端粒是染色体的稳定至关重要,并介导的端粒酶的端粒维持端粒G -悬结构是必不可少的。最近,我们通过两种方法检测端粒G -悬结构<em>锥虫布氏</em>,这是原生 – 凝胶杂交和连接介导的引物延伸,这将是描述。
端粒的G -悬结构已被确定在许多真核生物,包括酵母,脊椎动物和布氏锥虫。它作为基板从头端粒DNA合成的端粒酶,因此,重要的端粒维持 T 。 布氏是一种原生动物寄生虫引起的睡眠疾病在人类和牛的那加那病。一旦被感染的哺乳动物主机, T.定期交换机布氏细胞的表面抗原,以逃避宿主的免疫攻击。我们最近表明的T.布氏端粒的结构起着至关重要的作用,在调控的表面抗原基因的表达,这是 T的关键布氏的发病机制。然而,T.布氏端粒的结构还没有被广泛研究,由于这个专门的结构分析方法的局限性。我们现在已经成功地通过在凝胶杂交和连接介导的引物延长端粒G -悬结构, 在 T核苷酸测定端粒终端适配器结扎方法检查方法的原生布氏细胞。在这里,我们将详细描述了协议,并比较其不同的优势和局限。
布氏锥虫引起睡在人类的疾病。这种疾病,如果不及时治疗,必然是致命的 T 。 布氏在哺乳动物宿主细胞进行定期抗原变异,以逃避宿主的免疫攻击7。因此,它是非常难以消除T。布氏一旦感染细胞的建立。最近,我们已经证明, 端粒 T的表达调控发挥了重要作用布氏表面抗原基因8。因此,重要的是进一步了解在 T端粒维持端粒的?…
The authors have nothing to disclose.
我们想感谢卡罗琳价格博士科学讨论和有见地的建议。这项工作是由美国国立卫生研究院授予AI066095(PI李:碧波)的支持。