複合管理 II

Lab Animal Research

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Overview

ソース: ケイ ・ スチュワート、RVT、RLATG、CMAR;ヴァレリー A. シュレーダー、RVT、RLATG。ノートルダムのノートルダム大学

化合物管理はしばしば動物の研究に不可欠なコンポーネントです。多くの要因は、化合物が正しく配信されることを確保するために評価する必要があります。投与経路の吸収のメカニズムに影響を与えます。物質の特性の導入 (pH、粘度、濃度) 管理のどちらのルートが selected.1,2,3 を規定することがあります

Cite this Video

JoVE Science Education Database. ラボ動物研究の必需品. 複合管理 II. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

Principles

2 つの主な投与経路は経腸 (消化管) を経由して、非経口的 (消化管の外投与)。投与経路の選択は、主に研究の要件によって決まります。非経口投与する主な利点は、化合物は肝代謝、高いバイオアベイラビリティにさらされないことです。ただしより物質の自然吸気を模倣するために経口的に投与する化合物を必要とする多くの実験的プロトコルがあります。利用する最適なルートはテスト混合物のプロパティによって決定されます

最も一般的に使用される人間の投与法は、経口投与します。これは、錠剤、カプセル、または薬の液体の形態で行われます。いずれかの水を飲んで、数式に化合物のテストを組み込んだ特殊な食品を使用して化合物を溶解することにより、配置するマウスおよびラットの一般的な経口投与には、錠剤やカプセルの管理は齧歯類で実用的ですお菓子の化合物。飲料水を介して投与、ショ糖はしばしば食味を高めるために水に追加されます。ただし、それが細かくバランス通常水の摂取量と甘い味のためない過度の飲酒を奨励する

経口はマウスやラット . の両方にストレスが繰り返し多くの研究が示しています。アニマル ・ ケアのスタッフの労力が 4, 5 だも。化合物 - フェンベンダゾール、齧歯動物では、それに組み込まれての寄生虫を除去するために使用されるなど投与が一般市販のフィードがあります。他の企業は、抗炎症薬、鎮痛薬、駆虫薬、または抗生物質が含まれている薬用の御馳走を提供します。マウスおよびラットのための作り出された食事を製造する飼料会社実験的要件を満たすために専門にされたテスト ダイエットが作成されます。多くの実験室は、蜂蜜、ピーナッツ バター、またはフルーツ風味ゼラチンを使って自分のお菓子を策定しました。4, 5

経口化合物の摂取量は食物や水の受け入れに依存するため、精度を欠いているを投与、化合物の安定性と動物の数現在檻の中。ただし、正確な投与が実験に重要でない場合投与のこの非侵襲的方法は動物の健康に最適です

化合物の動物の胃の中に直接の沈着を特定の時間に、指定したボリュームでの経口、経腸投与のより正確な方法。ただし、トレーニングは成功のために必要です。動物の適切な拘束は、この手法の成功に不可欠です。口腔、咽頭、喉頭、気管、食道、胃への損傷は、頭と体の不適切な配置、起因できます。動物必要がありますしっかりとつかめる、頭がそのような傷害を防ぐために、工夫することができる

投薬針は再利用可能または使い捨て可能なフォーマットで利用できます。高価な使い捨て針を使用は、複数の動物を投与するとき交差汚染の脅威を削除します。強制経口投与針、20-22 ゲージ マウス用とラット用 18-20 ゲージからのいくつかのサイズがあります。針の選択、投与する溶液の粘性液体のボリューム、動物のサイズによって決まります

口腔 gavaging 気管に針を置くことの可能性を減少する理性的な動物で実行してください。嚥下反射として食道に適切な配置を促進するギャグを意識した動物を保持します。研究は、ショ糖経口針をプレコート嚥下反射を誘発したことを示す実施し、食道に針を渡すために必要な時間の量を減少します。6

皮膚の表面に直接配置されている外用剤は、通常、適用する領域だけに影響を与えるもの。これらは、クリーム、ローション、軟膏、発泡体、またはジェルをすることができます。動物は、エージェントが適用される領域を新郎に傾向があるので、経口摂取の毒性を見なす必要があります

化合物の投与は真皮層と毛包と付属腺によって皮下の空間を介して吸収されるように定式化されます。化合物の吸収に影響する要因には、皮膚の状態、表面積を利用、皮膚の表面に接触している時間の長さ、コンパウンドの脂溶性物質の濃度があります。よく水和と薄い皮膚の層により吸収時間を短縮します

地域をグルーミング動物による全身吸収の可能性がある物質を局所的に適用するとき。予防対策は、事故の摂取または物質の早期除去を避けるために取られるべき。小さな襟や盾が影響に達することから動物を防ぐために利用可能なボディー パーツ。個々 の住宅は、ケージの仲間から allogrooming を防ぐためにも必要があります

Procedure

1 塗布

  1. 軟膏やクリームを適用する前にシェービング、脱毛クリームを使用して領域からすべての毛皮を削除します。
  2. 徹底的にきれいにし、肌の乾燥です
  3. 綿の先端アプリケータや技術者による接触を避けるために直接配置ドロップダウンを介して直接皮膚に物質を適用します
  4. 最高の結果を得るには、軟膏やクリームの厚い層のワンタイム アプリケーションに反対しているいくつかの薄い層を適用します
  5. 別れの髪や露出した皮膚に滴を適用するによって液体を適用します
  6. 地域をグルーミング動物による全身吸収の可能性がある物質を局所的に適用するとき。予防対策は、事故の摂取または物質の早期除去を避けるために取られるべき。小さな襟や盾が影響に達することから動物を防ぐために利用可能なボディー パーツ。個々 の住宅は、ケージの仲間から allogrooming を防ぐためにも必要があります

Figure 1
図 1。マウスにおける局所アプリケーション

2。 経口投与

動物飼料や水を介して化合物の
  1. を提供するとき、体重に基づく最低限の毎日の線量を計算する必要があります。実験で使用されているマウスやラットの歪みの平均体重は、各動物の体重を指定しない限り、計算を実行する使用ことができ、個々 の線量計算します
  2. 、食物や水の摂取量を精密に測定するを必要とするプロトコル、動物個別に保存しておく必要があります
  3. 専門のフィードや、お菓子の実験的ニーズを満たすために製造が可能します。
    1. 標準的な食事を終日化合物を摂取する動物を可能にする作り出された 1 つに置き換えます
    2. 食品化合物の不安定性のための標準的な食品よりも頻繁に交換する必要があります
  4. 物質は可能性があります一日中化合物を受信する動物を可能にする水を飲んで、それらを溶解しては投与も
    1. 口当たりの水に少量の砂糖を追加します。追加する正確な量は、マウスによって水の受け入れによって決まります。可能な最小の増分を使用します
    2. 水を変更する頻度は化合物の安定性に依存します。いくつかの物質の時間の経過とともに光に敏感なか沈殿物可能性があります

3。強制経口投与手順

マウスの直線または曲線の注入針の 1.5 x 20-25 ゲージを使用します。ラット、2-3 の直線または曲線注入針 x 18 20 ゲージを使用します。これらは、再利用可能なステンレス製の針、または使い捨て可能な針として利用できます。使い捨ての針は先端がシリコーン金属または柔軟なプラスチック製のシャフトを持つことができます

