複合管理 II

Lab Animal Research

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Overview

ソース: ケイ ・ スチュワート、RLATG、RVT CMAR;ヴァレリー A. シュレーダー、RVT、RLATG。ノートルダムのノートルダム大学

化合物の管理は、しばしば動物研究の不可欠なコンポーネントです。多くの要因は、化合物が正しく配信されることを確保するために評価する必要があります。投与経路の吸収のメカニズムに影響を与えます。物質の特性の導入 (pH、粘度、濃度) 管理のどちらのルートが selected.1,2,3 を規定することがあります

Cite this Video

JoVE Science Education Database. ラボ動物研究の必需品. 複合管理 II. JoVE, Cambridge, MA, (2019).

Principles

2 つの主な投与経路は経腸 (消化管) を経由して、非経口的 (投与消化管の外側)。投与経路の選択は、主に研究の要件によって決まります。非経口投与する主な利点は、化合物は肝代謝、高いバイオアベイラビリティにさらされないことです。ただしより物質の自然吸気を模倣するために経口的に投与する化合物を必要とする多くの実験的プロトコルがあります。利用する最適なルートは、化合物のテストのプロパティによって決まります。

最も一般的に使用される人間の投与法は、経口投与します。これは、錠剤、カプセル、または薬の液体の形態で行われます。いずれかの水を飲んで、数式に化合物のテストを組み込んだ特殊な食品を使用して化合物を溶解することにより、配置するマウスおよびラットの一般的な経口投与には、錠剤やカプセルの管理は齧歯類で実用的ですお菓子の化合物。飲料水を介して投与、ショ糖はしばしば食味を高めるために水に追加されます。しかし、それは細かく通常の水の摂取量と甘い味のためない過度の飲酒を奨励するバランスする必要があります。

経口はマウスやラット.の両方にストレスが繰り返し多くの研究が示しています。アニマル ・ ケアのスタッフの労力が4, 5だも。化合物 - フェンベンダゾール、齧歯動物では、それに組み込まれての寄生虫を除去するために使用されるなど投与が一般市販のフィードがあります。他の企業は、抗炎症薬、鎮痛薬、駆虫薬、または抗生物質が含まれている薬用の御馳走を提供します。マウスおよびラットのための作り出された食事を製造する飼料会社実験的要件を満たすために専門にされたテスト ダイエットが作成されます。多くの実験室は、蜂蜜、ピーナッツ バター、またはフルーツ風味ゼラチンを使って自分のお菓子を策定しました。4, 5

経口投与は、化合物の摂取量は食品や水、化合物の安定性と檻の中の動物の数の受け入れに依存するため、精度を欠いています。ただし、正確な投与が実験に重要でない場合、この非侵襲的投与法は動物の健康に最適です。

化合物の動物の胃の中に直接の沈着を特定の時間に、指定したボリュームでの経口、経腸投与のはるかに正確な方法です。ただし、トレーニングは成功のために必要です。動物の適切な拘束は、この手法の成功に不可欠です。口腔、咽頭、喉頭、気管、食道、胃への損傷は、頭と体の不適切な配置、起因できます。動物は頭がそのような傷害を防ぐために、工夫することができるようにしっかりとつかんだこと必要があります。

注入針は再利用可能または使い捨て可能なフォーマットで利用できます。高価な使い捨て針を使用は、複数の動物を投与するとき交差汚染の脅威を削除します。強制経口投与針、20-22 ゲージ マウス用とラット用 18-20 ゲージからのいくつかのサイズがあります。針の選択、投与する動物、液体のボリュームと溶液の粘性のサイズによって決まります。

口腔 gavaging 気管に針を置くことの可能性を減少する理性的な動物で実行してください。嚥下反射として食道に適切な配置を促進するギャグを意識した動物を保持します。研究は、ショ糖経口針をプレコート嚥下反射を誘発したことを示す実施し、食道に針を渡すために必要な時間の量を減少します。6 

皮膚の表面に直接配置されている外用剤は一般的にそれを適用する領域だけに影響するものです。これらは、クリーム、ローション、軟膏、発泡体、またはジェルをすることができます。動物は、エージェントが適用される領域を新郎に傾向があるので、経口摂取の毒性を考慮されなければなりません。

