Micro-Drive Array עבור כרונית In vivo: כונן ייצור
Summary
בפרוטוקול זה אנו מדגימים כיצד לפברק מערך כונן מיקרו להקלטות אלקטרו כרונית בחולדות.
Abstract
הקלטה כרונית של אוכלוסיות גדולות של נוירונים היא טכניקה ערך עבור לומד את הפונקציה של מעגלים עצביים אצל חולדות מתנהג ער. מכשירי הקלטה קל נושא מערך צפיפות גבוהה של tetrodes לאפשר ניטור סימולטני של פעילות של עשרות עד מאות נוירונים בודדים. כאן אנו מתארים פרוטוקול עבור ייצור של מערך כונן מיקרו עם 21 עצמאי מטלטלין מיקרו כוננים. מכשיר זה שימש בהצלחה להקליט נוירונים בהיפוקמפוס ואת קליפת המוח במעבדה שלנו. אנחנו מראים איך להכין אישית מעוצבת, 3-D בסיס פלסטיק מודפס כי תקיים מיקרו כוננים. אנו מדגימים כיצד לבנות את הפרט מיקרו כוננים כיצד להרכיב את מערך שלם כונן מיקרו. הכנה נוספת של מערך הכונן להשתלה כירורגית, כגון ייצור של tetrodes, הטעינה של tetrodes לתוך מערך את הכונן ציפוי זהב, מכוסה במאמר וידאו הבאים.
Protocol
Discussion
פרוטוקול זה מתאר את המאפיינים הכלליים של תהליך מיקרו כונן את הבניין. זה כבר שונה בהצלחה לייצר כונן arrays עם מטרות הקלטה מרובות או מערכים קטנים יותר עבור הקלטות בעכברים. בנוסף להקלטה של ההיפוקמפוס, חוקרים רבים להשתמש כוננים אלה למקד מבנים קורטיקליים ותת קורטיקליים. ?…
Acknowledgements
ברצוננו להודות לינוס ד סאן Jeenah יונג, אשר מקורו השימוש במחשב מעוצב, 3-D כוננים מודפסים במעבדה שלנו להקלטה מעכברים. בנוסף, ברצוננו להודות לכל חברי בעבר ובהווה וילסון מעבדה על תרומתם כונן מיקרו והטכנולוגיה tetrode הפיתוח במעבדה.
Materials
| 3D-printed plastic parts | Material | American Precision Prototyping (www.approto.com) | Parts are printed by stereolithography (SLA) using DSM 14120 ‘ABS-like’, DSM 11120 ‘Watershed’ or Accura 55 resins. Request high resolution, no sandblasting. | |
| stainless steel tubing | Material | Small Parts (www.smallparts.com) | Cut to custom length and deburred. Sizes: 13 Ga (1pc @ 10 mm), 15 Ga (1pc @ 50 mm), 20 Ga thin wall (21pcs @ 5 mm), 23 Ga (21pcs @ 14 mm) | |
| Dental cement powder | Material | A-M Systems (www.a-msystems.com) | 525000 | |
| Dental cement solvent | Material | A-M Systems | 526000 | |
| Electrode interface board | Material | Neuralynx (www.neuralynx.com) | EIB-81 | |
| micro-drive screws | Material | Advanced Machining and Tooling (www.amtmfg.com) | Custom made screws with M1.2×0.25 threads (1.2mm major diameter; 0.25 mm thread pitch) | |
| ‘Tap-Ease’ tapping lubricant | Tool | AGS Company | TA-2 | Available from MSC Industrial Supply (www.mscdirect.com) |
| Polyimide tubing | Material | IWG High Performance Conductors (www.iwghpc.com) | Sizes: 30 Ga (outer diam: 0.0071″, inner diam: 0.0116″) 5 mil (nominal outer diam: 0.0055″, wall: 0.0010″) | |
| Cordless drill/driver | Tool | DeWalt (www.dewalt.com) | DC750KA | Any drill/driver with low-speed setting will do. |
| Variable-Speed Rotary Tool Kit with Flex-Shaft | Tool | Dremel (www.dremel.com) | 3956-02 | |
| Razor blades | Tool | VWR (www.vwr.com) | 55411-050 | |
| Watch glass | Tool | VWR | 66112-107 | |
| Tap for custom screws | Tool | Balax | 01302 | M1.2×0.25 Thredfloer thread-forming tap. Available from MSC Industrial Supply. |
| Taps | Tool | Small Parts | HSBT-0172, HSBT-0080 | 1-72, 0-80 bottoming taps |
| Pin vise | Tool | Vargus | 3SHC1–I | To hold taps. Available from MSC Industrial Supply |
| Drill bits | Tool | Small Parts | Sizes: 65, 61, 1.55mm | |
| Benchtop vise | Tool | Panavise | 301 | Available from DigiKey (www.digikey.com). |
| No.2 Dumont forceps | Tool | Stoelting (www.stoeltingco.com) | 52100-27 | Used for inserting 20 Ga thin wall sleeves. |
| 5-minute epoxy | Tool | Allied Electronics (www.alliedelec.com) | ||
| Accu-Tek Carbofib Tip Tweezers | Tool | Aven (www.aveninc.com) | 18768 (Pattern 304) | Used for handling polyimide tubing. |
| Micro Dissecting Scissors | Tool | Biomedical Research Instruments (www.biomedinstr.com) | 25-1000 | Used for cutting polyimide carrier tubes |
| Xcelite 378M Pliers | Tool | Newark | 96F8903 | Used for handling stainless steel tubing and for construction of custom screwdriver. |
| mini pin vise | Tool | MSC Industrial Supply (www.mscdirect.com) | 00920314 | Used as a handle for custom made screwdriver. |
References
- Yamamoto, J., Wilson, M. A. Large-scale chronically implantable precision motorized microdrive array for freely behaving animals. J. Neurophysiol. 100 (4), 2430-2440 (2008).
