Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

خرطوم ملحق مواجهتها (PER) الفحص في ذبابة الفاكهة

Published: April 29, 2007 doi: 10.3791/193

Summary

خرطوم ردا تمديد أو PER هو مقايسة سلوك الذوق الذي تم استخدامه في الذباب ، وكذلك في نحل العسل. عندما خرطوم يجعل الاتصال مع مادة جذابة ، ذبابة خرطوم يمتد لاستهلاك هذه المادة. حلول مختلفة من السكريات هي جذابة جدا للطيران.

Abstract

خرطوم ردا التمديد (PER) هو فحص سلوك الذوق الذي تم استخدامه في الذباب ، وكذلك في نحل العسل.

على سطح الفم الذبابة (labellum) ، وهناك الشعر هياكل شبيهة تدعى الخلايا العصبية التي تضم sensilla الذوق. عندما مادة جذابة يجعل الاتصال على labellum ، ذبابة خرطوم يمتد لتستهلك المواد. خرطوم ملحق مواجهتها (PER) مقايسة التدابير سلوك هذا الرد الذوق ، وأنه هو وسيلة مفيدة لمعرفة أذواقهم الغذائية في ذبابة واحدة. حلول من السكريات المختلفة ، مثل الجلوكوز والسكروز والفركتوز ، وجذابة للغاية للطيران. يمكن أيضا أن تأثير المواد مكره يتم اختبارها مع تخفيض PER عندما مختلطة في حل الحلو.

على الرغم من بساطة الإجراء الأساسي ، وهناك الكثير من الامور التي يمكن منعها من العمل. واحدة من العوامل التي تتطلب اهتماما هو الدولة الذبابة استجابة. الوقت التجويع اللازمة لجعل السفر إلى دولة متجاوبة السليم يختلف جذريا 36-72 ساعة. أقمنا مجموعة من الضوابط لتقييم حالة الذبابة والفرز الذي يسمح للخروج من الحيوانات فرادى أو غير متجاوبة فرط استجابة. عامل آخر مهم هو مستوى التأثير والموقف من الاتصال إلى labellum ، التي سيكون من الصعب وصف بالكلمات. يوضح هذا العرض الفيديو كل هذه جنبا إلى جنب مع العديد من التحسينات الأخرى التي من شأنها أن تزيد من استنساخ هذا الأسلوب.

Protocol

الموت جوعا

  1. أولا ، تجويع الطيران.
  2. وضع قطعة صغيرة من كيم يمسح بماء غارقة في القنينة الفارغة.
  3. نقل 20-30 جيدا الذباب يتغذى على القارورة الفارغة.
  4. تحقق كل 12 ساعة للتأكد من -24 ورقة رطبة.
  5. تجويع الطيران ل36-72 ساعة.

الإصلاح الذبابة

  1. تأخذ واحدة تحلق في الشافطة.
  2. مكان غيض الصفراء 200 ميكرولتر خلال الافتتاح. التقليب في وقت واحد وتهب على ذلك ، يمكنك ضغط على الطيران تصل الى الحافة الصفراء.
  3. بلطف تطبيق بعض الهواء لدفع يطير الى نقطة حيث انها لا تستطيع التحرك.
  4. باستخدام أسلاك شائكة ، ووضع علامة على ما يقرب من عين الذبابة ، تمتص ثم يعود وقطعوا رأس.
  5. ضربة بلطف يعود الى الموقف ، ولكن قبل الوصول إلى النهاية ، وجعل قطع الميل في موقف حيث خرطوم سوف يكون موجودا. يمكنك أن تفعل هذا دون قطع الميل ، لكنها بالتأكيد من شأنه أن يجعل العملية التالية أسهل.

تحضير الفتائل السكروز

  1. لف الشريط 6 ملم واسعة من Kimwipes ® رقة في الموضوع ، ومزق إربا صغيرة من مخروط ، مثل الفتيل شكل (<1 سم).
  2. وقد انخفضت هذه الفتائل الصغيرة إلى حلول السكروز أو المياه وعرضها على خرطوم بجعل الاتصال.