局所的に投与される化合物は、真皮層と毛包と付属腺によって皮下の空間を介して吸収されるように処方されています。化合物の吸収に影響する要因には、皮膚の状態、表面積を利用、皮膚の表面に接触している時間の長さ、コンパウンドの脂溶性物質の濃度があります。よく水和と薄い皮膚の層吸収が短縮されます。

局所的に物質を適用すること、地域をグルーミング動物による全身への吸収のためのチャンスがあります。予防対策は、事故の摂取または物質の早期除去を避けるために取られるべき。小さな襟や盾が影響に達することから動物を防ぐために利用可能なボディー パーツ。個々 の住宅は、ケージの仲間から allogrooming を防ぐために必要があります。

Procedure

1. 塗布

  1. 軟膏やクリームを適用する前にすべての毛皮をシェービング、脱毛クリームを使用して領域から削除します。
  2. 徹底的にきれいにし、肌の乾燥します。
  3. 綿の先端アプリケータや技術者による接触を避けるために直接配置ドロップダウンを介して直接皮膚に物質を適用します。
  4. 最高の結果を得るには、軟膏やクリームの厚い層のワンタイム アプリケーションに反対しているいくつかの薄い層を適用します。
  5. 液体を適用するには、別れの髪や露出した皮膚に滴を適用します。
  6. 物質を局所的に適用するとき、領域をグルーミング動物による全身吸収の可能性があります。予防対策は、事故の摂取または物質の早期除去を避けるために取られるべき。小さな襟や盾が影響に達することから動物を防ぐために利用可能なボディー パーツ。個々 の住宅は、ケージの仲間から allogrooming を防ぐために必要があります。

Figure 1
図 1。マウスに塗布。

2. 経口投与

  1. 化合物を動物飼料や水を介して提供すること、体重に基づいて最低限の毎日の線量が計算する必要があります。実験で使用されているマウスやラットの歪みの平均重量は、各動物の体重を指定は、各個人の投与量計算、計算を実行する使用できます。
  2. その食物や水の摂取量を精密に測定する必要なプロトコル、動物は個別に収納する必要があります。
  3. 専門のフィードまたは扱う実験ニーズに合わせて製作いたします。
    1. 標準的な食事を終日化合物を摂取する動物を可能にする作り出された 1 つに置き換えます。
    2. 食べ物は化合物の不安定性のための標準的な食品よりも頻繁に交換する必要があります。
  4. 物質は、終日化合物を受信する動物の飲料水に溶解によって管理される場合があります。
    1. 口当たりに水に少量の砂糖が追加されます。追加する正確な量は、マウスによって水の受け入れによって決まります。可能な最小の増分を使用します。
    2. 水を変更する頻度は化合物の安定性に依存します。いくつかの物質は、時間の経過とともに光に敏感なまたは沈殿物をあるかもしれない。

3. 強制経口投与の手順

直線または曲線の注入針の 1.5 x 20-25 ゲージは、マウスに使用されます。ラット、2-3 の直線または曲線注入針 x 18 20 ゲージを使用します。これらは、再利用可能なステンレス製の針、または使い捨て可能な針として利用できます。使い捨ての針は、シリコン チップと金属や柔軟なプラスチック製のシャフトを持つことができます。

