Overview
Cette vidéo décrit comment suivre librement les mouches marchantes pour évaluer leur capacité générale de locomotion. Le protocole en vedette démontre la configuration de l’essai et l’analyse des données à l’aide d’un logiciel de suivi vidéo.
Protocol
Ce protocole est un extrait de Sun and Chen, A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila, J. Vis. Exp. (2017).
1. Suivi des mouvements assisté par vidéo
- Remplissez une boîte petri de 6 cm de diamètre d’élastomer transparent en silicium pour faire l’arène de suivi. Laissez un espace de 3 mm entre le silicium et le couvercle du plat pour permettre aux mouches de marcher librement mais pas de voler.
- Anesthésier quatre mouches du groupe simulé ou traité à chaque fois et les placer dans l’arène. Laisser les mouches à 22 °C pendant 1 h.
- Placez un appareil couplé à la charge (CCD) au-dessus des arènes et enregistrez pendant 5 min.
- Analyser les trajectoires de mouvement enregistrées à l’aide du logiciel Ctrax (disponible gratuitement chez Caltech). Exportez les données suivies dans un langage de programmation (p. ex., Matlab) compatible avec les données et analysez les données en fonction de la distance parcourue par image. Calculez la distance de marche moyenne pour chaque mouche et combinez-la avec toutes les autres mouches/groupes enregistrés pour obtenir une distance cumulative moyenne parcourue par la population de fichiers du même groupe.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 60 mm Petri Dishes | Fisher Scientific | FB0875713A | Used as a tracking arenas |
| Flow Regulator | Genesee Scientific | 59-122WC | |
| Fine Brush | Genesee Scientific | 59-204 | |
| Flypad | Genesee Scientific | 59-114 | |
| Sylgard Silicone Elastomer | Dow Corning | 4019862 | |
| CCD Camera | Microsoft | HD-5000 | |
| Ctrax Walking Fly Tracker | Caltech | Ctrax 0.2.11 | |
| MATLAB Image Processing Toolbox | MATLAB | R2015b |
