Overview
يصف هذا الفيديو كيفية تتبع الذباب المشي بحرية لتقييم قدرتها على الحركة العامة. يوضح البروتوكول المميز إعداد الفحص وتحليل البيانات باستخدام برنامج تتبع الفيديو.
Protocol
هذا البروتوكول هو مقتطف من صن وتشن، طريقة جديدة لنموذج اعتلال الدماغ الرضي المزمن في دروسوفيلا، J. Vis. Exp. (2017).
1. تتبع الحركة بمساعدة الفيديو
- ملء طبق بيتري قطرها 6 سم مع الاستومر السيليكون شفافة لجعل الساحة تتبع. اترك مسافة 3 مم بين السيليكون وغطاء الطبق للسماح للذباب بالسير بحرية ولكن ليس الطيران.
- تخدير أربع ذبابات إما من مجموعة وهمية أو تعامل في كل مرة ووضعها في الساحة. اترك الذباب عند 22 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة.
- ضع كاميرا الجهاز المقترن بالشحن (CCD) فوق الساحات وسجل لمدة 5 دقائق.
- تحليل مسارات الحركة المسجلة باستخدام برنامج Ctrax (متوفر مجانا من Caltech). تصدير البيانات المتعقبة بلغة برمجة (على سبيل المثال، Matlab) متوافقة مع الشكل وتحليل البيانات على أساس المسافة المقطوعة لكل إطار. حساب متوسط مسافة المشي لكل ذبابة ودمجها مع جميع الذباب /المجموعة المسجلة الأخرى للحصول على متوسط المسافة التراكمية التي قطعها عدد الملفات في نفس المجموعة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 60 mm Petri Dishes | Fisher Scientific | FB0875713A | Used as a tracking arenas |
| Flow Regulator | Genesee Scientific | 59-122WC | |
| Fine Brush | Genesee Scientific | 59-204 | |
| Flypad | Genesee Scientific | 59-114 | |
| Sylgard Silicone Elastomer | Dow Corning | 4019862 | |
| CCD Camera | Microsoft | HD-5000 | |
| Ctrax Walking Fly Tracker | Caltech | Ctrax 0.2.11 | |
| MATLAB Image Processing Toolbox | MATLAB | R2015b |
