Кормление Тест: Оценка предпочтений кормления в Drosophila меланогастер

Overview

Это видео описывает кормления анализ для плодовых мушек, в которых цветные продукты питания используется для мониторинга кормления и влияние добавленных соединений может оказать на кормление деятельности. Пример протокола проверяет воздействие нескольких эндокринных разрушающих химических веществ (EDC).

Protocol

Этот протокол является выдержка из Bovier и др.,Методы для тестирования эндокринных нарушений в Drosophila меланогастер, J. Vis. Exp. (2019).

1. Анализ кормления

ПРИМЕЧАНИЕ: Этот анализ рекомендуется проверить, может ли наличие выбранного EDC в среде повлиять на кормление мух.

1. Положите 15 молодых мух во флаконы, содержащие Корнмеаль среды (CM) дополняется различными концентрациями выбранного EDC и окраски пищи. Разрешить мух кормить на средства массовой информации в течение 1 дня.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Например, использовать красный краситель No 40 (1 мг/мл).
2. Положите 15 молодых мух во флаконы, содержащие CM дополняется растворителем в одиночку и окраски пищи для контроля. Разрешить мух кормить на средства массовой информации в течение 1 дня.
3. Обезболивать индивидуально каждую группу мух с эфиром.
   1. Передача мух каждой группы в цилиндрический стеклянный контейнер (эфиризатор) с воронкой вставляется в открытый конец, инвертирование флакона над воронкой и осторожно нажав два контейнера вместе, чтобы мухи попадают в эфиризатор.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Воронка не позволит им выбраться из эфиризатора.
   2. Knock летит вниз, осторожно нажав эфиризатор на мягкой поверхности, такие как мышь-площадка, и быстро заменить воронку с эфиром пропитанной хлопка и марлевой пробкой.
   3. Подождите около 1 минуты, пока мухи не упадут на дно и не перестанут двигаться.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Не превышать время или мухи умрут.
4. Поместите обездвиженые мухи под стерео-микроскоп и сравните окраску брюшной полости каждой группы лечения по отношению к контрольной группе.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
17α-Ethinylestradiol	Sigma	E4876-1G
Agar for Drosophila medium	BIOSIGMA	789148
Bisphenol A	Sigma	239658-50G
Bisphenol AF	Sigma	90477-100MG
Cornmeal	CA' BIANCA
Diethyl ether	Sigma
Drosophila Vials	BIOSIGMA	789008	25 mm x 95 mm
Drosophila Vials	BIOSIGMA	789009	29 mm x 95 mm
Drosophila Vials	Kaltek	187	22 mm x 63 mm
Ethanol	FLUKA	2860
Etherizer	Crafts		cylindrical glass container with a cotton plug
Hand blender Pimmy	Ariete		food processor
Instant Success yeast	ESKA		Powdered yeast
Red dye no. 40	SIGMA	16035
Stereomicroscope with LED lights	Leica		S4E