  1. ボリュームおよび試験溶液の粘度に基づいて選択した注射器に注入針を取り付けます。厚い液体を投与、ルアーロック注射器が適しています。これらは、100 μ l の卒業式には 3 cc サイズから一般に使用可能です。これはより小さいボリュームや細かい単位での正確な線量のボリュームの必要性がある場合に適したできない場合があります。
  2. 針を回すことがなくバレルに目盛りを読み取ることができるように針を注射器に貼付します。針は、食道に配置されている、一度任意の回転することができます動物の死に終って食道破裂します。
  3. 管理する資料の適切なボリュームと注射器を埋める (最適なボリューム 5 ml/kg、最大ボリュームを = = 20 ml/kg)4
  4. この手順には、適切な拘束が欠かせません。7
    1. 手動でヘッドのスクラッフィング基地で皮膚をつかんでマウスを抑制します。それは、頭から尾に直線で中断するように体が開催されることが重要です。体をねじると、食道に強制経口投与針の配置が低下します。
    2. 頭がある最小限のサイド ・ ツー ・ サイド動きを持つように、首筋をしっかりつかみます。後半部は、体の回転を防ぐために安定化する必要があります。
    3. Gavaging ラットの肩、首や動物の背中にヤシの各側に人差し指と中指を使用して把握します。親指、3 番目、および 4 番目の指はまたは後方に前方に移動することができるされて動物を防ぐために胸を取り囲む必要があります。首の両側に指の位置は、ラットがその頭を回すことを防ぎます。
    4. 体が直線であることが重要であり、口や咽頭、食道、胃に損傷することがなく経口針の配置を支援するためにないツイスト。
    5. 頭には過剰なサイド ・ ツー ・ サイド動きがないことを確認します。
    6. 後半部は身体の回転を防ぐために安定することがあります。これは、カウンターまたはケージの上に残りの部分に戻るフィートを許可するで。
  5. 物質の管理
    1. 下向きカーブと首の自然なカーブでインラインの針を配置します。切歯と臼歯咽頭の後方の角度での間、右または左の側から、口の中に針を紹介します。
    2. 針は、口腔内が、機首まで強制経口投与の針を使用して頭を傾けます。ストレート針を使用する場合、これは特に重要です。針は、食道に簡単にスライドする必要があります。下針を押し込まないでください。すべての抵抗が感じられる場合は、針をバックアウトもう一度やり直してください。
    3. 針が胃内の位置に、優しく化合物を沈殿物します。
    4. 湾曲した針のローテーションが行われませんように、針を抜きます。
    5. 動物は、闘争が開始された場合注入針を除去しより安全に動物を抑制します。
    6. 動物は、チアノーゼや呼吸困難の兆候を示して 場合は投薬の針がすぐにする必要があります、口から流れるソリューションがある場合、手順を実行しながら削除、そのケージに動物をリリースします。
    7. 一般に、gavaging ラットおよびマウスで特に腐食性物質だと最初-全体のボリュームが指定された前に咳-をテストするための少量を提供することをお勧め。つまり、針が正しく配置されていない場合、肺に配信音量が小さいと動物の回復に良いチャンスがあります。

Figure 2
図 2。マウス (左) と (右) のラットでの経口。

多くの実験メソッドはより実験的物質の自然吸気を模倣、化合物は、経口または局所の経由時に、動物に投与されることが必要です。

経口投与の化合物は飲料水に溶解または動物が消費する食品に組み込むできます。経口投与の別より正確な方法は経口太い針を使用し、胃に直接化合物を配置します。その一方で、外用剤は皮膚表面に直接配置することができます、通常適用する領域だけに影響を与えるためのものです。これらの戦略のそれぞれに利点および制限事項は、我々 はこのビデオで説明。次の実験動物や、アプリケーションのいくつかのこれらの化合物の管理技術を実行する方法を紹介します。

プロトコルを掘り下げる前に注意点、利点、およびこれらの技術の欠点を確認してみましょう。錠剤、カプセル、または液体で経口投与は、人間の最も一般的に使用される投与法です。しかし、錠剤やカプセルは、齧歯動物の実用的な一般的な経口投与には飲料水や食品の化合物を溶解することにより。

飲料水を介して投与、ショ糖はしばしば食味を高めるために水に追加されます。しかし、それは細かく通常の水の摂取量と甘い味のためない過度の飲酒を奨励するバランスする必要があります。良いルールは、10% ショ糖ソリューションを開始し、摂取量に応じて調整することです。動物を経口投与する別の方法は、専門的な食品です。フェンベンダゾール、それに法人などの化合物を投与は一般市販のフィードがあります。企業のフィード齧歯動物実験的要件を満たすために専門にされたテスト ダイエットを作成できます。

経口投与のこの形態の利点は、非侵襲的、化合物を連続的に管理して人間の経口投与を模倣しています。しかし、化合物の摂取量は食品や水、化合物の安定性と檻の中の動物の数の受け入れに依存するために精度を欠いています。正確な投薬が実験に重要でない場合、この非侵襲的な方法は動物の福利に最適です。

経口投与のより正確な特定時および指定したボリュームに、胃の中に直接化合物を預金経口、使えます。ただし、正しく拘束されてない場合、動物に深刻な被害が発生するため、この手法を実行する適切な訓練が必要です。

外用剤に来て、クリーム、ローション、軟膏、スプレー、ゲルが含まれます。通常、外用剤が適用されている領域のみに影響するものです。しかし、彼ら意図的または意図しない可能性があります血流に吸収することができます。この吸収によって決まる: 皮膚、表面積を利用、物質の濃度、接触時間、エージェントの脂溶性の状態。

