Summary
我々はアメリカのロブスターの胃の肉眼解剖を説明します(
Abstract
アメリカンロブスターの胃(
Protocol
- 解剖前に、ロブスターは、動物を麻酔するために30分間氷に埋葬されるべきである。
- ロブスターの性別は、最初の遊泳脚の形状から判断することができます。男性はボニーのswimmeretsと雌は羽swimmeretsを持っている。
- 頭胸部を分離する。
- フロント爪をはがすためにねじる運動を使用してください。
- 頭胸部と腹部の間に深い切り傷を作るために、大きなハサミを使って、腹部(尾の部分)を取り外します。これはテールフリップ応答を制御する巨大な線維路をカットします。その後、腹部を切断に進んでください。
- ハサミでそれらをオフにトリミングすることでアンテナを外し、足とサードmaxillipedsをねじり切る。
- (子宮頚溝と演壇の間に頭部すなわち)、胃の周りから甲羅を外します。
- 赤みがかった基盤となる皮下組織には手をつけずに、慎重にハード甲羅を削除するには、このセクションの使用rongeursとヘラの外側エッジで開始。ヘラは、甲羅がrongeursと決裂することができるように、層を分離するのに便利です。
- あなたが両側に軽く石灰化の小さな楕円形のプレート(IIIaの耳小骨)を見つける目に向かって移動。できるだけ近いこれらの耳小骨のように、慎重に小さなハサミを使って耳小骨から筋肉を切り離します。
- ヘラとrongeursを使用すると、目とくちばしの尾部(約1センチメートル)の間から甲羅を取り外します。
- 顔(目、そして演壇を含む領域)を切り離します。
- 小さなハサミを使用すると、外骨格からそれを切り離すために演壇で最も吻側曝露された組織間の水平方向のカットを行います。その後、慎重にちょうどIIIaの耳小骨のレベルを越えて、尾組織をロールにはさみおよび/またはヘラのエッジを使用してください。
- 背側からは、顔の骨格から、残りの組織を切断するための小さなハサミを使用。あなたが口の中心と添付ファイルの近くに取得するときに停止する、可能な限りハード甲羅に近い位置でカット。
- 腹ビューから顎は簡単に見えるはずです。残りのmaxillipedsを切り離します。
- あごの下に柔らかい唇を見つけます。
- 胃に接続されている唇を維持しながら、顔をデタッチするには横方向のカットを行います。 (ガイドとして使用することができるわずかに湾曲青みがかった外側の口の部分があります。)
- 胃をデタッチして削除する。
- 前端があなたの肘に向かっていることをアップしそう腹側、手のひらサイズのロブスターを保持する。
- 唇に止血剤を添付し、重力が腹側体壁から止血剤と唇をプルダウンして離れてみましょう。
- 小さなハサミを使用すると、顎を切り取る。
- 唇と胃に腹ハード"棚"を形成する腹側体壁の背側を見つけます。単なる"棚"の下にカット、非常に全体の内側、外側正中線を越え、体壁に近い。胃の全体の腹側は現在、体壁から取り外す必要があります。
- 背側が上になるようにロブスターを回します。甲羅が削除された子宮頚溝、の吻側端に沿ってカットし、ゆっくりと胃を取り出します。
- 胃に接続されたままに余分な腸を切り離します。
- 胃を開き、ピン止めの準備をします。
- 皮下組織側のダウンと手のひらで胃を保持する。止血剤はまだリップに接続する必要がありますし、あなたの指の間にあるはず。
- ダウン幽門の腹側を介して口の開口部(リップ下)から浅い前方から後方カットをするために小さなはさみを使用してください。
- さらに胃を開くには、胃の中央を横切る耳小骨に沿って2つの横方向のカットを行います。
- 冷たい生理食塩水は、視認性を改善し、胃内容物を排出するため胃に流し込みされることがあります。
- 解剖皿に平らに準備三胃の歯をトリミングする小さなハサミを使用可能にするために。
- 解剖皿の中で胃を突き止める。
- 生理食塩水で満たされた解剖皿に、胃、皮下組織面を上に置きます。
- 昆虫のリップでピンと胃が開放されたときに作成さ四隅に置きます。交連神経節または劣って食道の神経を邪魔しないように、高く、端に近い前方のコーナーの場所をピン用。幽門散大筋を邪魔しないように、少し高い後部コーナーの場所のピンの。
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Discussion
私たちの研究室ではロブスターの胃の解剖は、口胃神経系、胃のリズミカルな収縮を制御するネットワークにアクセスするために行われます。ロブスターの胃の解剖学は、よく前に5から7に記載されている、と我々はその解剖学に精通することをお勧めします。そうすることで、繊細な神経や筋肉の損傷のリスクが軽減されます。
胃の解剖が完了すると、STNSの種々の部分は、さらに解剖されることがあります。例えば、神経筋接合部、STNS神経のいずれかを勉強するために、それがinnervates筋肉を単離することができる。口と胃の神経節の神経細胞のsomaの複数形は、口と胃の神経節を分離することにより、録音や分子の仕事のためにアクセスすることができます。口と胃の神経と神経を含むSTNS、、の解剖は、コンパニオンのjove第4条に記載されています。
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Acknowledgments
我々は、顧問、博士イヴマーダーに感謝します。この研究は、イブマーダーとNS059255にNS17813 AE T.する健康補助金の国立研究所によってサポートされていました
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Homarus americanus | Commercial Lobster | Can be purchased from any lobster supplier, We specifically request chicken” lobsters. | |
Black Sylgard 170 | Dow Corning | 170 | |
Preparation Dish | Fisher Scientific | 08-807 | Fill 2" with Black Sylgard 170. |
Fine Scissors | Fine Science Tools | 14090-09 | |
Insect Pins size 6 | Fine Science Tools | 26000-65 | |
Mayo Scissors | This is a common product offered by many suppliers of dissecting tools. | ||
Micro-Spatula | WARD’s Natural Science | 15 V 4313 | This is a very common product offered by many suppliers of lab tools. |
Rongeurs | Fine Science Tools | 16000-14 | |
Plastic hemostat | This is a common product offered by many suppliers of dissecting or jewelry making tools. |
References
- Marder, E., Bucher, D. Central pattern generators and the control of rhythmic movements. Curr. Biol. 11, R986-R996 (2001).
- Nusbaum, M. P., Beenhakker, M. P. A small-systems approach to motor pattern generation. Nature. 417, 343-350 (2002).
- Clemens, S., Massabuau, J. C., Legeay, A., Meyrand, P., Simmers, J. In vivo modulation of interacting central pattern generators in lobster stomatogastric ganglion: influence of feeding and partial pressure of oxygen. J. Neurosci. 18, 2788-2799 (1998).
- Tobin, A. E., Bierman, H. S. Homarus americanus stomatogastric nervous system dissection. J Vis Exp. 27, (2009).
- Maynard, D. M., Dando, M. R. The structure of the stomatogastric neuromuscular system in Callinectes sapidus, Homarus Americanus and Panulirus argus (Decapoda crustacean). Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 268, 161-220 (1974).
- Herrick, F. H.
Natural history of the American Lobster. U.S. Bur. Fish. , 219-252 (1909). - Marder, E., Bucher, D. Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs. Annu. Rev. Physiol. 69, 291-316 (2007).