。 ボリュームおよび試験溶液の粘度に基づいて、選択したシリンジ注入針を
  1. アタッチ。厚い液体を投与、ルアーロック注射器が適しています。これらは、100 μ l の卒業式には 3 cc サイズから一般に使用可能です。これはより小さいボリュームや細かい単位での正確な線量のボリュームの必要性がある場合に適したできない場合があります
  2. 鏡筒に卒業式は針を回すことがなく読み取ることができるように針を注射器に貼付します。針は、食道に配置されている、一度回転が動物の死に終って食道を破裂します
  3. を管理する資料の適切なボリュームと注射器を埋める (最適なボリューム 5 ml/kg、最大ボリュームを = = 20 ml/kg) 4
  4. 適切な拘束はこの手順に不可欠です。7
    1. は手動で頭とスクラッフィングの基部の皮膚をつかんでマウスを抑制します。それは、頭から尾に直線で中断するように体が開催されることが重要です。任意の体のねじれ、食道に強制経口投与針の配置を阻害
    2. は、頭部には最小限のサイド ・ ツー ・ サイド動き、首筋をしっかりつかみます。後半部は、体の回転を防ぐために安定化する必要があります
    3. の gavaging、ラット、肩、首と動物にヤシの各側に人差し指と中指を使って把握 ' s バック。親指、3 番目、および 4 番目の指はまたは後方に前方に移動することができるされて動物を防ぐために胸を取り囲む必要があります。首の両側に指の位置はその頭を回すからネズミを防ぐことができます
    4. 体が直線であることが重要であり、口の中や咽頭、食道、胃に損傷することがなく経口針の配置を支援するためにないツイストします
    5. 頭に余分なサイド ・ ツー ・ サイド動きがないかどうかを確認します
    6. 後半部は身体の回転を防ぐために安定することがあります。カウンターまたはケージの上に残りの部分に戻るフィートをことができますこれは
  5. 物質の管理
    1. 下向きカーブと首の自然なカーブでインラインの針を配置。前歯と咽頭の後ろに向かって斜めに臼歯の間左右どちらから口の中に針を紹介します
    2. 針が口腔内には、機首まで強制経口投与の針を使用して頭を傾けます。ストレート針を使用する場合、これは特に重要です。針は、食道に簡単にスライドする必要があります。下針を押し込まないでください。任意の抵抗が感じられる場合、針をバックアウトもう一度やり直してください
    3. 化合物をそっと入金針が胃の位置、.
    4. 湾曲した針のローテーションが行われませんように、針を削除します
    5. 投与針を除去しより安全に動物を抑制する動物は、闘争が開始された場合
    6. 一方、動物は、チアノーゼや呼吸困難の兆候を示していますまたは注入針をすぐに削除する必要があります、口から流れるソリューションがある場合、手順を実行してそのケージに放出される動物
    7. 一般的に、最初に勧めだ gavaging ラットおよびマウスで特に腐食性物質量を提供小さな – 咳をテストする – 全体のボリュームが指定された前に。針が正しく配置されていない、肺に配信音量が小さいと動物回復で良いチャンスがある場合も、

< img alt =「図 2」src ="/files/ftp_upload/10388/10388fig2.jpg"/>
図 2。マウス (左) と (右) のラットでの経口

多くの実験が必要に化合物が経口または局所の経由時に、動物に投与されるメソッドはより実験的物質の自然吸気を模倣します

化合物の飲料水に溶解または動物が消費する食品に組み込まれての経口投与します。経口投与の別より正確な方法は経口太い針を使用し、胃に直接化合物を配置します。その一方で、外用剤は皮膚表面に直接配置することができます、通常適用する領域だけに影響を与えるためのものです。これらの戦略のそれぞれに利点および制限事項は、我々 はこのビデオで説明。次の我々 がこれらの複合管理テクニックを実行する方法を実演します実験動物といくつかの彼らのアプリケーション

プロトコルを詳しく説明する前に、の注意点、利点、およびこれらの技術の欠点を確認してみましょう。錠剤、カプセル、または液体で経口投与は、人間の最も一般的に使用される投与法です。ただし、錠剤やカプセルは、齧歯動物の実用的な飲料水や食べ物の化合物を溶解することによりには、一般的な経口投与します

飲んでから薬を飲むときの水、ショ糖はしばしば食味を高めるために水に追加されます。しかし、それは細かく通常の水の摂取量と甘い味のためない過度の飲酒を奨励するバランスする必要があります。良いルールは、10% ショ糖ソリューションを開始し、摂取量に応じて調整することです。動物を経口投与する別の方法は、専門的な食品です。フェンベンダゾール、それに法人などの化合物を投与は一般市販のフィードがあります。企業のフィード齧歯動物は、実験的要件を満たすために専門にされたテスト ダイエットを作成することも

経口投与のこの形態の利点は、非侵襲的、化合物を連続的に管理して人間の経口投与を模倣しています。しかし、化合物の摂取量は食品や水、化合物の安定性と檻の中の動物の数の受け入れに依存するために精度を欠いています。この非侵襲的方法が動物の福利に最適です正確な投与が実験に重要でない場合

より正確な経口投与の 1 つは胃に直接堆積物化合物の特定時および指定されたボリュームに経口を使用できます。ただし、適切な訓練が正しく拘束されてない場合、動物に深刻な被害が発生するため、この手法を実行する必要です

外用剤に来て、クリーム、ローション、軟膏、スプレー、ゲルが含まれます。通常、外用剤が適用されている領域のみに影響するものです。しかし、彼ら意図的または意図しない可能性があります血流に吸収することができます。この吸収によって決まる: 皮膚、表面積を利用、物質の濃度、接触時間、エージェントの脂溶性の状態

フィードや水を介して経口投与開始プロトコルを学ぼう経口および局所管理メソッドの背景について説明した、.