今では我々 は、経口および局所管理メソッドの背景を議論して、フィードや水を介して経口投与開始プロトコルを勉強しましょう。

最初の計算を投与、管理する意図線量を知っている必要があります。第二に、あなたは体重を定めなければなりません。個々 の動物の重量を量るではなく、特に明記しない限りあなたの計算のためマウスまたはラットの歪みの平均体重を使用できます。第三に、ケージごとのペット数の認識と 4 番目をする必要があります、平均毎日水やケージあたりの食品消費を知っている必要があります。

覚えておいて、作り出された食べ物や溶存化合物と水を飲んでは、標準的な食品や化合物の不安定性のため水よりも頻繁に交換する必要があります。いくつかの化合物が光に敏感か時間をかけて沈殿することがあります。

今、経口マウスおよびラットの経口を実行することによって正確な線量を管理する方法を学びましょう。

最初のステップは、プロシージャの適切な針を選択することです。これらはいずれかの再利用可能なステンレス鋼かプラスチック シャフトとシリコーン先端が柔軟な使い捨てから成っています。マウス、20-25 ゲージ ストレートか長さは 1.5 インチ曲面の注入針、適切です。ラット 18 20 ゲージ直線または曲線注入針 2-3 インチの長さを選択します。正しい針ゲージ、注射器の選択もボリュームと粘度に依存します。化合物管理を確認これらの要因の影響を理解するビデオ。厚い液体を投与、ルアーロック注射器が適しています。

選択後、針を回すことがなくバレルに目盛りを読み取ることができるように針を注射器に貼付します。これは任意の回転が動物の死でその結果、食道の壁を破裂したら食道に針が入っているので重要です。次に、管理するソリューションの適切なボリュームで注射器を満たしなさい。

このメソッドは、気管に誤って配置を防ぐためにそのまま嚥下反射を意識した動物で常に実行してください。適切な拘束を用いたこのプロシージャにとって重要です。マウス、頭の根元で皮膚をつかみ、首筋をしっかりとホールドします。これは、ため頭がサイド ・ ツー ・ サイド動きのための最小限の機会を持ちます。また、体が頭から尾輪に直線で停止していることを確認します。任意のねじれと、食道に強制経口投与針の配置が低下します。後半部は、体の回転を防ぐためにも安定化する必要があります。

ラットを牽制するには、肩首の両側に人差し指と中指を使用して把握します。これは側から側に、頭を回してからネズミを防ぐ。親指、3 番目、および 4 番目の指または後方に前進してから動物を防ぐために胸部を取り囲むましょう。

あなたは正しく動物を拘束された、一度下にし首の自然なカーブに沿ったカーブで針を位置します。その後、切歯と臼歯咽頭の後ろに向かって斜めと、diastemata を左右どちらから口の中に針を紹介します。口腔内に針を配置するを使用してそれまで機首頭の後ろに傾ける。この時点で、針は、食道に簡単にスライドする必要があります。胃に針を配置すると、一度軽く化合物を預金します。その後、それを回転させることを確かめる、動物から針を抜きます。下針を強制的にしないことが重要です。任意の抵抗を感じる場合はそれを削除してからやり直してください。プロシージャの実行中、動物は、チアノーゼや呼吸困難の兆候を示している場合、または口から流れるソリューションがある場合は、注入針をすぐに削除する必要があります、そのケージに動物をリリースする必要があります。

最後に、実験動物における局所投与の手順を確認してみましょう。まず、動物を麻酔します。これは、よく動物の迅速な回復を可能にする高速、吸入動作を使用して。麻酔管理の詳細については、このコレクション内の別のビデオを参照してください。

次に、アプリケーションの領域からすべての毛皮の毛のクリッパーの削除を使用します。任意のカットを避けるためには、肌にクリッパーの平らな面に配置し、逆髪の成長の方向にひげをそる。水で皮膚をきれいし、ガーゼのパッドと乾燥します。今、綿の先端アプリケータを使用して、直接皮膚に物質を適用します。最高の結果を得るには、軟膏やクリーム、厚い層の使い捨てではなくいくつかの薄い層を適用します。防ぐために局所的に適用されるの誤飲は、小さな襟や動物が影響を受ける体の部分に到達するを防ぐためにシールド グルーミング、場所による化合物します。さらに、ケージの仲間から allogrooming を防ぐためには、動物は個別に収容する必要があります。

