여할 용액의 점도에 의해 결정된다.
구강 학은 기관체에 바늘을 배치의 가능성을 줄이기 위해 의식 동물에 수행되어야한다. 의식이있는 동물은 삼키는 반사뿐만 아니라 개그 반사를 유지하여 식도에 적절한 배치를 촉진합니다. 자당으로 개브지 바늘을 미리 코팅하여 삼키는 반사를 유도하고 바늘을 식도로 전달하는 데 필요한 시간의 양을 감소시키는 연구가 수행되었습니다. 6
피부 표면에 직접 배치되는 국소 제제는 일반적으로 피부가 적용되는 영역에만 영향을 미치기 위한 것입니다. 이들은 크림, 로션, 연고, 거품, 또는 젤 일 수 있습니다. 동물은 에이전트가 적용되는 지역을 신랑하는 경향이있기 때문에, 구강 소비의 독성을 고려해야합니다.
토폴로 투여된 화합물은 모낭과 부속땀샘을 통해 진피 층과 피하 공간을 통해 흡수하도록 제조된다. 화합물의 흡수에 영향을 미치는 인자는 피부의 상태, 활용된 표면적, 물질의 농도, 화합물의 지질 용해도, 그리고 피부 표면과 접촉하는 시간의 길이를 포함한다. 잘 수화되고 얇은 피부 층은 흡수 시간을 감소시킬 것입니다.
물질을 국체적으로 적용할 때, 동물을 그루밍하기 때문에 전신 흡수의 기회가 있다. 사고 섭취 또는 물질의 조기 제거를 피하기 위해 예방 조치를 취해야 합니다. 작은 칼라 나 방패는 동물이 영향을받는 신체 부위에 도달하지 못하도록 할 수 있습니다. 개별 하우징은 케이지 메이트의 알로그루밍을 방지하기 위해 필요할 수도 있습니다.
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Procedure
1. 국소 응용 프로그램
- 연고와 크림을 바르기 전에, 탈모 크림을 사용하거나 면도하여 모든 털을 제거하십시오.
- 피부를 철저히 청소하고 건조시다.
- 면팁 어플리케이터또는 직접 배치된 드롭을 통해 피부에 직접 물질을 발라 기술자의 접촉을 피하십시오.
- 최상의 결과를 얻으려면 두꺼운 층을 한 번에 바르는 것에 반하는 연고 또는 크림의 여러 얇은 층을 적용하십시오.
- 모발을 이별하고 노출된 피부에 방울을 바르면 액체를 바르습니다.
- 물질을 국체적으로 적용할 때, 동물을 손질하기 때문에 전신 흡수의 가능성이 있다. 사고 섭취 또는 물질의 조기 제거를 피하기 위해 예방 조치를 취해야 합니다. 작은 칼라 나 방패는 동물이 영향을받는 신체 부위에 도달하지 못하도록 할 수 있습니다. 개별 하우징은 케이지 메이트의 알로그루밍을 방지하기 위해 필요할 수도 있습니다.
그림 1. 마우스에서 국소 적용.
2. 구두 주어
- 사료 나 물을 통해 동물에 화합물을 제공 하는 경우, 체중에 따라 최소 일일 복용량계산 해야 합니다. 실험에서 사용되는 마우스 또는 쥐 균주의 평균 중량은 각 동물의 무게를 측정하고 각 개인에 대해 측정된 용량이 지정되지 않는 한 계산을 하는 데 사용될 수 있다.
- 음식 및/또는 물 섭취를 정확하게 측정해야 하는 프로토콜의 경우 동물을 개별적으로 보관해야 합니다.
- 전문 사료 또는 간식은 실험적 요구를 충족시키기 위해 제조될 수 있습니다.
- 표준 식단을 제조된 식단으로 대체하여 동물이 하루 종일 화합물을 섭취할 수 있도록 합니다.
- 식품은 화합물 불안정으로 인해 표준 식품보다 더 자주 교체해야 할 수도 있습니다.
- 물질은 또한 식수에서 용해하여 투여 될 수있다, 동물이 하루 종일 화합물을받을 수 있도록
- 소량의 설탕이 물에 첨가되어 맛있게 만듭니다. 첨가할 정확한 양은 마우스에 의한 물의 수용에 의해 결정된다. 가능한 가장 작은 증분을 사용합니다.