計算を投与、最初する必要があります管理する意図線量を知っています。第二に、あなたは体重を定めなければなりません。個々 の動物の重量を量るではなく、特に明記しない限りあなたの計算のためマウスまたはラットの歪みの平均体重を使用できます。第三に、ケージごとのペット数を認識できる必要があり、第四に、ケージあたり平均毎日水や食物の消費を知るする必要があります

覚えて、作り出された食べ物や溶存化合物と水を飲んでは、標準的な食品や化合物の不安定性のため水よりも頻繁に交換する必要があります。いくつかの化合物が光に敏感か時間をかけて沈殿があります

今、みましょう経口マウスおよびラットの経口を実行することによって正確な線量を管理する方法を学びます

の最初のステップは、プロシージャの適切な針を選択することです。これらはいずれかの再利用可能なステンレス鋼かプラスチック シャフトとシリコーン先端が柔軟な使い捨てから成っています。マウス、20-25 ゲージ ストレートか長さは 1.5 インチ曲面の注入針、適切です。ラット 18 20 ゲージ直線または曲線注入針 2-3 インチの長さを選択します。正しい針ゲージ、注射器の選択もボリュームと粘度に依存します。化合物管理を確認これらの要因の影響を理解するビデオ。厚い液体を投与、ルアーロック注射器が適しています

選択後、針を注射器を貼るように針を回すことがなくバレルに目盛りを読み取ることができます。これは任意の回転が動物の死でその結果、食道の壁を破裂したら食道に針が入っているので重要です。次に、管理するソリューションの適切なボリュームと注射器を埋める

このメソッドは気管に誤って配置を防ぐためにそのまま嚥下反射を意識した動物に常に実行必要があります。適切な拘束を用いたこのプロシージャにとって重要です。マウス、頭の根元で皮膚をつかみ、首筋をしっかりとホールドします。これは、ため頭がサイド ・ ツー ・ サイド動きのための最小限の機会を持ちます。また、体が頭から尾輪に直線で停止していることを確認します。任意のねじれと、食道に強制経口投与針の配置が低下します。後半部は、体の回転を防ぐためにも安定化する必要があります

ラットを抑制、肩首の両側に人差し指と中指を使用して把握します。これは側から側に、頭を回してからネズミを防ぐ。親指、3 番目、および 4 番目の指または後方に前進してから動物を防ぐために胸部を取り囲むよう

あなたは正しく、動物を拘束された後は、下にし首の自然なカーブに沿ったカーブ針を配置します。その後、切歯と臼歯咽頭の後ろに向かって斜めと、diastemata を左右どちらから口の中に針を紹介します。口腔内に針を配置するを使用してそれまで機首頭の後ろに傾ける。この時点で、針は、食道に簡単にスライドする必要があります。胃に針を配置すると、一度軽く化合物を預金します。その後、それを回転させることを確かめる、動物から針を抜きます。下針を強制的にしないことが重要です。任意の抵抗を感じる場合はそれを削除してからやり直してください。手順の実行中場合動物は、チアノーゼや呼吸困難や口から流れるソリューションがあるかどうかの兆候を示して、注入針をすぐに削除する必要があります、そのケージに動物をリリースする必要があります

は、最後に、みましょう実験動物における局所投与の手順を確認します。まず、動物を麻酔します。これは、よく動物の迅速な回復を可能にする高速、吸入動作を使用して。麻酔管理の詳細についてを参照してください別のこのコレクションの動画

次に、アプリケーションの領域からすべての毛皮を削除、バリカンを使用します。任意のカットを避けるためには、肌にクリッパーの平らな面に配置し、逆髪の成長の方向にひげをそる。水で皮膚をきれいし、ガーゼのパッドと乾燥します。今、綿の先端アプリケータを使用して、直接皮膚に物質を適用します。最高の結果を得るには、軟膏やクリーム、厚い層の使い捨てではなくいくつかの薄い層を適用します。小さな襟や動物を防ぐためにシールドにグルーミング、場所による化合物の局所的に適用される誤飲を防ぐために影響を受ける身体の部分に到達します。さらに、ケージの仲間から allogrooming を防ぐためには、動物を収容する個別に