これらの代替投与経路の理解がある場合は、どのように彼らが使用されている生物医学研究における今日を見てみましょう。

経口の重要な用途の 1 つは、消化管への直接の影響を研究する物質の正確な管理です。ここでは、研究者は動物の胃の中に直接変換されたプロバイオティクス酵母を提供するのにこのメソッドを使用します。彼らは解剖パイエル板のパッチ配信の微生物の付着を勉強する小腸から組織リンパ結節であります。

非侵襲的な経口経路は、食品媒介感染症の自然の手口を模倣する使用できます。この実験では、科学者は、汚染された食物の摂取によるマウスにおけるリステリア菌の経口感染のためのモデルを開発しました。次の感染症研究者は小腸、結腸、脾臓、肝臓や胆嚢、これらの組織への感染の広がりを分析するような様々 な臓器を収穫しました。

最後に、一部の研究者は、日焼けにつながる可能性がありますどの UV 放射のメカニズムを研究に興味があります。ここでは、科学者たちは、表皮メラニンは紫外線保護剤の生産を誘導する薬理学的物質を適用するのに局所ルートを使用しました。次に、彼らは紫外線による紅斑に対して局所的に適用されるエージェントの保護効果を調べる研究が人間に類似したプロトコルを使用しました。

経口および局所投与に扱う化合物の管理方法のゼウスの 2 番目の割賦を見てきただけ。今フィードまたは水を使用して動物を経口投与 1 つどのように、1 つはより正確な経口経口投与を実行する方法を理解する必要があります。最後に、考慮事項と局所投与とこれらの様々 なテクニックの応用法を知るべきであります。いつも見てくれてありがとう!

Summary

化合物管理の最も安全な最も慈悲深い方法は経口投与の場合、飼料や水にそれを組み込むことが可能だからです。経口正確な投与方法ですが非常にストレス、動物にも、技術的な熟練度が必要です。局所投与は、地域が適切に準備される動物のほとんど、あるいは全くの拘束によって行われます通常。投与経路を慎重に検討する必要があります動物に潜在的なストレス要因は。

References

  1. Turner, P.V., Pekow, C., Vasbinder, M. A., and Brabb, T. 2011. Administration of substances to laboratory animals: equipment and considerations, vehicle selection, and solution preparation. JAALAS. 50:5. 614-627.
  2. Shimizu, S. 2004. Routes of Administration in The Laboratory Mouse. Elsevier.
  3. Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. 2012. Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats. J. Vis. Exp. (67), e2771, doi:10.3791/2771.
  4. Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. 2011. Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider. JAALAS. 50, 600-613.
  5. Hoggart, A.F., Hoggart, J., Honerlaw, M., and Pelus, L.M. 2010. A spoonful of sugar helps the medicine go down: a novel technique to improve oral gavage in mice. JAALAS. 49:3. 329-334.
  6. Gonzales, C., Zaleska, M.M., Riddell, D.R., Atchison, K.P., Robshaw, A., Zhou, H., and Rizzo, S.J. 2014. Alternative method of oral administration by peanut butter pellet formulation results in target engagement of BACE1 and attenuation of gavage-induced stress responses in mice. Pharmacology, Biochemistry, and Behavior. 126:28-35.
  7. Zumkehr, B., Hermann, C., Theurillat, R., Thormann, W., Gottstein, B., and Hemphill, A. 2012. Voluntary ingestion of antiparasitic drugs emulsified in honey represents an alternative to gavage in mice. JAALAS. 51:2. 219-223.

1. 塗布

  1. 軟膏やクリームを適用する前にすべての毛皮をシェービング、脱毛クリームを使用して領域から削除します。
  2. 徹底的にきれいにし、肌の乾燥します。
  3. 綿の先端アプリケータや技術者による接触を避けるために直接配置ドロップダウンを介して直接皮膚に物質を適用します。
  4. 最高の結果を得るには、軟膏やクリームの厚い層のワンタイム アプリケーションに反対しているいくつかの薄い層を適用します。
  5. 液体を適用するには、別れの髪や露出した皮膚に滴を適用します。
  6. 物質を局所的に適用するとき、領域をグルーミング動物による全身吸収の可能性があります。予防対策は、事故の摂取または物質の早期除去を避けるために取られるべき。小さな襟や盾が影響に達することから動物を防ぐために利用可能なボディー パーツ。個々 の住宅は、ケージの仲間から allogrooming を防ぐために必要があります。