- 물을 변경하는 빈도는 화합물의 안정성에 따라 달라집니다. 일부 물질은 시간이 지남에 따라 빛에 민감하거나 침전될 수 있습니다.
3. 가바지 절차
20-25 게이지 x 1.5 직선 또는 곡선 투약 바늘은 마우스에 사용됩니다. 쥐의 경우, 직선 또는 곡선 투약 바늘에 18-20 게이지 x 2-3이 사용됩니다. 이들은 재사용 가능한 스테인레스 스틸 바늘 또는 일회용 바늘로 사용할 수 있습니다. 일회용 바늘에는 실리콘 팁이 있는 금속 또는 유연한 플라스틱 샤프트가 있을 수 있습니다.
- 시험 용액의 부피 및 점도에 따라 선택된 주사기에 투약 바늘을 부착합니다. 두꺼운 액체를 투약하기 위해 Luer 잠금 주사기를 선호합니다. 이들은 일반적으로 100 μl 졸업이 있는 3 cc 크기로 시작 해서 사용할 수 있습니다. 이 작은 볼륨에 대 한 적합 하지 않을 수 있습니다 또는 더 작은 증분에 정확한 복용량 볼륨에 대 한 필요성이 있을 때.
- 주사기를 바늘에 부착하여 배럴의 졸업을 바늘을 돌리지 않고 읽을 수 있도록합니다. 바늘이 식도에 놓이면, 어떤 회전도 식도파열되어 동물의 사망을 초래할 수 있습니다.
- 투여할 적절한 양의 품물로 주사기를 채우기(최적의 볼륨 = 5ml/kg 및 최대 부피 = 20ml/kg)4
- 적절한 구속은이 절차에 필수적입니다. 7
- 머리 밑의 피부를 잡고 스크러핑하여 마우스를 수동으로 억제합니다. 머리에서 꼬리까지 직선으로 매달리도록 몸을 붙이는 것이 중요합니다. 신체의 비틀림은 식도에 게이지 바늘의 배치를 방해할 것입니다.
- 머리가 최소한의 좌우 움직임을 할 수 있도록 스크러프를 단단히 잡습니다. 차체 회전을 방지하기 위해 뒷분기를 안정화해야 합니다.
- 쥐를 구비하기 위해 목 의 양쪽에 있는 색인과 가운데 손가락, 동물의 등에 손바닥을 사용하여 어깨에 쥐를 잡습니다. 엄지 손가락, 세 번째, 네 번째 손가락은 동물이 앞으로 또는 뒤로 이동할 수 있도록 가슴을 둘러싸고 있어야합니다. 목 의 양쪽에 손가락의 위치는 쥐가 머리를 회전에서 방지 할 수 있습니다.
- 신체가 직선에 있고 입, 인두, 식도 또는 위장에 손상되지 않고 gavage 바늘의 배치를 돕기 위해 뒤틀리지 않는 것이 중요합니다.
- 머리에 과도한 좌우 움직임이 없는지 확인합니다.
- 뒤늦은 분기는 신체 회전을 방지하기 위해 안정화 될 수있다. 이는 뒷발이 카운터 또는 케이지 상단에 놓일 수 있도록 하여 수행됩니다.
- 물질의 투여
- 곡선이 아래쪽으로 향하여 바늘을 목의 자연스러운 곡선과 인라인으로 배치합니다. 인두 뒤쪽을 향해 각도로 절개와 어금니 사이, 오른쪽 또는 왼쪽에서 입으로 바늘을 소개합니다.
- 바늘이 구강 내에 있으면 코가 뾰족할 때까지 개간 바늘을 사용하여 머리를 다시 기울이세요. 이것은 직선 바늘을 사용할 때 특히 중요합니다. 바늘은 식도로 쉽게 미끄러져야합니다. 바늘을 강제로 내려 두지 마십시오. 저항이 느껴지면 바늘을 뒤로 하고 다시 시도하십시오.
- 바늘이 위장에 놓이면 화합물을 부드럽게 데치십시오.
- 바늘을 제거하여 구부러진 바늘의 회전이 일어나지 않도록하십시오.
- 동물이 어려움을 겪기 시작하면 투약 바늘을 제거하고 동물을 보다 안전하게 억제하십시오.