これら代替投与経路の理解があるので、どのように彼らが使用されている生物医学研究における今日を見てみましょう

口腔の重要な用途の一つ強制経口投与は消化管への直接の影響を研究する物質の正確な管理です。ここでは、研究者は動物の胃の中に直接変換されたプロバイオティクス酵母を提供するのにこのメソッドを使用します。それから彼らは配信の微生物の付着を勉強する小腸から組織リンパ結節であるパイエル板のパッチを解剖した

食品媒介感染症の自然の手口を模倣する非侵襲的な経口ルートを使用できます。この実験では、科学者は、汚染された食物の摂取によるマウスにおける リステリア菌 の経口感染のためのモデルを開発しました。感染、研究者は小腸、結腸、脾臓、肝臓や胆嚢、これらの組織への感染の広がりを分析するような様々 な臓器を収穫します

最後に、一部の研究者は、紫外線は日焼けする可能性がありますのメカニズムを研究に興味があります。ここでは、科学者たちは、表皮メラニンは紫外線保護剤の生産を誘導する薬理学的物質を適用するのに局所ルートを使用しました。次に、彼らは紫外線による紅斑に対して局所的に適用されるエージェントの保護効果を調べる研究が人間に類似したプロトコルを使用します

だけ経口および局所投与に扱う化合物の管理方法のゼウスの 2 番目の割賦を見てきた。今フィードまたは水を使用して動物を経口投与 1 つどのように、1 つはより正確な経口経口投与を実行する方法を理解する必要があります。最後に、考慮事項と局所投与とこれらの様々 なテクニックの応用法を知るべきであります。いつも、見てくれてありがとうとして!

Summary

は経口投与飼料や水にそれを組み込む可能性がある場合、複合管理の最も安全な最も慈悲深い方法。経口正確な投与方法ですが非常にストレス、動物にも、技術的な熟練度が必要です。局所投与は、地域が適切に準備される動物のほとんど、あるいは全くの拘束によって行われます通常。投与経路を慎重に検討する必要があります動物に潜在的なストレス要因

References

  1. Turner, P.V., Pekow, C., Vasbinder, M. A., and Brabb, T. 2011. Administration of substances to laboratory animals: equipment and considerations, vehicle selection, and solution preparation. JAALAS. 50:5. 614-627.
  2. Shimizu, S. 2004. Routes of Administration in The Laboratory Mouse. Elsevier.
  3. Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. 2012. Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats. J. Vis. Exp. (67), e2771, doi:10.3791/2771.
  4. Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. 2011. Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider. JAALAS. 50, 600-613.
  5. Hoggart, A.F., Hoggart, J., Honerlaw, M., and Pelus, L.M. 2010. A spoonful of sugar helps the medicine go down: a novel technique to improve oral gavage in mice. JAALAS. 49:3. 329-334.
  6. Gonzales, C., Zaleska, M.M., Riddell, D.R., Atchison, K.P., Robshaw, A., Zhou, H., and Rizzo, S.J. 2014. Alternative method of oral administration by peanut butter pellet formulation results in target engagement of BACE1 and attenuation of gavage-induced stress responses in mice. Pharmacology, Biochemistry, and Behavior. 126:28-35.
  7. Zumkehr, B., Hermann, C., Theurillat, R., Thormann, W., Gottstein, B., and Hemphill, A. 2012. Voluntary ingestion of antiparasitic drugs emulsified in honey represents an alternative to gavage in mice. JAALAS. 51:2. 219-223.

1 塗布

  1. 軟膏やクリームを適用する前にシェービング、脱毛クリームを使用して領域からすべての毛皮を削除します。
  2. 徹底的にきれいにし、肌の乾燥です
  3. 綿の先端アプリケータや技術者による接触を避けるために直接配置ドロップダウンを介して直接皮膚に物質を適用します
  4. 最高の結果を得るには、軟膏やクリームの厚い層のワンタイム アプリケーションに反対しているいくつかの薄い層を適用します
  5. 別れの髪や露出した皮膚に滴を適用するによって液体を適用します
  6. 地域をグルーミング動物による全身吸収の可能性がある物質を局所的に適用するとき。予防対策は、事故の摂取または物質の早期除去を避けるために取られるべき。小さな襟や盾が影響に達することから動物を防ぐために利用可能なボディー パーツ。個々 の住宅は、ケージの仲間から allogrooming を防ぐためにも必要があります