Figure 1
図 1。マウスに塗布。

2. 経口投与

  1. 化合物を動物飼料や水を介して提供すること、体重に基づいて最低限の毎日の線量が計算する必要があります。実験で使用されているマウスやラットの歪みの平均重量は、各動物の体重を指定は、各個人の投与量計算、計算を実行する使用できます。
  2. その食物や水の摂取量を精密に測定する必要なプロトコル、動物は個別に収納する必要があります。
  3. 専門のフィードまたは扱う実験ニーズに合わせて製作いたします。
    1. 標準的な食事を終日化合物を摂取する動物を可能にする作り出された 1 つに置き換えます。
    2. 食べ物は化合物の不安定性のための標準的な食品よりも頻繁に交換する必要があります。
  4. 物質は、終日化合物を受信する動物の飲料水に溶解によって管理される場合があります。
    1. 口当たりに水に少量の砂糖が追加されます。追加する正確な量は、マウスによって水の受け入れによって決まります。可能な最小の増分を使用します。
    2. 水を変更する頻度は化合物の安定性に依存します。いくつかの物質は、時間の経過とともに光に敏感なまたは沈殿物をあるかもしれない。

3. 強制経口投与の手順

直線または曲線の注入針の 1.5 x 20-25 ゲージは、マウスに使用されます。ラット、2-3 の直線または曲線注入針 x 18 20 ゲージを使用します。これらは、再利用可能なステンレス製の針、または使い捨て可能な針として利用できます。使い捨ての針は、シリコン チップと金属や柔軟なプラスチック製のシャフトを持つことができます。

  1. ボリュームおよび試験溶液の粘度に基づいて選択した注射器に注入針を取り付けます。厚い液体を投与、ルアーロック注射器が適しています。これらは、100 μ l の卒業式には 3 cc サイズから一般に使用可能です。これはより小さいボリュームや細かい単位での正確な線量のボリュームの必要性がある場合に適したできない場合があります。
  2. 針を回すことがなくバレルに目盛りを読み取ることができるように針を注射器に貼付します。針は、食道に配置されている、一度任意の回転することができます動物の死に終って食道破裂します。
  3. 管理する資料の適切なボリュームと注射器を埋める (最適なボリューム 5 ml/kg、最大ボリュームを = = 20 ml/kg)4
  4. この手順には、適切な拘束が欠かせません。7
    1. 手動でヘッドのスクラッフィング基地で皮膚をつかんでマウスを抑制します。それは、頭から尾に直線で中断するように体が開催されることが重要です。体をねじると、食道に強制経口投与針の配置が低下します。
    2. 頭がある最小限のサイド ・ ツー ・ サイド動きを持つように、首筋をしっかりつかみます。後半部は、体の回転を防ぐために安定化する必要があります。
    3. Gavaging ラットの肩、首や動物の背中にヤシの各側に人差し指と中指を使用して把握します。親指、3 番目、および 4 番目の指はまたは後方に前方に移動することができるされて動物を防ぐために胸を取り囲む必要があります。首の両側に指の位置は、ラットがその頭を回すことを防ぎます。
    4. 体が直線であることが重要であり、口や咽頭、食道、胃に損傷することがなく経口針の配置を支援するためにないツイスト。
    5. 頭には過剰なサイド ・ ツー ・ サイド動きがないことを確認します。
    6. 後半部は身体の回転を防ぐために安定することがあります。これは、カウンターまたはケージの上に残りの部分に戻るフィートを許可するで。
  5. 物質の管理
    1. 下向きカーブと首の自然なカーブでインラインの針を配置します。切歯と臼歯咽頭の後方の角度での間、右または左の側から、口の中に針を紹介します。
    2. 針は、口腔内が、機首まで強制経口投与の針を使用して頭を傾けます。ストレート針を使用する場合、これは特に重要です。針は、食道に簡単にスライドする必要があります。下針を押し込まないでください。すべての抵抗が感じられる場合は、針をバックアウトもう一度やり直してください。
    3. 針が胃内の位置に、優しく化合物を沈殿物します。
    4. 湾曲した針のローテーションが行われませんように、針を抜きます。
    5. 動物は、闘争が開始された場合注入針を除去しより安全に動物を抑制します。
    6. 動物は、チアノーゼや呼吸困難の兆候を示して 場合は投薬の針がすぐにする必要があります、口から流れるソリューションがある場合、手順を実行しながら削除、そのケージに動物をリリースします。
    7. 一般に、gavaging ラットおよびマウスで特に腐食性物質だと最初-全体のボリュームが指定された前に咳-をテストするための少量を提供することをお勧め。つまり、針が正しく配置されていない場合、肺に配信音量が小さいと動物の回復に良いチャンスがあります。