- 절차를 수행하는 동안, 동물이 시안화 또는 호흡 곤란의 징후를 표시하는 경우, 또는 입에서 흐르는 용액이있는 경우, 투약 바늘은 즉시 제거하고 동물이 케이지로 풀어 놓아야합니다.
- 일반적으로 쥐와 쥐를, 특히 가성 물질로 유보 할 때, 전체 부피가 주어지기 전에 기침을 테스트하기 위해 소량을 교신 방식으로 전달하는 것이 좋습니다. 그런 식으로, 바늘이 잘못 배치되면 폐로 전달되는 부피가 작고 동물은 회복 할 확률이 더 좋습니다.
그림 2. 마우스 (왼쪽)와 쥐 (오른쪽)에서 구강 영역.
많은 실험은 화합물이 경구 또는 국소 경로를 통해 동물로 투여되어야하므로 방법이 실험 물질의 자연적인 섭취를 더 잘 모방해야합니다.
구강 주입을 위해 화합물은 식수에 용해되거나 동물이 소비하는 음식에 통합 될 수 있습니다. 또 다른, 구강 주입의 더 정확한 방법은 큰 바늘이 위장에 직접 화합물을 배치하는 데 사용되는 경구 영역입니다. 한편, 국소제는 피부 표면에 직접 배치할 수 있으며, 일반적으로 적용되는 영역만 영향을 미치기 위한 것이다. 이러한 각 전략에는 장점과 한계가 있으며 이 비디오에서 논의할 것입니다. 그 다음에 우리는 실험실 동물에서 이러한 복합 관리 기술을 수행하는 방법을 보여줍니다, 그들의 응용 프로그램의 일부.
프로토콜을 자세히 검토하기 전에 이러한 기술의 고려 사항, 이점 및 단점을 살펴보겠습니다. 정제와 구두 주입, 캡슐, 또는 액체는 인간에서 약물 관리의 가장 일반적으로 사용 되는 방법. 그러나, 정제와 캡슐은 설치류에 대 한 실용적이지 않습니다., 그래서 일반적인 구두 먹이 는 식수 또는 음식에 화합물을 용해 하 여 달성.
식수를 통해 투약 할 때, 자당은 종종 궁전성을 향상시키기 위해 물에 추가됩니다. 그러나, 그것은 정상적인 물 섭취를 장려 하 고 설탕 맛 때문에 과도 한 마시는 하지 미세 하 게 균형을 해야 한다. 좋은 규칙은 10% 자당 솔루션으로 시작한 다음 섭취에 따라 조정하는 것입니다. 동물을 구두로 투여하는 또 다른 방법은 특수 식품을 통해서입니다. 펜벤다졸과 같은 일반적으로 주입된 화합물이 있는 시판되는 사료가 있습니다. 설치류 사료 회사는 실험적 요구 사항을 충족하기 위해 전문 테스트 다이어트를 만들 수도 있습니다.
구강 투약의이 형태의 장점은 비 침습적이다, 지속적으로 화합물을 관리, 인간의 구강 약물 투여를 모방. 그러나, 화합물 섭취는 음식이나 물의 수용, 화합물의 안정성 및 케이지에 존재하는 동물의 수에 의존하기 때문에 정밀도가 결여된다. 정확한 투약이 실험에 중요하지 않은 경우,이 비 침습적 방법은 동물의 웰빙에 가장 적합합니다.
보다 정확한 구강 투여를 위해 특정 시간과 지정된 부피로 화합물을 위장에 직접 침전시키는 구강 영역을 사용할 수 있습니다. 그러나, 동물이 제대로 억제되지 않으면 심각한 손상이 발생할 수 있기 때문에이 기술을 수행하기 위해 적절한 훈련이 필요합니다.
국소 제제에 오는, 이들은 크림을 포함, 로션, 연고, 스프레이, 그리고 젤. 일반적으로 국소 에이전트는 적용되는 영역에만 영향을 미치기 위한 것입니다. 그러나, 그들은 또한 혈 류로 흡수 될 수 있습니다., 의도적 또는 의도 하지 않을 수 있습니다. 이 흡수에 따라 달라 집니다:피부의 상태, 활용 된 표면적, 물질의 농도, 접촉 기간 및 에이전트의 지질 용해도.
이제 구강 및 국소 투여 방법의 배경에 대해 논의되었으므로 사료 나 물을 통해 구강 투여로 시작하는 프로토콜을 배우십시오.