Figure 1
図 1。マウスにおける局所アプリケーション

2。 経口投与

動物飼料や水を介して化合物の
  1. を提供するとき、体重に基づく最低限の毎日の線量を計算する必要があります。実験で使用されているマウスやラットの歪みの平均体重は、各動物の体重を指定しない限り、計算を実行する使用ことができ、個々 の線量計算します
  2. 、食物や水の摂取量を精密に測定するを必要とするプロトコル、動物個別に保存しておく必要があります
  3. 専門のフィードや、お菓子の実験的ニーズを満たすために製造が可能します。
    1. 標準的な食事を終日化合物を摂取する動物を可能にする作り出された 1 つに置き換えます
    2. 食品化合物の不安定性のための標準的な食品よりも頻繁に交換する必要があります
  4. 物質は可能性があります一日中化合物を受信する動物を可能にする水を飲んで、それらを溶解しては投与も
    1. 口当たりの水に少量の砂糖を追加します。追加する正確な量は、マウスによって水の受け入れによって決まります。可能な最小の増分を使用します
    2. 水を変更する頻度は化合物の安定性に依存します。いくつかの物質の時間の経過とともに光に敏感なか沈殿物可能性があります

3。強制経口投与手順

マウスの直線または曲線の注入針の 1.5 x 20-25 ゲージを使用します。ラット、2-3 の直線または曲線注入針 x 18 20 ゲージを使用します。これらは、再利用可能なステンレス製の針、または使い捨て可能な針として利用できます。使い捨ての針は先端がシリコーン金属または柔軟なプラスチック製のシャフトを持つことができます

。 ボリュームおよび試験溶液の粘度に基づいて、選択したシリンジ注入針を
  1. アタッチ。厚い液体を投与、ルアーロック注射器が適しています。これらは、100 μ l の卒業式には 3 cc サイズから一般に使用可能です。これはより小さいボリュームや細かい単位での正確な線量のボリュームの必要性がある場合に適したできない場合があります
  2. 鏡筒に卒業式は針を回すことがなく読み取ることができるように針を注射器に貼付します。針は、食道に配置されている、一度回転が動物の死に終って食道を破裂します
  3. を管理する資料の適切なボリュームと注射器を埋める (最適なボリューム 5 ml/kg、最大ボリュームを = = 20 ml/kg) 4
  4. 適切な拘束はこの手順に不可欠です。7
    1. は手動で頭とスクラッフィングの基部の皮膚をつかんでマウスを抑制します。それは、頭から尾に直線で中断するように体が開催されることが重要です。任意の体のねじれ、食道に強制経口投与針の配置を阻害
    2. は、頭部には最小限のサイド ・ ツー ・ サイド動き、首筋をしっかりつかみます。後半部は、体の回転を防ぐために安定化する必要があります
    3. の gavaging、ラット、肩、首と動物にヤシの各側に人差し指と中指を使って把握 ' s バック。親指、3 番目、および 4 番目の指はまたは後方に前方に移動することができるされて動物を防ぐために胸を取り囲む必要があります。首の両側に指の位置はその頭を回すからネズミを防ぐことができます
    4. 体が直線であることが重要であり、口の中や咽頭、食道、胃に損傷することがなく経口針の配置を支援するためにないツイストします
    5. 頭に余分なサイド ・ ツー ・ サイド動きがないかどうかを確認します
    6. 後半部は身体の回転を防ぐために安定することがあります。カウンターまたはケージの上に残りの部分に戻るフィートをことができますこれは
  5. 物質の管理
    1. 下向きカーブと首の自然なカーブでインラインの針を配置。前歯と咽頭の後ろに向かって斜めに臼歯の間左右どちらから口の中に針を紹介します
    2. 針が口腔内には、機首まで強制経口投与の針を使用して頭を傾けます。ストレート針を使用する場合、これは特に重要です。針は、食道に簡単にスライドする必要があります。下針を押し込まないでください。任意の抵抗が感じられる場合、針をバックアウトもう一度やり直してください
    3. 化合物をそっと入金針が胃の位置、.
    4. 湾曲した針のローテーションが行われませんように、針を削除します
    5. 投与針を除去しより安全に動物を抑制する動物は、闘争が開始された場合
    6. 一方、動物は、チアノーゼや呼吸困難の兆候を示していますまたは注入針をすぐに削除する必要があります、口から流れるソリューションがある場合、手順を実行してそのケージに放出される動物
    7. 一般的に、最初に勧めだ gavaging ラットおよびマウスで特に腐食性物質量を提供小さな – 咳をテストする – 全体のボリュームが指定された前に。針が正しく配置されていない、肺に配信音量が小さいと動物回復で良いチャンスがある場合も、