Figure 2
図 2。マウス (左) と (右) のラットでの経口。

多くの実験メソッドはより実験的物質の自然吸気を模倣、化合物は、経口または局所の経由時に、動物に投与されることが必要です。

経口投与の化合物は飲料水に溶解または動物が消費する食品に組み込むできます。経口投与の別より正確な方法は経口太い針を使用し、胃に直接化合物を配置します。その一方で、外用剤は皮膚表面に直接配置することができます、通常適用する領域だけに影響を与えるためのものです。これらの戦略のそれぞれに利点および制限事項は、我々 はこのビデオで説明。次の実験動物や、アプリケーションのいくつかのこれらの化合物の管理技術を実行する方法を紹介します。

プロトコルを掘り下げる前に注意点、利点、およびこれらの技術の欠点を確認してみましょう。錠剤、カプセル、または液体で経口投与は、人間の最も一般的に使用される投与法です。しかし、錠剤やカプセルは、齧歯動物の実用的な一般的な経口投与には飲料水や食品の化合物を溶解することにより。

飲料水を介して投与、ショ糖はしばしば食味を高めるために水に追加されます。しかし、それは細かく通常の水の摂取量と甘い味のためない過度の飲酒を奨励するバランスする必要があります。良いルールは、10% ショ糖ソリューションを開始し、摂取量に応じて調整することです。動物を経口投与する別の方法は、専門的な食品です。フェンベンダゾール、それに法人などの化合物を投与は一般市販のフィードがあります。企業のフィード齧歯動物実験的要件を満たすために専門にされたテスト ダイエットを作成できます。

経口投与のこの形態の利点は、非侵襲的、化合物を連続的に管理して人間の経口投与を模倣しています。しかし、化合物の摂取量は食品や水、化合物の安定性と檻の中の動物の数の受け入れに依存するために精度を欠いています。正確な投薬が実験に重要でない場合、この非侵襲的な方法は動物の福利に最適です。

経口投与のより正確な特定時および指定したボリュームに、胃の中に直接化合物を預金経口、使えます。ただし、正しく拘束されてない場合、動物に深刻な被害が発生するため、この手法を実行する適切な訓練が必要です。

外用剤に来て、クリーム、ローション、軟膏、スプレー、ゲルが含まれます。通常、外用剤が適用されている領域のみに影響するものです。しかし、彼ら意図的または意図しない可能性があります血流に吸収することができます。この吸収によって決まる: 皮膚、表面積を利用、物質の濃度、接触時間、エージェントの脂溶性の状態。

今では我々 は、経口および局所管理メソッドの背景を議論して、フィードや水を介して経口投与開始プロトコルを勉強しましょう。

最初の計算を投与、管理する意図線量を知っている必要があります。第二に、あなたは体重を定めなければなりません。個々 の動物の重量を量るではなく、特に明記しない限りあなたの計算のためマウスまたはラットの歪みの平均体重を使用できます。第三に、ケージごとのペット数の認識と 4 番目をする必要があります、平均毎日水やケージあたりの食品消費を知っている必要があります。

覚えておいて、作り出された食べ物や溶存化合物と水を飲んでは、標準的な食品や化合物の不安定性のため水よりも頻繁に交換する必要があります。いくつかの化合物が光に敏感か時間をかけて沈殿することがあります。

今、経口マウスおよびラットの経口を実行することによって正確な線量を管理する方法を学びましょう。

最初のステップは、プロシージャの適切な針を選択することです。これらはいずれかの再利用可能なステンレス鋼かプラスチック シャフトとシリコーン先端が柔軟な使い捨てから成っています。マウス、20-25 ゲージ ストレートか長さは 1.5 インチ曲面の注入針、適切です。ラット 18 20 ゲージ直線または曲線注入針 2-3 インチの長さを選択します。正しい針ゲージ、注射器の選択もボリュームと粘度に依存します。化合物管理を確認これらの要因の影響を理解するビデオ。厚い液体を投与、ルアーロック注射器が適しています。

選択後、針を回すことがなくバレルに目盛りを読み取ることができるように針を注射器に貼付します。これは任意の回転が動物の死でその結果、食道の壁を破裂したら食道に針が入っているので重要です。次に、管理するソリューションの適切なボリュームで注射器を満たしなさい。