투약 계산을 위해 먼저 투여할 의도된 복용량을 알아야 합니다. 둘째, 체중을 결정해야 합니다. 개별 동물의 무게를 측정하는 대신, 달리 명시되지 않는 한 계산에 마우스 또는 쥐 변형의 평균 무게를 사용할 수 있습니다. 셋째, 케이지당 동물의 수를 알고 있어야 하며, 네 번째는 케이지당 평균 일일 물이나 음식 소비를 알아야 합니다.
기억, 용해 화합물을 가진 공식화 된 식품 또는 식수는 화합물 불안정으로 인해 표준 식품 이나 물 보다 더 자주 대체 해야 할 수 있습니다. 일부 화합물은 빛에 민감하거나 시간이 지남에 따라 침전 될 수있다.
이제 마우스와 쥐의 구강 영역을 수행하여 정확한 복용량을 구두로 투여하는 방법을 알아 봅시다.
첫 번째 단계는 절차에 적합한 바늘을 선택하는 것입니다. 이들은 스테인레스 스틸로 구성되거나 유연한 플라스틱 샤프트와 실리콘 팁으로 일회용으로 재사용 할 수 있습니다. 마우스의 경우 길이가 1.5인치인 직선 또는 곡면 투약 바늘을 20-25게이지하는 것이 적절합니다. 쥐의 경우 길이가 2-3인치인 18-20게이지 직선 또는 곡선 투약 바늘을 선택합니다. 올바른 바늘 게이지 및 주사기 선택은 볼륨과 점도에 따라 달라집니다. 이러한 요인의 영향을 이해 하려면 화합물 관리 I 비디오를 검토 합니다. 두꺼운 액체를 투약하기 위해 Luer 잠금 주사기를 선호합니다.
선택을 한 후, 주사기를 바늘에 부착하여 배럴의 졸업을 바늘을 돌리지 않고 읽을 수 있도록 합니다. 이것은 일단 바늘이 식도에 놓이면 어떤 회전든지 동물의 죽음의 결과로 식도 벽을 파열할 수 있기 때문에 중요합니다. 다음으로, 주사기를 투여할 용액의 정확한 부피로 채운다.
이 방법은 항상 기관체에 우발적 인 배치를 방지하기 위해 반사 신경을 삼키는 의식이있는 동물에서 수행되어야한다. 적절한 구속 기술을 사용하는 것은 이 절차에 매우 중요합니다. 마우스의 경우 머리 밑면에 피부를 잡고 스크러프를 단단히 잡습니다. 이를 통해 헤드는 좌우 이동을 위한 최소한의 기회를 갖습니다. 또한, 몸체가 머리에서 꼬리까지 직선으로 매달려 있는지 확인하십시오. 어떤 비틀림은 식도에 gavage 바늘의 배치를 방해할 것입니다. 뒤이어져야 신체 회전을 방지할 수 있습니다.
쥐를 억제하려면 목 의 양쪽에 있는 인덱스와 가운데 손가락을 사용하여 어깨에 쥐를 잡습니다. 이렇게 하면 쥐가 머리를 좌우로 돌리지 못하게 됩니다. 엄지 손가락, 세 번째, 네 번째 손가락은 동물이 앞뒤로 움직이지 않도록 가슴을 둘러싸고 있습니다.
동물을 제대로 억제한 후 바늘을 아래쪽과 목의 자연스러운 곡선에 맞춰 바늘을 배치합니다. 그런 다음, 오른쪽 또는 왼쪽에서 입으로 바늘을 소개하고, 디아스테마를 통해, 그리고 인두의 뒤쪽을 향해 각도로 절개와 어금니 사이를 한다. 이제 바늘이 구강 에 배치되었으므로 코를 가리 켜야 머리를 뒤로 기울이는 데 사용합니다. 이 시점에서 바늘은 식도로 쉽게 밀어 넣어야합니다. 바늘이 위장에 놓이면 화합물을 부드럽게 데치십시오. 그런 다음 동물에서 바늘을 제거하여 회전하지 않도록하십시오. 바늘을 강제로 내려두는 것이 중요합니다. 당신이 어떤 저항을 느끼는 경우에, 그것을 제거하고 다시 시도. 절차를 수행하는 동안, 동물이 시안화 또는 호흡 곤란의 징후를 보여주거나 입에서 흐르는 용액이있는 경우, 투약 바늘을 즉시 제거하고 동물이 케이지로 방출되어야합니다.