< img alt =「図 2」src ="/files/ftp_upload/10388/10388fig2.jpg"/>
図 2。マウス (左) と (右) のラットでの経口

多くの実験が必要に化合物が経口または局所の経由時に、動物に投与されるメソッドはより実験的物質の自然吸気を模倣します

化合物の飲料水に溶解または動物が消費する食品に組み込まれての経口投与します。経口投与の別より正確な方法は経口太い針を使用し、胃に直接化合物を配置します。その一方で、外用剤は皮膚表面に直接配置することができます、通常適用する領域だけに影響を与えるためのものです。これらの戦略のそれぞれに利点および制限事項は、我々 はこのビデオで説明。次の我々 がこれらの複合管理テクニックを実行する方法を実演します実験動物といくつかの彼らのアプリケーション

プロトコルを詳しく説明する前に、の注意点、利点、およびこれらの技術の欠点を確認してみましょう。錠剤、カプセル、または液体で経口投与は、人間の最も一般的に使用される投与法です。ただし、錠剤やカプセルは、齧歯動物の実用的な飲料水や食べ物の化合物を溶解することによりには、一般的な経口投与します

飲んでから薬を飲むときの水、ショ糖はしばしば食味を高めるために水に追加されます。しかし、それは細かく通常の水の摂取量と甘い味のためない過度の飲酒を奨励するバランスする必要があります。良いルールは、10% ショ糖ソリューションを開始し、摂取量に応じて調整することです。動物を経口投与する別の方法は、専門的な食品です。フェンベンダゾール、それに法人などの化合物を投与は一般市販のフィードがあります。企業のフィード齧歯動物は、実験的要件を満たすために専門にされたテスト ダイエットを作成することも

経口投与のこの形態の利点は、非侵襲的、化合物を連続的に管理して人間の経口投与を模倣しています。しかし、化合物の摂取量は食品や水、化合物の安定性と檻の中の動物の数の受け入れに依存するために精度を欠いています。この非侵襲的方法が動物の福利に最適です正確な投与が実験に重要でない場合

より正確な経口投与の 1 つは胃に直接堆積物化合物の特定時および指定されたボリュームに経口を使用できます。ただし、適切な訓練が正しく拘束されてない場合、動物に深刻な被害が発生するため、この手法を実行する必要です

外用剤に来て、クリーム、ローション、軟膏、スプレー、ゲルが含まれます。通常、外用剤が適用されている領域のみに影響するものです。しかし、彼ら意図的または意図しない可能性があります血流に吸収することができます。この吸収によって決まる: 皮膚、表面積を利用、物質の濃度、接触時間、エージェントの脂溶性の状態

フィードや水を介して経口投与開始プロトコルを学ぼう経口および局所管理メソッドの背景について説明した、.

計算を投与、最初する必要があります管理する意図線量を知っています。第二に、あなたは体重を定めなければなりません。個々 の動物の重量を量るではなく、特に明記しない限りあなたの計算のためマウスまたはラットの歪みの平均体重を使用できます。第三に、ケージごとのペット数を認識できる必要があり、第四に、ケージあたり平均毎日水や食物の消費を知るする必要があります

覚えて、作り出された食べ物や溶存化合物と水を飲んでは、標準的な食品や化合物の不安定性のため水よりも頻繁に交換する必要があります。いくつかの化合物が光に敏感か時間をかけて沈殿があります

今、みましょう経口マウスおよびラットの経口を実行することによって正確な線量を管理する方法を学びます

の最初のステップは、プロシージャの適切な針を選択することです。これらはいずれかの再利用可能なステンレス鋼かプラスチック シャフトとシリコーン先端が柔軟な使い捨てから成っています。マウス、20-25 ゲージ ストレートか長さは 1.5 インチ曲面の注入針、適切です。ラット 18 20 ゲージ直線または曲線注入針 2-3 インチの長さを選択します。正しい針ゲージ、注射器の選択もボリュームと粘度に依存します。化合物管理を確認これらの要因の影響を理解するビデオ。厚い液体を投与、ルアーロック注射器が適しています