このメソッドは、気管に誤って配置を防ぐためにそのまま嚥下反射を意識した動物で常に実行してください。適切な拘束を用いたこのプロシージャにとって重要です。マウス、頭の根元で皮膚をつかみ、首筋をしっかりとホールドします。これは、ため頭がサイド ・ ツー ・ サイド動きのための最小限の機会を持ちます。また、体が頭から尾輪に直線で停止していることを確認します。任意のねじれと、食道に強制経口投与針の配置が低下します。後半部は、体の回転を防ぐためにも安定化する必要があります。

ラットを牽制するには、肩首の両側に人差し指と中指を使用して把握します。これは側から側に、頭を回してからネズミを防ぐ。親指、3 番目、および 4 番目の指または後方に前進してから動物を防ぐために胸部を取り囲むましょう。

あなたは正しく動物を拘束された、一度下にし首の自然なカーブに沿ったカーブで針を位置します。その後、切歯と臼歯咽頭の後ろに向かって斜めと、diastemata を左右どちらから口の中に針を紹介します。口腔内に針を配置するを使用してそれまで機首頭の後ろに傾ける。この時点で、針は、食道に簡単にスライドする必要があります。胃に針を配置すると、一度軽く化合物を預金します。その後、それを回転させることを確かめる、動物から針を抜きます。下針を強制的にしないことが重要です。任意の抵抗を感じる場合はそれを削除してからやり直してください。プロシージャの実行中、動物は、チアノーゼや呼吸困難の兆候を示している場合、または口から流れるソリューションがある場合は、注入針をすぐに削除する必要があります、そのケージに動物をリリースする必要があります。

最後に、実験動物における局所投与の手順を確認してみましょう。まず、動物を麻酔します。これは、よく動物の迅速な回復を可能にする高速、吸入動作を使用して。麻酔管理の詳細については、このコレクション内の別のビデオを参照してください。

次に、アプリケーションの領域からすべての毛皮の毛のクリッパーの削除を使用します。任意のカットを避けるためには、肌にクリッパーの平らな面に配置し、逆髪の成長の方向にひげをそる。水で皮膚をきれいし、ガーゼのパッドと乾燥します。今、綿の先端アプリケータを使用して、直接皮膚に物質を適用します。最高の結果を得るには、軟膏やクリーム、厚い層の使い捨てではなくいくつかの薄い層を適用します。防ぐために局所的に適用されるの誤飲は、小さな襟や動物が影響を受ける体の部分に到達するを防ぐためにシールド グルーミング、場所による化合物します。さらに、ケージの仲間から allogrooming を防ぐためには、動物は個別に収容する必要があります。

これらの代替投与経路の理解がある場合は、どのように彼らが使用されている生物医学研究における今日を見てみましょう。

経口の重要な用途の 1 つは、消化管への直接の影響を研究する物質の正確な管理です。ここでは、研究者は動物の胃の中に直接変換されたプロバイオティクス酵母を提供するのにこのメソッドを使用します。彼らは解剖パイエル板のパッチ配信の微生物の付着を勉強する小腸から組織リンパ結節であります。

非侵襲的な経口経路は、食品媒介感染症の自然の手口を模倣する使用できます。この実験では、科学者は、汚染された食物の摂取によるマウスにおけるリステリア菌の経口感染のためのモデルを開発しました。次の感染症研究者は小腸、結腸、脾臓、肝臓や胆嚢、これらの組織への感染の広がりを分析するような様々 な臓器を収穫しました。

最後に、一部の研究者は、日焼けにつながる可能性がありますどの UV 放射のメカニズムを研究に興味があります。ここでは、科学者たちは、表皮メラニンは紫外線保護剤の生産を誘導する薬理学的物質を適用するのに局所ルートを使用しました。次に、彼らは紫外線による紅斑に対して局所的に適用されるエージェントの保護効果を調べる研究が人間に類似したプロトコルを使用しました。

経口および局所投与に扱う化合物の管理方法のゼウスの 2 番目の割賦を見てきただけ。今フィードまたは水を使用して動物を経口投与 1 つどのように、1 つはより正確な経口経口投与を実行する方法を理解する必要があります。最後に、考慮事項と局所投与とこれらの様々 なテクニックの応用法を知るべきであります。いつも見てくれてありがとう!

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