Summary

Micro-Array aandrijving voor chronische In vivo Opname: Tetrode Assembly

Published: April 22, 2009
doi:

Summary

In dit protocol hebben we laten zien hoe fabriceren en voorwaarde tetrodes voor gebruik met een micro-drive array, die werd ontworpen voor chronische elektrofysiologische opnames in ratten. Daarnaast illustreren we de laatste fase van de micro-drive-array constructie, die het installeren van de grond draden en een beschermende kegel bevat.

Abstract

De Tetrode, een bundel van vier elektroden, heeft zich bewezen als een waardevol instrument voor het gelijktijdig opnemen van meerdere neuronen in-vivo worden. De differentiële amplitude van de actiepotentiaal handtekeningen over de kanalen van een Tetrode zorgt voor de isolatie van single-eenheid activiteit van multi-unit signalen. De mogelijkheid om nauwkeurig de stereotaxische locatie en diepte van de Tetrode is van cruciaal belang voor het bestuderen van gecoördineerde neurale activiteit in gebieden van de hersenen. In combinatie met een micro-drive array, is het mogelijk om nauwkeurige plaatsing en een stabiele controle van de vele tetrodes in de loop van dagen tot weken. In dit protocol, laten we zien hoe te fabriceren en voorwaarde tetrodes met behulp van elementaire gereedschappen en materialen, de tetrodes installeren in een multi-drive Tetrode array voor chronische in-vivo-opname in de rat, maken aarddraad aansluitingen op de micro-drive array, en Bevestig een beschermende kegel op de micro-drive-array om de tetrodes te beschermen tegen fysiek contact met de omgeving.

Protocol

1. Fabricage van tetrodes Begin van de bouw van een Tetrode door het verkrijgen van een 50 cm lang, polyimide geïsoleerd, ni-chroom draad met een diameter van 12,5 micron kern. Vouw de draad in de helft. Laat je vingers langs het paar om ze te laten aan elkaar kleven. Zorg ervoor dat de twee draden hebben een goed contact gedurende hun gehele lengte. Vouw het paar door die de twee uiteinden samen. Zorg ervoor dat de lus gevormd op de ene kant niet geknikt is. Snijd de vier draden op de niet-lus uit…

Discussion

Dit protocol is de tweede aflevering van een tweedelige protocol: "Micro-drive array voor chronische in-vivo-opname." De combinatie van de micro-drive array en Tetrode is een krachtig hulpmiddel voor het verkrijgen van gelijktijdige opnames van een groot aantal neuronen in een wakker, gedragen dier voorbereiding. Hopelijk hebben we u met alle noodzakelijke informatie voor u nodig hebt om te beginnen of elektrofysiologische opnames te verbeteren in uw eigen laboratorium.

De gemotori…

Acknowledgements

We willen graag juni Yamamoto te erkennen voor zijn ontwerp en de bouw van de automatische, gemotoriseerde Tetrode twister apparaat afgebeeld in de video. Daarnaast zouden we graag alle vroegere en huidige Wilson Lab-leden bedanken voor hun bijdragen aan micro-drive en Tetrode technologie-ontwikkeling in het lab.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Panavise Tool Panavise Model 301 Holds either micro-drive array or serrated scissors
Modified Xcelite 378M Pliers Tool Newark 96F8903 For inserting connector board pins. To make, remove 2mm from one tip of the pliers.
Slow Cure Glue Material Great Planes (Champaign, IL) GPMR6015 To glue the tetrode to the micro-drive
Gold Plating Solution Material Neuralynx Sifco Selectron Gold NC Contains gold particles for electroplating
Current Generator Tool World Precision Instruments A365D-B A.K.A. Stimulus Isolator. Used to electroplate gold solution onto electrode tips.
Impedance Meter Tool BAK Electronics IMP-1 / 6662 / 2788 To check impedance of electrodes
Hot Air Gun Tool Steinel (Germany) HG 3002 LCD To fuse electrodes together to make tetrode
Accu-Tek Carbofib Tip Tweezers Tool Aven (Ann Arbor, MI) 18768 (Pattern 304) For handling tetrodes
Alligator Clip Tool Fine Science Tools 18050-35 A.K.A. Bulldog serrefine. To clip the tetrodes together during twisting
Micro Dissecting Scissors Tool Biomedical Research Instruments 25-1000 For general cutting of tetrode/electrode wire
Iris Toughcut Serrated Scissors Tool Fine Science Tools 14058-09 For final cut of tetrodes
Teflon Coated Stainless Steel Wire Material A-M Systems (Carlsborg, WA) 790500 Ground wire
12.5 micron nichrome wire Material Kanthal Palm Coast Rediohm-800 1/4 HARD PAC COATING Polyimide coated micro-wire for making tetrodes.
Tetrode Twister Tool Neuralynx Tetrode Assembly Station Increases the speed and consistency of tetrode fabrication.
Silver Paint Material GC Electronics 22-023 For connecting the micro-electrode wires of the tetrode to the connector pins (see Discussion)
X-Acto Knife Handle Material MSC Direct X3001 For constructing a micro-drive holding device.
26 Pin, 2 Row Connector Material Mill-max 852-10-026-30-001000 For constructing a micro-drive holding device.

References

  1. Gray, C. M., Maldonado, P. E., Wilson, M., McNaughton, B. Tetrodes markedly improve the reliability and yield of multiple single-unit isolation from multi-unit recordings in cat striate cortex. J. Neurosci. Methods. 63 (1-2), 43-54 (1995).

Play Video

Cite This Article
Nguyen, D. P., Layton, S. P., Hale, G., Gomperts, S. N., Davidson, T. J., Kloosterman, F., Wilson, M. A. Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Tetrode Assembly. J. Vis. Exp. (26), e1098, doi:10.3791/1098 (2009).

View Video