選択後、針を注射器を貼るように針を回すことがなくバレルに目盛りを読み取ることができます。これは任意の回転が動物の死でその結果、食道の壁を破裂したら食道に針が入っているので重要です。次に、管理するソリューションの適切なボリュームと注射器を埋める

このメソッドは気管に誤って配置を防ぐためにそのまま嚥下反射を意識した動物に常に実行必要があります。適切な拘束を用いたこのプロシージャにとって重要です。マウス、頭の根元で皮膚をつかみ、首筋をしっかりとホールドします。これは、ため頭がサイド ・ ツー ・ サイド動きのための最小限の機会を持ちます。また、体が頭から尾輪に直線で停止していることを確認します。任意のねじれと、食道に強制経口投与針の配置が低下します。後半部は、体の回転を防ぐためにも安定化する必要があります

ラットを抑制、肩首の両側に人差し指と中指を使用して把握します。これは側から側に、頭を回してからネズミを防ぐ。親指、3 番目、および 4 番目の指または後方に前進してから動物を防ぐために胸部を取り囲むよう

あなたは正しく、動物を拘束された後は、下にし首の自然なカーブに沿ったカーブ針を配置します。その後、切歯と臼歯咽頭の後ろに向かって斜めと、diastemata を左右どちらから口の中に針を紹介します。口腔内に針を配置するを使用してそれまで機首頭の後ろに傾ける。この時点で、針は、食道に簡単にスライドする必要があります。胃に針を配置すると、一度軽く化合物を預金します。その後、それを回転させることを確かめる、動物から針を抜きます。下針を強制的にしないことが重要です。任意の抵抗を感じる場合はそれを削除してからやり直してください。手順の実行中場合動物は、チアノーゼや呼吸困難や口から流れるソリューションがあるかどうかの兆候を示して、注入針をすぐに削除する必要があります、そのケージに動物をリリースする必要があります

は、最後に、みましょう実験動物における局所投与の手順を確認します。まず、動物を麻酔します。これは、よく動物の迅速な回復を可能にする高速、吸入動作を使用して。麻酔管理の詳細についてを参照してください別のこのコレクションの動画

次に、アプリケーションの領域からすべての毛皮を削除、バリカンを使用します。任意のカットを避けるためには、肌にクリッパーの平らな面に配置し、逆髪の成長の方向にひげをそる。水で皮膚をきれいし、ガーゼのパッドと乾燥します。今、綿の先端アプリケータを使用して、直接皮膚に物質を適用します。最高の結果を得るには、軟膏やクリーム、厚い層の使い捨てではなくいくつかの薄い層を適用します。小さな襟や動物を防ぐためにシールドにグルーミング、場所による化合物の局所的に適用される誤飲を防ぐために影響を受ける身体の部分に到達します。さらに、ケージの仲間から allogrooming を防ぐためには、動物を収容する個別に

これら代替投与経路の理解があるので、どのように彼らが使用されている生物医学研究における今日を見てみましょう

口腔の重要な用途の一つ強制経口投与は消化管への直接の影響を研究する物質の正確な管理です。ここでは、研究者は動物の胃の中に直接変換されたプロバイオティクス酵母を提供するのにこのメソッドを使用します。それから彼らは配信の微生物の付着を勉強する小腸から組織リンパ結節であるパイエル板のパッチを解剖した

食品媒介感染症の自然の手口を模倣する非侵襲的な経口ルートを使用できます。この実験では、科学者は、汚染された食物の摂取によるマウスにおける リステリア菌 の経口感染のためのモデルを開発しました。感染、研究者は小腸、結腸、脾臓、肝臓や胆嚢、これらの組織への感染の広がりを分析するような様々 な臓器を収穫します

最後に、一部の研究者は、紫外線は日焼けする可能性がありますのメカニズムを研究に興味があります。ここでは、科学者たちは、表皮メラニンは紫外線保護剤の生産を誘導する薬理学的物質を適用するのに局所ルートを使用しました。次に、彼らは紫外線による紅斑に対して局所的に適用されるエージェントの保護効果を調べる研究が人間に類似したプロトコルを使用します

だけ経口および局所投与に扱う化合物の管理方法のゼウスの 2 番目の割賦を見てきた。今フィードまたは水を使用して動物を経口投与 1 つどのように、1 つはより正確な経口経口投与を実行する方法を理解する必要があります。最後に、考慮事項と局所投与とこれらの様々 なテクニックの応用法を知るべきであります。いつも、見てくれてありがとうとして!

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