마지막으로, 실험실 동물의 국소 투여 절차를 검토해 보겠습니다. 동물을 마취하는 것으로 시작합니다. 이것은 일반적으로 빠른 동물 복구를 허용하는 빠른 연기 흡입제를 사용하여 이루어집니다. 마취 관리에 대한 자세한 내용은 이 컬렉션의 다른 비디오를 참조하십시오.
다음으로, 헤어 클리퍼를 사용하여 응용 프로그램의 영역에서 모든 모피를 제거합니다. 어떤 상처를 피하기 위해, 피부에 클리퍼의 평평한 표면을 배치하고 머리 성장의 반대 방향으로 면도. 그런 다음 물로 피부를 청소하고 거즈 패드로 말리십시오. 이제 면기울어를 사용하는 어플리케이터를 사용하여 피부에 직접 물질을 적용합니다. 최상의 결과를 얻으려면 두꺼운 층을 일회성으로 적용하는 것과 는 달리 연고 또는 크림의 여러 얇은 층을 적용하십시오. 그루밍으로 인해 토폴로지 적용 화합물의 우발적 인 섭취를 방지하기 위해, 영향을받는 신체 부위에 도달하지 못하도록 작은 칼라 또는 방패를 배치합니다. 또한 케이지 메이트의 동종을 방지하기 위해 동물을 개별적으로 보관해야합니다.
이제 이러한 대체 행정 경로에 대한 이해가 생겼으므로 오늘날 생물 의학 연구에서 어떻게 사용되고 있는지 살펴보겠습니다.
경구 관지의 중요 한 응용 프로그램 중 하나는 위 장관에 그들의 직접적인 효과 공부 하는 물질의 정확한 관리. 여기, 연구원은 동물의 위장으로 직접 변형 된 probiotic 효 모를 제공 하기 위해이 방법을 사용. 그리고 그들은 전달 된 미생물의 준수를 연구하기 위해 소장에서 림프 목절을 조직하는 Peyer의 패치를 해부했습니다.
비침습적 구강 경로는 식품 매개 감염의 자연적인 modus를 모방하는 데 사용할 수 있습니다. 이 실험에서, 과학자는 오염된 음식의 섭취를 통해 마우스에 있는 리스테리아 단세포 유전자의 경구 전송을 위한 모형을 개발했습니다. 감염 다음, 연구원은 소장 같은 다양 한 장기를 수확, 결장, 비장, 간 및 담 낭광, 이러한 조직에 감염의 확산을 분석 하기 위해.
마지막으로, 몇몇 연구원은 UV 방사선이 일광화상으로 이끌어 낼 수 있는 기계장치를 공부에 관심이 있습니다. 여기서 과학자들은 국소 경로를 사용하여 표피 멜라닌-자외선 보호제의 생산을 유도하는 약리물질을 적용했습니다. 그 후, 그들은 UV 방사선에 의해 유도 된 홍반에 대한 국소 적용 에이전트의 보호 효과를 검사하기 위해 인간의 연구와 유사한 프로토콜을 사용했다.
당신은 단지 구두 및 국소 투여를 다루는 복합 관리 방법의 JoVE의 두 번째 할부를 보았다. 이제 사료나 물을 사용하여 동물을 구두로 투여할 수 있는 방법과 보다 정밀한 구강 관제 투여를 수행하는 방법을 이해해야 합니다. 마지막으로, 국소 관리에 대한 고려 사항 및 방법 및 이러한 다양한 기술의 응용 프로그램을 알아야 합니다. 언제나처럼, 시청주셔서 감사합니다!
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Applications and Summary
화합물 투여의 가장 안전하고 가장 인도적인 방법은 사료 또는 물에 통합할 수 있는 경우 구강 투여를 통해서이다. 구강 영역은 정확한 도징 방법이지만 동물에게 매우 스트레스가 되며 기술적 숙련도가 필요합니다. 국소 투여는 일반적으로 동물이 제대로 준비되면 거의 또는 전혀 억제없이 수행됩니다. 행정 경로를 신중하게 고려하려면 동물에 대한 잠재적 인 스트레스를 고려해야합니다.
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