Ryggmärg Elektrofysiologi
Summary
En demonstration av isolering av neonatal musen ryggmärgen för elektrofysiologiska studier.
Abstract
Den neonatala musen ryggmärgen är en modell för att studera utvecklingen av neurala kretsar och rörelseapparaten rörelse. Vi visar ryggmärgen dissekering och förbereda inspelningen bad konstgjorda cerebrospinalvätska används för rörelseapparaten studier. När dissekerade kan ryggmärgen ventrala nervrötterna knytas till en inspelning elektrod att registrera elektrofysiologiska signaler från den centrala mönstret generera kretsar i ländryggen sladden.
Protocol
Discussion
De isolerade neonatal ryggmärgen ger en lätthanterlig metod för att studera nervsystemet utveckling1, 2. Inom ländryggen ryggmärgen av neonatal gnagare, kan centrala mönster generera kretsar producera fiktiva förflyttning i närvaro av neurotransmittorer. Denna fiktiva rörelseorganen består av rytmiska ökad verksamhet, skurar, som produceras vid 0,2 till 0,5 Hz. Dessa brister är organiserade för att producera vänster-höger växlingen längs sladden och böj-extensor växling (ipsilaterala L2 förhållande …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Samuel L. Pfaff är professor i laboratorier Gene Expression vid The Salk Institute för biologiska studier och en utredare vid Howard Hughes Medical Institute. Detta arbete stöddes av Christopher och Dana Reeve Foundation. Joe Belcovson, Kent Schnoeker och Mike Sullivan i multimedia vid Salk Institute bistått med fotografi och redigering.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| KCl | P-9333 | |||
| NaCl | S-7653 | |||
| NaHCO3 | S-6297 | |||
| NaH2PO4 | S-9638 | |||
| Glucose | D-9434 | |||
| CaCl2 | C-5080 | |||
| MgSO4 | M-5921 | |||
| Large Scissors | Fine Science Tools | 14070-12 | ||
| Forceps | Fine Science Tools | 11050-10 | ||
| Fine Scissors | Fine Science Tools | 15000-10 | ||
| Insect pins | Fine Science Tools | 26002-10 | ||
| Sylgard 184 (Dow-Corning) | ||||
| 1L volumetric flask | ||||
| 100mL volumetric flask |
References
- Myers, C. P. Cholinergic input is required during embryonic development to mediate proper assembly of spinal locomotor circuits. Neuron. 46, 37-49 (2005).
- Goulding, M., Pfaff, S. L. Development of circuits that generate simple rhythmic behaviors in vertebrates. Curr Opin Neurobiol. 15 (1), 14-20 (2005).
- Gallarda, B. Segregation of axial motor and sensory pathways via heterotypic trans-axonal signaling. Science. 320, (2008).
- Gosgnach, S. V1 spinal neurons regulate the speed of vertebrate locomotor outputs. Nature. 440 (7081), 215-219 (2006).
- Lanuza, G. M., Gosgnach, S., Pierani, A., Jessell, T. M., Goulding, M. Genetic identification of spinal interneurons that coordinate left-right locomotor activity necessary for walking movements. Neuron. 42 (3), 375-386 (2004).
- Jiang, Z., Carlin, K. P., Brownstone, R. M. An in vitro functionally mature mouse spinal cord preparation for the study of spinal motor networks. Brain Res. 816 (2), 493-499 (1999).
- Ziskind-Conhaim, L., Gao, B. X., Hinckley, C. Ethanol dual modulatory actions on spontaneous postsynaptic currents in spinal motoneurons. J Neurophysiol. 89 (2), 806-813 (2003).
- Tabak, J., Rinzel, J., O’Donovan, M. J. The role of activity-dependent network depression in the expression and self-regulation of spontaneous activity in the developing spinal cord. J Neurosci. 21 (22), 8966-8978 (2001).
- Chub, N., Mentis, G. Z., O’Donovan, M. J. Chloride-sensitive MEQ fluorescence in chick embryo motoneurons following manipulations of chloride and during spontaneous network activity. J Neurophysiol. 95 (1), 323-330 (2006).