إعداد الضوابط وحيوانات التجارب

  1. قبل اختبار أي tastants ، واعطاء الحل السكروز 4 ٪ من الطيران. هذا بمثابة تحكم إيجابية. تجاهل أي أن يطير لم تستجب.
  2. المقبل ، واختبار درهم 2 0 على الطاير. هذا بمثابة سيطرة سلبية. تجاهل يطير اذا لم تستجيب.
  3. اختبار هذه الضوابط بعد اختبار tastants الخاص.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

في هذا العرض ، لقد مررنا جميع الخطوات لتمديد خرطوم مقايسة الاستجابة. الأسلوب أصوات جميلة واضحة ولكن كما هو الحال في العديد من المقايسات السلوك الأخرى ، والعديد من الأشياء الصغيرة يمكن مقايسة منع من العمل. مررنا مثل هذه الخطوات الكثيرة التي تحتاج إلى عناية دقيقة. هنا ، أود التأكيد مجددا على بعض من العوامل الأكثر أهمية.

أحد هذه العوامل هو شكل الفتيل. وقد أظهرت لي بعض الأمثلة الجيدة جدا ، ولكن بطبيعة الحال ، في الواقع كل شيء سيكون الطيف المستمر بين جيد جدا وسيئة للغاية. في البداية ، هل يمكن أن يكون استخدام الأشياء على مقربة من الجانب جيدة جدا ، ولكن يوما بعد يوم القياسية الخاصة بك قد تبدأ في التحول شيئا فشيئا إلى نطاق الحقيقة ليست جيدة. ويمكن تصور الإنسان ما يسمى "جيدة" من السهل جدا تحول دون وعي. طريقة واحدة لمنع هذا هو لالتقاط صورة من الفتيل الذي استخدمته في التجارب الخاصة بك ، وقارن بين كل الصور الجانبية إلى جنب. أو ، على الأقل تأخذ صورة واحدة من الفتائل التي عملت بشكل جيد جدا ، والتحديق في ذلك لبعض الوقت قبل استعراضات النفقات الاختبار.

شيء آخر مهم هو مستوى التأثير لجهة الاتصال. هذا هو أسهل للتعامل مع لأن الهدف هو جعل الاتصال وطيف ممكن. إذا كنت لا ترى تحرك الذبابة الرأس في كل شيء ، هذا هو الأفضل.

حالة التجويع هو أصعب عامل السيطرة عليها. في كثير من الذوق أو الشم المقايسات السلوكية ، يستخدم وقت المجاعة من 24 ساعة في كثير من الأحيان. قد تكون 24 ساعة مريحة جدا للناس للقيام التجربة ، ولكن إذا كنت الذباب الخلفية الخاصة بك في حالة جيدة جدا ، وهذا هو لفترة قصيرة إلى حد ما. ولكن حتى لو كنت تستخدم الطعام الغني يطير ، والتحكم في كثافة على وجه التحديد ، يمكن للإطار للاختبار الواحد تختلف من 36 ساعة إلى 72 ساعة. هكذا ، على سبيل التجربة ، لا بد لي من القول انه غير مريح للغاية بالنسبة للناس. هناك عامل آخر جعل الأمر أكثر صعوبة بالنسبة المجربون. كما واقع الأمر ، لن يكون هناك دفعات كثيرة ، حيث نافذة للتجربة قد تكون قصيرة جدا ، أو قد لا توجد حتى على الإطلاق.

لذلك هناك بعض العقبات الرئيسية التي يجب أن تمر عبر ، ولكن الشيء الأكثر أهمية هو السيطرة الإيجابية والسلبية التي ذكرتها. عن طريق الحفاظ على تلك المعايير بدقة شديدة ، وسوف تكون قادرة على جمع بيانات موثوق بها مجموعات.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Acknowledgments

نشكر غراهام بول لخدمة كرجل الكاميرا في عرض الفيديو.

Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
HDR-HC1 Camera Sony Corporation
SMZ800 Microscope Nikon Instruments
P-IBSS Camera Adapter Nikon Instruments
1x DC10LN Camera Adapter Optem, Qioptiq Inc.
257010 Camera Adapter Optem, Qioptiq Inc.
TREKKER Mk2 Tripod BENBO
Gorillapod SLR Tripod Joby
iMac G5 Computer Apple
Power Mac G5 Computer Apple
iMovie Software Apple
MPEG Streamclip Software SQUARED 5

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Dethier, V. G. The Hungry Fly. , Harvard University Press. Cambridge. (1976).

Tags

علم الأعصاب ، العدد 3 ، ذبابة الفاكهة ، والسلوك ، والذوق ، خرطوم ، والإرشاد
خرطوم ملحق مواجهتها (PER) الفحص في ذبابة الفاكهة
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Shiraiwa, T., Carlson, J. R.More

Shiraiwa, T., Carlson, J. R. Proboscis Extension Response (PER) Assay in Drosophila. J. Vis. Exp. (3), e193, doi:10.3791/193 (2007).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter