Summary
हम अमेरिकी लॉबस्टर के पेट के सकल विच्छेदन का वर्णन (
Abstract
अमेरिकी लॉबस्टर के पेट (
Protocol
- विच्छेदन से पहले लॉबस्टर 30 जानवर anesthetize मिनट के लिए बर्फ में दफन किया जाना चाहिए.
- झींगा के लिंग पहली swimmeret के आकार को देखने के द्वारा निर्धारित किया जा सकता है. नर बोनी swimmerets है और महिलाओं ढंका swimmerets है.
- Cephalothorax पृथक.
- एक घुमा गति का उपयोग करने के लिए सामने पंजे बंद चीर.
- बड़ी कैंची का उपयोग करने के लिए cephalothorax और पेट के बीच एक गहरी कटौती करने से पेट (पूंछ भाग) निकालें. यह विशाल फाइबर पूंछ फ्लिप प्रतिक्रिया को नियंत्रित इलाकों में कटौती है. फिर बंद पेट में कटौती के लिए आगे बढ़ें.
- उन्हें कैंची से बंद trimming द्वारा एंटीना निकालें, और पैर और तीसरे maxillipeds मोड़.
- पेट के आसपास से कछुवे की पीठ की हड्डी निकालें, (ग्रीवा नाली और मंच के बीच सिर क्षेत्र यानी).
- इस अनुभाग का उपयोग rongeurs और रंग ध्यान से कठिन कछुवे की पीठ की हड्डी को हटाने के पार्श्व किनारे पर शुरू, जबकि लाल अंतर्निहित hypodermis बरकरार जा. रंग अलग परतों इतना है कि कछुवे की पीठ की हड्डी rongeurs के साथ बंद हो टूट सकता है के लिए उपयोगी है.
- आँखें तुम द्विपक्षीय हल्के calcified छोटे अंडाकार प्लेटें (IIIa ossicles) को लगता है की ओर चल रहा है. इन ossicles के करीब के रूप में संभव के रूप में, ध्यान से छोटे कैंची का उपयोग ossicles से अलग मांसपेशियों.
- रंग और rongeurs का प्रयोग व्याख्यान चबूतरा की आंखों के बीच और पूंछ का भाग (लगभग 1 सेंटीमीटर) से कछुवे की पीठ की हड्डी हटायें.
- चेहरे (आँखें सहित क्षेत्र, और व्याख्यान चबूतरा) अलग.
- छोटे कैंची का प्रयोग व्याख्यान चबूतरा में सबसे व्याख्यान चबूतरे वाला उजागर ऊतक के पार क्षैतिज कटौती exoskeleton से अलग करने के लिए बनाते हैं. फिर कैंची और / या रंग के किनारे का उपयोग सावधानी से ऊतक caudally IIIa ossicles के स्तर पिछले रोल.
- Dorsally शुरू, छोटे कैंची का उपयोग करें चेहरे exoskeleton से शेष ऊतक अलग. कट के रूप में संभव के रूप में हार्ड कछुवे की पीठ की हड्डी के करीब, रोक जब आप और मुँह के केंद्र अनुलग्नक के पास मिलता है.
- उदर देखने से mandibles आसानी से दिखाई जानी चाहिए. शेष maxillipeds अलग.
- Mandibles तहत नरम होंठ का पता लगाएँ.
- पार्श्व कटौती चेहरे अलग जबकि पेट के लिए संलग्न होंठ रख. (वहाँ एक थोड़ा वक्रित नीले बाहरी मुंह हिस्सा है कि एक गाइड के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है.)
- अलग और पेट को हटा दें.
- अपने हाथ, उदर ऊपर और इतना है कि अपनी कोहनी की ओर पूर्वकाल अंत है ओर की हथेली में लॉबस्टर पकड़ो.
- होंठ के लिए एक hemostat संलग्न और गुरुत्वाकर्षण hemostat और होंठ नीचे खींच और उदर शरीर दीवार से दूर है.
- छोटे कैंची का प्रयोग बाहर mandibles कटौती.
- उदर शरीर दीवार है, जो एक कठिन "शेल्फ" होंठ और पेट के लिए उदर रूपों के पृष्ठीय पक्ष का पता लगाएँ. "शेल्फ" बस नीचे कट, बहुत पूरे midline औसत दर्जे के पार्श्व भर शरीर दीवार के करीब है. पेट की संपूर्ण उदर पक्ष अब शरीर की दीवार से अलग किया जाना चाहिए.
- झींगा इतना है कि पृष्ठीय तरफ ऊपर है मुड़ें. ग्रीवा नाली, जहां कछुवे की पीठ की हड्डी हटा दिया गया था व्याख्यान चबूतरे वाला बढ़त के साथ कट और धीरे पेट बाहर खींचती है.
- किसी भी अतिरिक्त आंतों अलग है कि पेट में संलग्न रहते हैं.
- पेट खोलें, और यह लगाए के लिए तैयार है.
