In diesem Protokoll haben wir demonstrieren, wie man ein Mikro-Laufwerk-Array für chronische elektrophysiologischen Ableitungen in Ratten zu fabrizieren.
Chronische Aufnahme von großen Populationen von Neuronen ist eine wertvolle Technik für die Untersuchung der Funktion neuronaler Schaltkreise in wach verhalten Ratten. Lightweight Aufnahmegeräte Durchführung einer hochdichten Anordnung von Tetroden ermöglichen die gleichzeitige Überwachung der Tätigkeit der Dutzende bis Hunderte von einzelnen Neuronen. Hier beschreiben wir ein Protokoll für die Herstellung von Mikro-Laufwerk-Array mit 21 unabhängig voneinander beweglichen Mikro-Laufwerke. Dieses Gerät wurde erfolgreich von Hippocampus und kortikalen Neuronen in unserem Labor Datensatz verwendet. Wir zeigen, wie eine maßgeschneiderte, 3-D gedruckt Kunststoffboden, dass die Mikro-Antriebe halten vorbereiten. Wir zeigen, wie die einzelnen Mikro-Laufwerke erstellen und wie Sie die komplette Mikro-Laufwerk-Array zu montieren. Weitere Vorbereitung des Laufwerk-Array für die chirurgische Implantation, wie die Herstellung von Tetroden, das Laden von Tetroden in das Laufwerk-Array und Vergoldung, wird in einem nachfolgenden Video Artikel behandelt.
Dieses Protokoll beschreibt die allgemeinen Merkmale des Mikro-Laufwerk Bauprozess. Es wurde erfolgreich geändert werden, um Drive Arrays mit mehreren Aufnahmen Ziele oder kleineren Arrays für Aufnahmen in Mäusen zu erzeugen. Neben der Aufzeichnung aus dem Hippocampus, verwenden viele Forscher diese Laufwerke zu kortikalen und subkortikalen Strukturen Ziel. Der Einsatz von längeren Schrauben erforderlich, um von tieferen Hirnstrukturen aufzuzeichnen. Mit umfangreichen Modifikationen an den Antrieb Basis, Antriebe mo…
Wir möchten Linus D. Sonne und Jeenah Jung, der den Einsatz von Computer entworfene, 3-D Druck-Laufwerke in unserem Labor für die Aufnahme von Mäusen stammten anzuerkennen. Darüber hinaus möchten wir alle ehemaligen und derzeitigen Wilson Lab Mitgliedern für ihre Beiträge zur Mikro-Laufwerk und Tetrode Technologieentwicklung im Labor bestätigen.
3D-printed plastic parts | Material | American Precision Prototyping (www.approto.com) | Parts are printed by stereolithography (SLA) using DSM 14120 ‘ABS-like’, DSM 11120 ‘Watershed’ or Accura 55 resins. Request high resolution, no sandblasting. | |
stainless steel tubing | Material | Small Parts (www.smallparts.com) | Cut to custom length and deburred. Sizes: 13 Ga (1pc @ 10 mm), 15 Ga (1pc @ 50 mm), 20 Ga thin wall (21pcs @ 5 mm), 23 Ga (21pcs @ 14 mm) | |
Dental cement powder | Material | A-M Systems (www.a-msystems.com) | 525000 | |
Dental cement solvent | Material | A-M Systems | 526000 | |
Electrode interface board | Material | Neuralynx (www.neuralynx.com) | EIB-81 | |
micro-drive screws | Material | Advanced Machining and Tooling (www.amtmfg.com) | Custom made screws with M1.2×0.25 threads (1.2mm major diameter; 0.25 mm thread pitch) | |
‘Tap-Ease’ tapping lubricant | Tool | AGS Company | TA-2 | Available from MSC Industrial Supply (www.mscdirect.com) |
Polyimide tubing | Material | IWG High Performance Conductors (www.iwghpc.com) | Sizes: 30 Ga (outer diam: 0.0071″, inner diam: 0.0116″) 5 mil (nominal outer diam: 0.0055″, wall: 0.0010″) | |
Cordless drill/driver | Tool | DeWalt (www.dewalt.com) | DC750KA | Any drill/driver with low-speed setting will do. |
Variable-Speed Rotary Tool Kit with Flex-Shaft | Tool | Dremel (www.dremel.com) | 3956-02 | |
Razor blades | Tool | VWR (www.vwr.com) | 55411-050 | |
Watch glass | Tool | VWR | 66112-107 | |
Tap for custom screws | Tool | Balax | 01302 | M1.2×0.25 Thredfloer thread-forming tap. Available from MSC Industrial Supply. |
Taps | Tool | Small Parts | HSBT-0172, HSBT-0080 | 1-72, 0-80 bottoming taps |
Pin vise | Tool | Vargus | 3SHC1–I | To hold taps. Available from MSC Industrial Supply |
Drill bits | Tool | Small Parts | Sizes: 65, 61, 1.55mm | |
Benchtop vise | Tool | Panavise | 301 | Available from DigiKey (www.digikey.com). |
No.2 Dumont forceps | Tool | Stoelting (www.stoeltingco.com) | 52100-27 | Used for inserting 20 Ga thin wall sleeves. |
5-minute epoxy | Tool | Allied Electronics (www.alliedelec.com) | ||
Accu-Tek Carbofib Tip Tweezers | Tool | Aven (www.aveninc.com) | 18768 (Pattern 304) | Used for handling polyimide tubing. |
Micro Dissecting Scissors | Tool | Biomedical Research Instruments (www.biomedinstr.com) | 25-1000 | Used for cutting polyimide carrier tubes |
Xcelite 378M Pliers | Tool | Newark | 96F8903 | Used for handling stainless steel tubing and for construction of custom screwdriver. |
mini pin vise | Tool | MSC Industrial Supply (www.mscdirect.com) | 00920314 | Used as a handle for custom made screwdriver. |