Overview
يصف هذا الفيديو فحص التغذية لذباب الفاكهة الذي يستخدم فيه الطعام الملون لمراقبة التغذية وتأثير المركبات المضافة على نشاط التغذية. بروتوكول المثال يختبر آثار العديد من المواد الكيميائية المسببة لاضطرابات الغدد الصماء (EDC).
Protocol
هذا البروتوكول مقتطف من Bovier et al.,طرق لاختبار اضطراب الغدد الصماء في Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019).
1. تغذية المقايسة
ملاحظة: يوصى بإجراء هذا الفحص لاختبار ما إذا كان وجود EDC المحدد في الوسط يمكن أن يؤثر على تغذية الذباب.
- وضع الذباب الشباب 15 في قوارير تحتوي على الذرة المتوسطة (CM) تكمل بتركيزات مختلفة من EDC مختارة والغذاء التلوين. السماح للذباب بالتغذية على وسائل الإعلام لمدة يوم واحد.
ملاحظة: على سبيل المثال، استخدم الصبغة الحمراء رقم 40 (1 ملغم/مل). - وضع الذباب الشباب 15 في قوارير تحتوي على CM تكملها مع المذيب وحده والمواد الغذائية التلوين للسيطرة. السماح للذباب بالتغذية على وسائل الإعلام لمدة يوم واحد.
- تخدير كل مجموعة من الذباب بشكل فردي مع الأثير.
- نقل الذباب من كل مجموعة إلى وعاء زجاجي أسطواني (إيثريزر) مع قمع إدراجها في نهاية مفتوحة، عكس القارورة على القمع والتنصت بلطف الحاويتين معا لجعل الذباب تقع في الأثير.
ملاحظة: القمع سيمنعهم من الخروج من إيثريزر. - تدق الذباب إلى أسفل عن طريق التنصت بلطف الأثير على سطح ناعم، مثل لوحة الماوس، وبسرعة استبدال القمع مع القطن غارقة في الأثير وقابس الشاش.
- انتظر حوالي دقيقة واحدة حتى يسقط الذباب إلى الأسفل ويتوقف عن الحركة.
ملاحظة: لا تتجاوز الوقت أو الذباب سوف يموت.
- نقل الذباب من كل مجموعة إلى وعاء زجاجي أسطواني (إيثريزر) مع قمع إدراجها في نهاية مفتوحة، عكس القارورة على القمع والتنصت بلطف الحاويتين معا لجعل الذباب تقع في الأثير.
- ضع الذباب المشلود تحت مجهر ستيريو وقارن تلوين البطن لكل مجموعة علاج فيما يتعلق بمجموعة التحكم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 17α-Ethinylestradiol | Sigma | E4876-1G | |
| Agar for Drosophila medium | BIOSIGMA | 789148 | |
| Bisphenol A | Sigma | 239658-50G | |
| Bisphenol AF | Sigma | 90477-100MG | |
| Cornmeal | CA' BIANCA | ||
| Diethyl ether | Sigma | ||
| Drosophila Vials | BIOSIGMA | 789008 | 25 mm x 95 mm |
| Drosophila Vials | BIOSIGMA | 789009 | 29 mm x 95 mm |
| Drosophila Vials | Kaltek | 187 | 22 mm x 63 mm |
| Ethanol | FLUKA | 2860 | |
| Etherizer | Crafts | cylindrical glass container with a cotton plug | |
| Hand blender Pimmy | Ariete | food processor | |
| Instant Success yeast | ESKA | Powdered yeast | |
| Red dye no. 40 | SIGMA | 16035 | |
| Stereomicroscope with LED lights | Leica | S4E |
