Micro-Array aandrijving voor chronische In vivo Opname: Tetrode Assembly
Summary
In dit protocol hebben we laten zien hoe fabriceren en voorwaarde tetrodes voor gebruik met een micro-drive array, die werd ontworpen voor chronische elektrofysiologische opnames in ratten. Daarnaast illustreren we de laatste fase van de micro-drive-array constructie, die het installeren van de grond draden en een beschermende kegel bevat.
Abstract
De Tetrode, een bundel van vier elektroden, heeft zich bewezen als een waardevol instrument voor het gelijktijdig opnemen van meerdere neuronen in-vivo worden. De differentiële amplitude van de actiepotentiaal handtekeningen over de kanalen van een Tetrode zorgt voor de isolatie van single-eenheid activiteit van multi-unit signalen. De mogelijkheid om nauwkeurig de stereotaxische locatie en diepte van de Tetrode is van cruciaal belang voor het bestuderen van gecoördineerde neurale activiteit in gebieden van de hersenen. In combinatie met een micro-drive array, is het mogelijk om nauwkeurige plaatsing en een stabiele controle van de vele tetrodes in de loop van dagen tot weken. In dit protocol, laten we zien hoe te fabriceren en voorwaarde tetrodes met behulp van elementaire gereedschappen en materialen, de tetrodes installeren in een multi-drive Tetrode array voor chronische in-vivo-opname in de rat, maken aarddraad aansluitingen op de micro-drive array, en Bevestig een beschermende kegel op de micro-drive-array om de tetrodes te beschermen tegen fysiek contact met de omgeving.
Protocol
Discussion
Dit protocol is de tweede aflevering van een tweedelige protocol: "Micro-drive array voor chronische in-vivo-opname." De combinatie van de micro-drive array en Tetrode is een krachtig hulpmiddel voor het verkrijgen van gelijktijdige opnames van een groot aantal neuronen in een wakker, gedragen dier voorbereiding. Hopelijk hebben we u met alle noodzakelijke informatie voor u nodig hebt om te beginnen of elektrofysiologische opnames te verbeteren in uw eigen laboratorium.
De gemotori…
Acknowledgements
We willen graag juni Yamamoto te erkennen voor zijn ontwerp en de bouw van de automatische, gemotoriseerde Tetrode twister apparaat afgebeeld in de video. Daarnaast zouden we graag alle vroegere en huidige Wilson Lab-leden bedanken voor hun bijdragen aan micro-drive en Tetrode technologie-ontwikkeling in het lab.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Panavise | Tool | Panavise | Model 301 | Holds either micro-drive array or serrated scissors |
| Modified Xcelite 378M Pliers | Tool | Newark | 96F8903 | For inserting connector board pins. To make, remove 2mm from one tip of the pliers. |
| Slow Cure Glue | Material | Great Planes (Champaign, IL) | GPMR6015 | To glue the tetrode to the micro-drive |
| Gold Plating Solution | Material | Neuralynx | Sifco Selectron Gold NC | Contains gold particles for electroplating |
| Current Generator | Tool | World Precision Instruments | A365D-B | A.K.A. Stimulus Isolator. Used to electroplate gold solution onto electrode tips. |
| Impedance Meter | Tool | BAK Electronics | IMP-1 / 6662 / 2788 | To check impedance of electrodes |
| Hot Air Gun | Tool | Steinel (Germany) | HG 3002 LCD | To fuse electrodes together to make tetrode |
| Accu-Tek Carbofib Tip Tweezers | Tool | Aven (Ann Arbor, MI) | 18768 (Pattern 304) | For handling tetrodes |
| Alligator Clip | Tool | Fine Science Tools | 18050-35 | A.K.A. Bulldog serrefine. To clip the tetrodes together during twisting |
| Micro Dissecting Scissors | Tool | Biomedical Research Instruments | 25-1000 | For general cutting of tetrode/electrode wire |
| Iris Toughcut Serrated Scissors | Tool | Fine Science Tools | 14058-09 | For final cut of tetrodes |
| Teflon Coated Stainless Steel Wire | Material | A-M Systems (Carlsborg, WA) | 790500 | Ground wire |
| 12.5 micron nichrome wire | Material | Kanthal Palm Coast | Rediohm-800 1/4 HARD PAC COATING | Polyimide coated micro-wire for making tetrodes. |
| Tetrode Twister | Tool | Neuralynx | Tetrode Assembly Station | Increases the speed and consistency of tetrode fabrication. |
| Silver Paint | Material | GC Electronics | 22-023 | For connecting the micro-electrode wires of the tetrode to the connector pins (see Discussion) |
| X-Acto Knife Handle | Material | MSC Direct | X3001 | For constructing a micro-drive holding device. |
| 26 Pin, 2 Row Connector | Material | Mill-max | 852-10-026-30-001000 | For constructing a micro-drive holding device. |
References
- Gray, C. M., Maldonado, P. E., Wilson, M., McNaughton, B. Tetrodes markedly improve the reliability and yield of multiple single-unit isolation from multi-unit recordings in cat striate cortex. J. Neurosci. Methods. 63 (1-2), 43-54 (1995).
