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Biology

Tracheotomia: Un metodo per il trapianto di cellule staminali al polmone

Published: February 25, 2007 doi: 10.3791/163

Summary

Scoperte significative per l'identificazione delle cellule staminali sono continuamente in corso. Per tradurre queste scoperte, però, nuovi metodi per la consegna cellulare deve essere concepito. Qui di seguito riporto che le vie aeree di fornire una via sicura per il trapianto di cellule staminali per i polmoni.

Abstract

Malattia polmonare è una delle principali cause di morte e rischia di diventare un'epidemia dato aumenta l'inquinamento e il fumo in tutto il mondo. I progressi nella terapia con cellule staminali possono alleviare molti dei sintomi associati alla malattia polmonare e inducono la riparazione del alveolare negli adulti. In concomitanza con la continua ricerca di cellule staminali per il trattamento del caso umano, la consegna precisa e homing (al sito della malattia) devono essere rassicurati per la terapia di successo. Qui, mi riferiscono che le cellule staminali possono tranquillamente essere instillata attraverso la trachea l'apertura di un non-stop via al polmone. Questo metodo comporta una incisione cutanea, caudale inserimento di una cannula dentro e lungo il lume tracheale, e l'iniezione di una miscela di cellule staminali veicolo nelle vie aeree dei polmoni. Una vasta gamma di soluzioni multimediali e stabilizzatori può essere instillata tramite tracheotomia, con la conseguente capacità di fornire una più ampia gamma di tipi di cellule. Con epitelio alveolare confinare queste cellule nel lume, l'espansione del polmone e pressione negativa durante l'inalazione può anche aiutare l'integrazione delle cellule staminali. Consegna tracheale di cellule staminali, con un assorbimento rapido e la possibilità di gestire una vasta gamma di trattamenti, potrebbe accelerare lo sviluppo di terapie basate sulle cellule, aprendo nuove vie per il trattamento della malattia polmonare.

Protocol

Pre-operatoria

  1. Destinatario del mouse e cellule del donatore
  2. Piattaforma operativa con filo e nastro di sutura
  3. 1cc siringa
  4. 23G ago
  5. Anestetico: Avertin 25 mg / ml (in alternativa ketamina 9 mg / ml e xylazin 1 mg / ml)
  6. Tagliatore di capelli con lama # 40
  7. Guanti sterili
  8. Tamponi imbevuti di alcool
  9. Iodio
  10. Strumenti chirurgici sterilizzati
  11. Filo di sutura
  12. Catetere 22G
  13. 200 ul pipetta (sterile)
  14. Puntali sterilizzati
  15. Colla pomata antibiotica
  16. Sharpie contenitore

Operativo

Tecniche asettiche sono utilizzati in tutta questa procedura.

  1. Pesare mouse.
  2. Iniezione intraperitoneale di anestetico (250 mg / kg o, in alternativa Avertin ketamina 90 mg / kg e xilazina 10 mg / kg) a dosi sufficienti per consentire la respirazione spontanea, ma forniscono chirurgica concentrazione anestesia. Per la chirurgia di iniziare la presa dito è stato utilizzato come indicatore di dolore profondo, senza risposta da parte degli animali anestetizzati.
  3. Lay mouse con incisivi nascosto in filo di sutura e la coda del nastro si stabilizzi.
  4. Fermaglio per capelli con una lama # 40 clipper.
  5. Guanti cambiamento (proseguire con guanti sterili).
  6. Disinfettare con alcool due volte prima di incisione cutanea.
  7. Sterilizzare zona con un iodophore.
  8. L'utilizzo di strumenti sterili fare una piccola incisione (<1 cm) parallela alla trachea.
  9. Accuratamente separati da tessuto cartilagineo.
  10. Un legame viene inserito sotto la trachea.
  11. Delicatamente sollevare verso l'alto cravatta e inserire l'ago nella trachea esposti.
  12. Rimuovere l'ago ed inserire il tubo senza problemi, ma rapidamente, fino a sentirsi leggera resistenza.
  13. Cellule pipetta (fino a 50 microlitri volume) direttamente nel catetere.
  14. Rimuovere immediatamente tubo e cravatta, mentre il mouse liberando da apparecchi operativi.
  15. Se necessario Premere delicatamente il mouse in posizione verticale (verticale) aggrappandosi le zampe anteriori e spostare dolcemente.
  16. Chiudere la ferita con una sutura o colla antibiotica.

Post-operatorio

  1. Tenere il mouse caldo.
  2. Buprenorfina (0,05 mg / kg) deve essere somministrata come analgesia post-operatoria ogni 12 ore per le prime 24 ore dopo questa procedura.

Figura 1

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
23 G needle
1 cc syringe
22 G catheter
suture thread
antibiotic glue ointment
Anesthetic Avertin 25 mg/mL. Alternatively ketamine 9 mg/mL and xylazin 1 mg/ml.

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Tags

Biologia Cellulare del polmone le cellule staminali trapianto trachea
Tracheotomia: Un metodo per il trapianto di cellule staminali al polmone
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Peter, Y. Tracheotomy: A Method forMore

Peter, Y. Tracheotomy: A Method for Transplantation of Stem Cells to the Lung. J. Vis. Exp. (2), e163, doi:10.3791/163 (2007).

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