Summary

Micro-Drive Array עבור כרונית In vivo: Tetrode האסיפה

Published: April 22, 2009
doi:

Summary

בפרוטוקול זה אנו מדגימים כיצד לפברק tetrodes תנאי לשימוש עם מערך מיקרו הכונן, אשר תוכנן עבור הקלטות אלקטרו כרונית בחולדות. בנוסף, אנו ממחישים בשלבים הסופיים של הבנייה מיקרו הכונן מערך, הכולל חוטים הקרקע התקנה חרוט מגן.

Abstract

Tetrode, חבילה של ארבע אלקטרודות, הוכיחה להיות כלי רב ערך עבור הקלטה בו זמנית של מספר רב של נוירונים ב-vivo. ההפרש משרעת פוטנציאל הפעולה של חתימות על ערוצי tetrode מאפשר בידוד של פעילות יחידה אחת מיחידת רב אותות. היכולת לשלוט במדויק את המיקום ואת עומק stereotaxic של tetrode הוא קריטי לחקר פעילות עצבית מתואמת על פני אזורים במוח. בשילוב עם מערך מיקרו הכונן, ניתן להשיג את המיקום המדויק ושליטה יציבה של tetrodes רבים במשך ימים עד שבועות. בפרוטוקול זה, אנו מדגימים כיצד לפברק tetrodes תנאי שימוש בכלים בסיסיים וחומרים, להתקין את tetrodes לתוך מערך רב כונן tetrode עבור כרוני ב-vivo הקלטה בחולדה, להפוך חוט קשרים הקרקע למערך כונן מיקרו, ואת לצרף חרוט מגן על מערך הכונן מיקרו על מנת להגן על tetrodes מכל מגע פיזי עם הסביבה.

Protocol

1. המצאה של tetrodes בגין בניית tetrode אחד על ידי קבלת 50 ס"מ, polyimide מבודדים, Ni-chrome תיל עם ליבה בקוטר 12.5 מיקרון. מקפלים את החוט לשניים. הפעל את האצבעות לאורך צמד כדי לגרום להם להישאר ביחד. ודא זוג חוטים יש מגע טוב לאורך כל אורכו ?…

Discussion

פרוטוקול זה הוא הפרק השני של פרוטוקול חלק שני: "Micro-כונן מערך עבור כרוני ב-vivo ההקלטה." השילוב של מערך הכונן מיקרו tetrode הוא כלי רב עוצמה להשגת הקלטות סימולטני של נוירונים רבים ער, מתנהג הכנה של בעלי חיים. יש לקוות, סיפקנו לכם את כל המידע הדרוש תצטרך להתחיל או לשפר את ה…

Acknowledgements

ברצוננו להודות יוני ימאמוטו לעיצוב שלו ובנייה של מכשיר אוטומטי, ממונע מסלף tetrode המתואר בסרט. בנוסף, ברצוננו להודות לכל חברי בעבר ובהווה וילסון מעבדה על תרומתם כונן מיקרו והטכנולוגיה tetrode הפיתוח במעבדה.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Panavise Tool Panavise Model 301 Holds either micro-drive array or serrated scissors
Modified Xcelite 378M Pliers Tool Newark 96F8903 For inserting connector board pins. To make, remove 2mm from one tip of the pliers.
Slow Cure Glue Material Great Planes (Champaign, IL) GPMR6015 To glue the tetrode to the micro-drive
Gold Plating Solution Material Neuralynx Sifco Selectron Gold NC Contains gold particles for electroplating
Current Generator Tool World Precision Instruments A365D-B A.K.A. Stimulus Isolator. Used to electroplate gold solution onto electrode tips.
Impedance Meter Tool BAK Electronics IMP-1 / 6662 / 2788 To check impedance of electrodes
Hot Air Gun Tool Steinel (Germany) HG 3002 LCD To fuse electrodes together to make tetrode
Accu-Tek Carbofib Tip Tweezers Tool Aven (Ann Arbor, MI) 18768 (Pattern 304) For handling tetrodes
Alligator Clip Tool Fine Science Tools 18050-35 A.K.A. Bulldog serrefine. To clip the tetrodes together during twisting
Micro Dissecting Scissors Tool Biomedical Research Instruments 25-1000 For general cutting of tetrode/electrode wire
Iris Toughcut Serrated Scissors Tool Fine Science Tools 14058-09 For final cut of tetrodes
Teflon Coated Stainless Steel Wire Material A-M Systems (Carlsborg, WA) 790500 Ground wire
12.5 micron nichrome wire Material Kanthal Palm Coast Rediohm-800 1/4 HARD PAC COATING Polyimide coated micro-wire for making tetrodes.
Tetrode Twister Tool Neuralynx Tetrode Assembly Station Increases the speed and consistency of tetrode fabrication.
Silver Paint Material GC Electronics 22-023 For connecting the micro-electrode wires of the tetrode to the connector pins (see Discussion)
X-Acto Knife Handle Material MSC Direct X3001 For constructing a micro-drive holding device.
26 Pin, 2 Row Connector Material Mill-max 852-10-026-30-001000 For constructing a micro-drive holding device.

References

  1. Gray, C. M., Maldonado, P. E., Wilson, M., McNaughton, B. Tetrodes markedly improve the reliability and yield of multiple single-unit isolation from multi-unit recordings in cat striate cortex. J. Neurosci. Methods. 63 (1-2), 43-54 (1995).

Play Video

Cite This Article
Nguyen, D. P., Layton, S. P., Hale, G., Gomperts, S. N., Davidson, T. J., Kloosterman, F., Wilson, M. A. Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Tetrode Assembly. J. Vis. Exp. (26), e1098, doi:10.3791/1098 (2009).

View Video