Overview
Deze video beschrijft hoe je vrij lopende vliegen kunt volgen om hun algemene bewegingsvermogen te beoordelen. Het aanbevolen protocol demonstreert de installatie en gegevensanalyse van de test met behulp van videotrackingsoftware.
Protocol
Dit protocol is een fragment uit Sun and Chen, A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila, J. Vis. Exp. (2017).
1. Video-ondersteunde bewegingstracking
- Vul een Petrischaal met een diameter van 6 cm met transparant silicium elastomeer om de trackingarena te maken. Laat een ruimte van 3 mm tussen het silicium en het deksel van de schaal om de vliegen vrij te laten lopen, maar niet te vliegen.
- Verdoof elke keer vier vliegen van de schijn- of behandelde groep en plaats ze in de arena. Laat de vliegen 1 uur op 22 °C staan.
- Plaats een CCD-camera (Charge-Coupled Device) boven de arena's en neem 5 minuten op.
- Analyseer de opgenomen bewegingstrajecten met behulp van Ctrax-software (vrij verkrijgbaar bij Caltech). Exporteer de bijgehouden gegevens in een programmeertaal (bijv. Matlab)-compatibel formaat en analyseer de gegevens op basis van de afgelegde afstand per frame. Bereken de gemiddelde loopafstand voor elke vlieg en combineer deze met alle andere geregistreerde vliegen /groep om een gemiddelde cumulatieve afstand te verkrijgen die wordt afgelegd door de populatie van bestanden in dezelfde groep.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 60 mm Petri Dishes | Fisher Scientific | FB0875713A | Used as a tracking arenas |
| Flow Regulator | Genesee Scientific | 59-122WC | |
| Fine Brush | Genesee Scientific | 59-204 | |
| Flypad | Genesee Scientific | 59-114 | |
| Sylgard Silicone Elastomer | Dow Corning | 4019862 | |
| CCD Camera | Microsoft | HD-5000 | |
| Ctrax Walking Fly Tracker | Caltech | Ctrax 0.2.11 | |
| MATLAB Image Processing Toolbox | MATLAB | R2015b |
