微量移液器的介绍

General Laboratory Techniques

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Summary

微量移液器是一种用来转移微量液体溶液的常用实验室仪器。微量移液器有一个使用范围,需要使用三种不同大小的一次性枪头中的一种,来准确转移0.5微升到5000微升的体积。微量移液器的工作原理是排除移液器腔里面的空气,用产生的真空来吸取一定量体积的溶液。它们可用于转移细胞重悬液来做不同的细胞实验,在不同的分析检测中上样样品,以及机械破碎组织来产生单细胞悬浮液。微量移液器是极为有用的实验室工具,并且使用方便,只需简单的指导和训练。

本短片中,JoVE为初学者介绍在实验室中使用微量移液器所有的技巧,窍门和细节 。

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JoVE Science Education Database. 常用的实验室技术. 微量移液器的介绍. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

微量移液器是一种精确测量小体积液体的重要仪器。该研究工具在全球许多实验室里都有,它们有多种形状和大小。尽管微量移液器有不同种类,但是它们用来准确量取微升级容量的液体的原理都类似。

微量移液器使用一次性枪头,与移液器类似,这些枪头也有相应不同的规格。

所有的微量移液器都有相同的用于吸取和排出液体的基本组件。活塞位于移液器的顶端,通过其位置的移动,压紧或者释放,来吸取或者排出液体。

体积调节刻度盘用于改变需要转移的液体体积。

刻度盘读出体积数值的方向是从上到下。对于不同的微量移液器,在体积测量中,刻度盘上的数字反映了不同的数量级。在这里你看到的体积数值是370微升。

一次性的枪头装在微量移液器的底部。

枪头弹出钮和枪头弹出杆共同作用可以弹出需要丢弃的枪头。

微量移液器家族包括几个不同规格的成员,分别 用于不同精度范围液体体积的转移。

这里您看到的是根据转移体积范围排列的移液器家族成员。例如,爸爸级别的P-1000可以准确吸取从200微升到1000微升的液体,而宝宝级别的,P-2,则可以量取从0.2微升到2微升的液体。

每一个家族成员都可通过移液器顶端活塞上的数字和颜色来识别,这样可以清楚的知道它们是哪种移液器以及它们能够精确转移液体的体积范围 。

在某些情况下,其它的微量移液器也会在实验中出现,例如舅舅P5000、阿姨P100和外甥P10。这个大家庭各个成员共同协作,完成从0.2微升到5000微升体积范围的液体转移。

为了进一步保证精准地转移液体,不同规格的移液器枪头, 在很多时候,为了易于识别,也带有不同的颜色。在转移液体的时候,白色的移液器枪头通常转移0.5到2.5微升,黄色枪头一般是1到200微升,而蓝色枪头则是200到1000微升。

使用微量移液器时,首先根据要吸取的液体体积选择合适规格的移液器。移液器的正确选择会直接影响实验的成败。

首先,调节刻度盘到所需要的体积数值。要增加吸取的体积,逆时针方向转动刻度盘,转过需要数值的三分之一,然后慢慢减少直至最终刻度。如果要减少吸取的体积,顺时针转动刻度盘。

要记住,不同的微量移液器,刻度盘中的这些数字代表不同的数量级。例如,在左侧,我们看到的是P1000,读取的数值是370微升。千位数是0,百位数是3,而十位数是7。右侧的则是P200,读取的数值是159微升。百位数是1,十位数是5,而个位数则是9。

设定刻度之后,选择枪头。

现在,以垂直方向将微量移液器的扁平部位握在掌中,食指突出。

轻轻将活塞向下压到第一个停止点的中途,或者当你开始感觉到阻力增大。

保持对活塞的压力,把枪头浸入样品液面下1至3毫米。轻轻释放活塞到原来的位置,等待1秒钟,直至液体进入到枪头,然后移动移液器和枪头离开样品。

当活塞被释放到原来的位置,液体会被由于空气释放而造成的真空吸入。

检查一下枪头,确定所需要量的液体被吸入,而且枪头内没有气泡。

转移样品的时候,握住移液器使其和接受液体的容器壁呈10到45度角。这样可以防止气泡的形成。为排出液体,缓缓压活塞直至第一停止点,可以将液体释放。然后,加大压力,压活塞直至第二停止点,这样就从枪头中打出剩余的液体。

将枪头移出容器,然后释放活塞到原位。

现在使用弹出按钮小心地将移液器枪头丢弃到适当的容器中。这时要非常小心,因为弹出的枪头相当于自动发射武器,有可能会伤害到您实验室的同事。

为了保证微量移液器正常工作并保护内部的体积调节机制,一定不要将体积刻度盘拧过微量移液器的量取范围。否则,你会损坏仪器。

为了避免交叉污染,在每个样品转移液体之后要更换枪头。

操作者的稳定性对于使用微量移液器很重要。平稳的活塞压力能够产生最好的实验结果。最后请记住,要保持你的微量移液器在最佳使用状态,在不使用的时候一定要将其置于垂直状态。

现在我们已经全面介绍了微量移液器的基本操作和原理,下面讨论一些常用的实验室用途,包括微量体积转移以及这种仪器的其他用途。

在很多实验中会经常使用微量移液器来转移细胞悬浮液到培养板中。

配以某些特殊的枪头,微量移液器可在分析技术当中进行上样操作,如DNA凝胶电泳。

微量移液器还可以用于对组织进行机械性拆分,从而得到单个细胞。

在实验室中,还有其他几种不同的微量移液器,它们的工作原理也是基于排气法。

连续微量移液器的优点在于:一次吸取较大体积的溶液后,可以连续分装较小体积的溶液。这种移液器在分装等体积样品到大量容器中的时候非常有用。

多通道微量移液器通常用于转移20到200微升范围内的体积。在上样96孔板的时候,可以一次转移一整行样品。

您刚观看的是JoVE对微量移液器的介绍。在本视频中,我们回顾了以下内容:什么是微量移液器,它是如何工作的,如何吸取和分配一定体积的溶液,一些安全措施,以及微量移液器的不同用途。感谢您的观看,请记住为您的实验选择合适的移液器。

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