- नीचे hypodermis पक्ष के साथ अपने हाथ की हथेली में पेट पकड़ो. hemostat होंठ करने के लिए अभी भी संलग्न किया जाना चाहिए और अपनी उंगलियों के बीच झूठ चाहिए.
- मुँह (होंठ के नीचे) खोलने जठरनिर्गम के उदर पक्ष के माध्यम से नीचे से एक उथले पूर्वकाल को पीछे कटौती कर छोटे कैंची का प्रयोग करें.
- आगे पेट खोलने के पेट के केंद्र के पार चल रहा है ossicles साथ दो पार्श्व कटौती करने.
- ठंडा खारा पेट में डाल दिया दृश्यता में सुधार और पेट की सामग्री को निष्कासित किया जा सकता है.
- आदेश में अनुमति देने के लिए तैयारी विदारक डिश में फ्लैट में रखे छोटे कैंची का उपयोग करने के लिए तीन गैस्ट्रिक दांत ट्रिम.
- पेट विच्छेदन पकवान में नीचे पिन.
- पेट, खारा भर विच्छेदन डिश में hypodermis तरफ ऊपर रखें.
- प्लेस होंठ पर कीट पिन और चार कोनों बनाया जब पेट खोला गया था. पूर्वकाल जगह पिन उच्च और किनारे के पास कोनों के लिए, के रूप में commissural ganglia या अवर oesophageal नसों को परेशान करने की नहीं. पीछे कोनों जगह थोड़ा उच्च पिन के रूप में परेशान करने के लिए नहीं जठरनिर्गम फैलनेवाली पेशी मांसपेशियों के लिए.
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Discussion
हमारे लॉबस्टर पेट की प्रयोगशाला विच्छेदन में stomatogastric तंत्रिका तंत्र, एक नेटवर्क है कि पेट की लयबद्ध संकुचन नियंत्रण का उपयोग किया जाता है. लॉबस्टर पेट की शारीरिक रचना अच्छी तरह से किया गया है 5-7 पहले वर्णित है, और हम उसके शरीर के साथ परिचित बनने अनुशंसा करते. ऐसा करने से नाजुक नसों और मांसपेशियों को नुकसान पहुँचाए का खतरा कम हो जाएगा.
पेट विच्छेदन के पूरा होने पर, STNS के विभिन्न भागों आगे dissected किया जा सकता है. उदाहरण के लिए neuromuscular जंक्शनों, STNS नसों में से एक अध्ययन करने के लिए और मांसपेशियों यह innervates अलग हो सकता है. stomatogastric नाड़ीग्रन्थि में न्यूरॉन्स की somata stomatogastric नाड़ीग्रन्थि अलग द्वारा रिकॉर्डिंग या आणविक काम के लिए पहुँचा जा सकता है. stomatogastric नाड़ीग्रन्थि और नसों सहित STNS, के विच्छेदन के एक साथी जौव 4 लेख में प्रलेखित किया गया.
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Acknowledgments
हम हमारे सलाहकार, डॉ. ईव Marder स्वीकार करना चाहते हैं. इस शोध ईव Marder और NS059255 स्वास्थ्य NS17813 अनुदान के राष्ट्रीय संस्थान द्वारा एई टी. समर्थित किया गया
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Homarus americanus | Commercial Lobster | Can be purchased from any lobster supplier, We specifically request chicken” lobsters. | |
Black Sylgard 170 | Dow Corning | 170 | |
Preparation Dish | Fisher Scientific | 08-807 | Fill 2" with Black Sylgard 170. |
Fine Scissors | Fine Science Tools | 14090-09 | |
Insect Pins size 6 | Fine Science Tools | 26000-65 | |
Mayo Scissors | This is a common product offered by many suppliers of dissecting tools. | ||
Micro-Spatula | WARD’s Natural Science | 15 V 4313 | This is a very common product offered by many suppliers of lab tools. |
Rongeurs | Fine Science Tools | 16000-14 | |
Plastic hemostat | This is a common product offered by many suppliers of dissecting or jewelry making tools. |
References
- Marder, E., Bucher, D. Central pattern generators and the control of rhythmic movements. Curr. Biol. 11, R986-R996 (2001).
- Nusbaum, M. P., Beenhakker, M. P. A small-systems approach to motor pattern generation. Nature. 417, 343-350 (2002).
- Clemens, S., Massabuau, J. C., Legeay, A., Meyrand, P., Simmers, J. In vivo modulation of interacting central pattern generators in lobster stomatogastric ganglion: influence of feeding and partial pressure of oxygen. J. Neurosci. 18, 2788-2799 (1998).
- Tobin, A. E., Bierman, H. S. Homarus americanus stomatogastric nervous system dissection. J Vis Exp. 27, (2009).
- Maynard, D. M., Dando, M. R. The structure of the stomatogastric neuromuscular system in Callinectes sapidus, Homarus Americanus and Panulirus argus (Decapoda crustacean). Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 268, 161-220 (1974).
- Herrick, F. H. Natural history of the American Lobster. U.S. Bur. Fish. , 219-252 (1909).
- Marder, E., Bucher, D. Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs. Annu. Rev. Physiol. 69, 291-316 (2007).